不同粘液物质与胃癌关系的研究
摘要： 目的: 通过对胃癌及肠上皮化生中粘液成分的分析，探讨粘液类型与癌变的关系，为胃癌早期的诊断提供帮助。方法: 应用粘液组织化学方法(阿利辛蓝-雪夫氏法和高铁二胺-阿利辛蓝法)，对75例胃癌和60例慢性胃炎伴肠上皮化生所含粘液物质进行染色，将胃癌分为肠型(酸性粘液)及胃型(中性粘液)，将肠化分为大肠型(硫酸粘液)及小肠型(唾液酸粘液)。结果: 肠型胃癌及癌旁肠化以分泌硫酸粘液(大肠型)为主，慢性胃炎伴肠化及胃型胃癌以分泌唾液酸粘液(小肠型)为主,二者差异有统计学意义(P<0.01)。高中分化腺癌和低分化腺癌都以肠型胃癌为主，二者差异无统计学意义(P>0.05)。不同组织学类型的胃癌分泌的粘液物质类型差异无统计学意义(P>0.05)。结论: 含硫酸粘液的大肠型肠化生与胃癌的发生关系密切，加强对含硫酸粘液的慢性胃炎伴大肠型化生患者进行密切随访可能有利于胃癌的早期发现。
关键词： 胃癌； 肠化生； 粘液物质
Study on the relationship between the different mucin and gastric carcinoma
XIE Hui, WANG Li , GU Xia
(Department of Pathology，First Affiliated Hospital， Xinjiang Medical University, Urumqi 830054, China)
Abstract: Objective: To analyze mucin of gastric carcinoma and intestinal metaplasia secrected, to study which kind of mucin is closely relative with gastricarcinoma, which is helpful for finding early gastric carcinoma. Methods: Mucinhistochemical (ABPAS and HIDAB) were used to analyse the mucin secretion in 75 cases of gastric carcinomas with intestinal metaplasia and 60 cases of chronic gastritis with intestinal metaplasia. According to the difference of the mucin secretion, the gastric carcinomas were divied into intestinal type(acidity mucin) and gastric type(neutral mucin), and the intestinal metaplasia was divied into large intestinal type(sulphate mucin) and small intestinal type(unsulphate mucin). Results: Large intestinal type metaplasia with sulphate mucin was more common in metaplasia mucosa next to intestinal type of gastric carcinoma with unsulphate mucin than that in metaplasia mucosa next to gastric type of gastric carcinoma and chronic gastritis with intestinal mataplasia (P<0.01). There was no relation between the differenrial of gastric carcinoma and different mucinhistochemical types of gastric carcinoma (P>0.05).At the same time, there is no relation bewteen types of histology of gastric carcinoma and the types of mucin (P>0.05). Conclusion: The origination of intestinal type of gastric carcinoma is related to the intestinal metaplasia of gastric mucosa, especially to large intestinal type of metaplasia. Followup of the paients with large intestinal type of metaplasia will be of value in the discovery of early gastric carcinoma.
Key words: gastric carcinoma; mucin; intestinal metaplasia
胃癌是消化系统最多发的肿瘤，也是最常见的恶性肿瘤之一。在我国，胃癌的发病率和死亡率居各种恶性肿瘤的首位。因此胃癌的病因学、发病学及其防治是研究的重点。化生是一种分化成熟的细胞在刺激因素的作用下转化为另一种分化成熟细胞的过程。胃粘膜上皮肠上皮化生又称肠化(intestinal metaplasia IM)，是指胃粘膜上皮及腺上皮在病理情况下转变为肠粘膜上皮及腺上皮的过程。胃粘膜肠上皮化生与胃癌关系密切[1~3],研究肠上皮化生种类与癌变的关系有助于胃癌的早期诊断。本研究应用粘液组织化学染色技术，检测不同粘液物质在胃粘膜肠上皮化生和胃癌中的表达，探讨粘液物质类型与胃癌发生的关系，目的在于寻找一种简便可行的方法，分析胃粘膜活检标本，筛检出胃癌的高危人群，供临床跟踪随访，以便提高早期胃癌的诊断率。
1资料和方法
1.1一般资料收集新疆医科大学第一附属医院病理科2003～2004年间胃良恶性病变标本135 例，其中胃腺癌75例(高中分化腺癌44例，低分化腺癌31例;管状腺癌52例,粘液腺癌10例 )，胃粘膜肠化生60例。根据胃癌及肠化生组织所含粘液蛋白不同，参考文献[8,9]的方法,将胃癌分为肠型(含酸性粘液)、胃型(含中性粘液)和不定型(不含粘液)，将肠化分为小肠型(分泌唾液酸粘液)和大肠型(分泌硫酸粘液)。用正常胃粘膜、正常大肠和正常小肠作对照。
1.2试剂高铁二胺粘液组织化学染色试剂(天津化学试剂研究所产品);碱性品红(天津南开化工厂产品);阿利辛蓝,三氯化铁,高碘酸,偏重亚硫酸钠(均为上海化学试剂三厂产品)。
1.3方法所有标本经10%福尔马林固定,石蜡包埋,连续切片，厚5 μm，分别进行阿利辛蓝(ABPH 2.5)雪夫氏剂(PAS)和高铁二胺(HID)阿利辛蓝(ABPH 2.5)粘液染色。
1.4结果判定阿利辛蓝(ABPH2.5)雪夫氏剂(PAS)法：酸性粘液(肠型)蓝染,中性粘液(胃型)红染。高铁二胺(HID)阿利辛蓝(ABPH2.5)法：硫酸性粘液(大肠型)淡棕色至黑染,唾液酸性粘液(小肠型)蓝染。
1.5统计学处理应用SPSS11.0软件包对数据进行统计学分析，采用χ2检验，检验水准α=0.05。
2结果
2.1不同胃癌粘液类型与肿瘤分化程度的比较经ABPAS法检测，75例胃癌中有62例分泌酸性粘液(肠型胃癌)，10例分泌中性粘液(胃型胃癌)，3例无粘液分泌(不定型胃癌)。胃腺癌中，82.67%(62/75)为肠型胃癌，其中肠型胃癌在高中分化腺癌中占86.36%(38/44)，在低分化腺癌中占77.42 %(24/31)，而胃型胃癌和不定型胃癌所占的比例很小，为17.33%(13/75)。经χ2检验，高中分化腺癌与低分化腺癌的粘液组织化学分型差异无统计学意义(χ2=1.692 1, P>0.05)。结果见表1。
表1不同分化程度的胃癌粘液组织化学分型比较分化程度[略]
表2不同类型粘液物质在不同胃病变中的分布比较(略)
3讨论
人体中的各种腺体及其他许多组织、细胞均能分泌粘液物质，且所分泌的粘液物质基本相同，统称为粘液。由于组织细胞的功能状态与代谢活动的不同，粘液的化学结构和物理性质并不完全相同，所以染色结果各有差异。粘液物质分为中性粘多糖和酸性粘多糖，前者多见于胃粘膜的表面上皮、颌下腺和前列腺上皮等，后者多见于呼吸道和消化道的杯状细胞等。胃粘膜表面上皮分泌中性粘液，而胃的肠化生或肠型胃癌的癌细胞分泌酸性粘液，但胃型胃癌的癌细胞则分泌中性粘液。 长期以来，流行病学、病理学及前瞻性的研究表明，胃粘膜肠上皮化生与胃癌的发生关系密切[1～3]，但也有对此持反对意见者[4，5]。肠化生的由来及转归是众多学者关注的问题，到目前为止对IM细胞的来源仍有争议，多数学者认为IM细胞来源于胃腺颈部未分化干细胞，因为这些细胞有多向分化的潜能[7]。在某些病理情况下，胃粘膜上皮细胞可以失去理性再生和分化的机能而转变为肠型细胞，从而产生唾液酸粘液和硫酸粘液，并表现出形态结构和功能上的变异，使胃粘膜上皮不同程度地被异型肠型上皮所代替。在各种胃粘膜病变中IM检出率各有不同。杨光霖[7]的调查结果表明，人群中IM检出率为20%，并且随着年龄的增长检出率也随之增高。IM一旦形成，其转归可能因其类型和程度而异。分泌唾液酸粘液的小肠型肠化生有可能经过适当治疗而痊愈，而分泌硫酸粘液的大肠型肠化生则有可能进一步发展为不典型增生或癌变。随着免疫组化、电镜技术和粘液组化染色方法的发展和改进，人们对IM的研究日益深入。目前已有学者利用免疫组化、粘液组化染色和电镜技术对IM细胞进行研究，研究表明不同类型的IM与 胃癌之间的关系有差别，一般认为分泌硫酸粘液的大肠型化生与胃癌关系密切[8～11]。本文采用粘液组织化学法对胃癌及癌旁粘膜肠化生与慢性胃炎上皮肠化生进行了对比研究，结果显示慢性胃炎伴肠上皮化生以含唾液酸的小肠型化生为主， 胃癌旁粘膜肠化生以含硫酸粘液的大肠型化生为主，提示分泌硫酸粘液的大肠型肠化生与胃癌发生关系密切。本研究的粘液组化染色结果与文献[7，9]报道的基本一致。本研究还对胃癌分化程度及组织学类型与粘液物质类型的关系进行了对比观察，发现不同分化程度的胃癌分泌的粘液物质类型无统计学差异，胃癌组织学类型中管状腺癌和粘液腺癌分泌的粘液物质类型亦无统计学差异，提示胃癌分化程度及组织学类型与粘液物质类型的关系不密切，此结果可能与本实验的样本量小有关，有待于今后扩大样本量行进一步研究分析。本次实验结果表明，大肠型肠化生与肠型胃癌分泌的硫酸粘液物质类型差异有统计学意义。因此，建议在临床中对慢性胃炎伴肠上皮化生的病例应该进行常规粘液染色，以便及早发现分泌硫酸粘液的大肠型肠化生患者，并应对其进行随访观察，这将有利于胃癌的早期发现和早期诊断，从而提高胃癌的治疗效果。
参考文献:
[1]杨海鹰，王岩，董玉英，等.胃粘膜结肠型化生和小肠型化生对p21、p53、EGFR、PCNA及CEA的联合表达[J].肿瘤防治研究,2000，27(1)：1718.
[2]Stemmermann GN. Intestinal metaplasia of the stomach:A status report[J]. Cancer,1994,74:556.
[3]王丽冰，李秀娟，张尚紧，等.癌旁胃粘膜肠化与胃癌PCNA、癌基因蛋白产物同步检测对比分析[J]. 长治医学院学报,1997，11(4)：293295.
[4]Gregorio CD, Morandi P, Faante R, et al. Gastric dysplasia.A followup study[J]. Am J Gastroenterol , 1993,88:1704.
[5]Craanen ME, Bolck P, Dekker W, et al. Prevalence of subtypes of intestingal metaplasia in gastric antral mucosa[J].Dig Dis Sic,1991,36:1529.
[6]Lei DN, Yu JY. Types of mucosal metaplasia in relation to the histoginesis of gastric carcinoma[J]. Arch Pathol Lab Med,1984,108:220.
[7]杨光霖.胃粘膜肠化生类型及其在胃粘膜活检中的意义[J].临床与实验病理学杂志,1991,7(5):327330.
[8]周英发,沈琼,王敏,等.胃粘膜肠化和异型增生作为胃癌前兆的意义[J].胃肠病学和肝病学杂志,1998,7(1):4648.
[9]张亚琳,魏洪臣,田晨光，等.胃粘膜肠化与胃癌关系的粘液组织化学研究[J].中国肿瘤临床,1997,24(11):839840.
[10]刘勇,李启明,胡志坤,等.胃粘膜肠化生细胞增殖状态分型的研究[J].中国肿瘤临床,1997,24(12):892893.
[11]王东旭,房殿春,刘为纹，等.胃粘膜肠化生组织中P53,APC, Kras基因突变的研究[J].第三军医大学学报，1999,21(6):404405.
(新疆医科大学第一附属医院病理科，新疆乌鲁木齐830054), 百拇医药(谢辉 王莉 顾霞)
关键词： 胃癌； 肠化生； 粘液物质
Study on the relationship between the different mucin and gastric carcinoma
XIE Hui, WANG Li , GU Xia
(Department of Pathology，First Affiliated Hospital， Xinjiang Medical University, Urumqi 830054, China)
Abstract: Objective: To analyze mucin of gastric carcinoma and intestinal metaplasia secrected, to study which kind of mucin is closely relative with gastricarcinoma, which is helpful for finding early gastric carcinoma. Methods: Mucinhistochemical (ABPAS and HIDAB) were used to analyse the mucin secretion in 75 cases of gastric carcinomas with intestinal metaplasia and 60 cases of chronic gastritis with intestinal metaplasia. According to the difference of the mucin secretion, the gastric carcinomas were divied into intestinal type(acidity mucin) and gastric type(neutral mucin), and the intestinal metaplasia was divied into large intestinal type(sulphate mucin) and small intestinal type(unsulphate mucin). Results: Large intestinal type metaplasia with sulphate mucin was more common in metaplasia mucosa next to intestinal type of gastric carcinoma with unsulphate mucin than that in metaplasia mucosa next to gastric type of gastric carcinoma and chronic gastritis with intestinal mataplasia (P<0.01). There was no relation between the differenrial of gastric carcinoma and different mucinhistochemical types of gastric carcinoma (P>0.05).At the same time, there is no relation bewteen types of histology of gastric carcinoma and the types of mucin (P>0.05). Conclusion: The origination of intestinal type of gastric carcinoma is related to the intestinal metaplasia of gastric mucosa, especially to large intestinal type of metaplasia. Followup of the paients with large intestinal type of metaplasia will be of value in the discovery of early gastric carcinoma.
Key words: gastric carcinoma; mucin; intestinal metaplasia
胃癌是消化系统最多发的肿瘤，也是最常见的恶性肿瘤之一。在我国，胃癌的发病率和死亡率居各种恶性肿瘤的首位。因此胃癌的病因学、发病学及其防治是研究的重点。化生是一种分化成熟的细胞在刺激因素的作用下转化为另一种分化成熟细胞的过程。胃粘膜上皮肠上皮化生又称肠化(intestinal metaplasia IM)，是指胃粘膜上皮及腺上皮在病理情况下转变为肠粘膜上皮及腺上皮的过程。胃粘膜肠上皮化生与胃癌关系密切[1~3],研究肠上皮化生种类与癌变的关系有助于胃癌的早期诊断。本研究应用粘液组织化学染色技术，检测不同粘液物质在胃粘膜肠上皮化生和胃癌中的表达，探讨粘液物质类型与胃癌发生的关系，目的在于寻找一种简便可行的方法，分析胃粘膜活检标本，筛检出胃癌的高危人群，供临床跟踪随访，以便提高早期胃癌的诊断率。
1资料和方法
1.1一般资料收集新疆医科大学第一附属医院病理科2003～2004年间胃良恶性病变标本135 例，其中胃腺癌75例(高中分化腺癌44例，低分化腺癌31例;管状腺癌52例,粘液腺癌10例 )，胃粘膜肠化生60例。根据胃癌及肠化生组织所含粘液蛋白不同，参考文献[8,9]的方法,将胃癌分为肠型(含酸性粘液)、胃型(含中性粘液)和不定型(不含粘液)，将肠化分为小肠型(分泌唾液酸粘液)和大肠型(分泌硫酸粘液)。用正常胃粘膜、正常大肠和正常小肠作对照。
1.2试剂高铁二胺粘液组织化学染色试剂(天津化学试剂研究所产品);碱性品红(天津南开化工厂产品);阿利辛蓝,三氯化铁,高碘酸,偏重亚硫酸钠(均为上海化学试剂三厂产品)。
1.3方法所有标本经10%福尔马林固定,石蜡包埋,连续切片，厚5 μm，分别进行阿利辛蓝(ABPH 2.5)雪夫氏剂(PAS)和高铁二胺(HID)阿利辛蓝(ABPH 2.5)粘液染色。
1.4结果判定阿利辛蓝(ABPH2.5)雪夫氏剂(PAS)法：酸性粘液(肠型)蓝染,中性粘液(胃型)红染。高铁二胺(HID)阿利辛蓝(ABPH2.5)法：硫酸性粘液(大肠型)淡棕色至黑染,唾液酸性粘液(小肠型)蓝染。
1.5统计学处理应用SPSS11.0软件包对数据进行统计学分析，采用χ2检验，检验水准α=0.05。
2结果
2.1不同胃癌粘液类型与肿瘤分化程度的比较经ABPAS法检测，75例胃癌中有62例分泌酸性粘液(肠型胃癌)，10例分泌中性粘液(胃型胃癌)，3例无粘液分泌(不定型胃癌)。胃腺癌中，82.67%(62/75)为肠型胃癌，其中肠型胃癌在高中分化腺癌中占86.36%(38/44)，在低分化腺癌中占77.42 %(24/31)，而胃型胃癌和不定型胃癌所占的比例很小，为17.33%(13/75)。经χ2检验，高中分化腺癌与低分化腺癌的粘液组织化学分型差异无统计学意义(χ2=1.692 1, P>0.05)。结果见表1。
表1不同分化程度的胃癌粘液组织化学分型比较分化程度[略]
表2不同类型粘液物质在不同胃病变中的分布比较(略)
3讨论
人体中的各种腺体及其他许多组织、细胞均能分泌粘液物质，且所分泌的粘液物质基本相同，统称为粘液。由于组织细胞的功能状态与代谢活动的不同，粘液的化学结构和物理性质并不完全相同，所以染色结果各有差异。粘液物质分为中性粘多糖和酸性粘多糖，前者多见于胃粘膜的表面上皮、颌下腺和前列腺上皮等，后者多见于呼吸道和消化道的杯状细胞等。胃粘膜表面上皮分泌中性粘液，而胃的肠化生或肠型胃癌的癌细胞分泌酸性粘液，但胃型胃癌的癌细胞则分泌中性粘液。 长期以来，流行病学、病理学及前瞻性的研究表明，胃粘膜肠上皮化生与胃癌的发生关系密切[1～3]，但也有对此持反对意见者[4，5]。肠化生的由来及转归是众多学者关注的问题，到目前为止对IM细胞的来源仍有争议，多数学者认为IM细胞来源于胃腺颈部未分化干细胞，因为这些细胞有多向分化的潜能[7]。在某些病理情况下，胃粘膜上皮细胞可以失去理性再生和分化的机能而转变为肠型细胞，从而产生唾液酸粘液和硫酸粘液，并表现出形态结构和功能上的变异，使胃粘膜上皮不同程度地被异型肠型上皮所代替。在各种胃粘膜病变中IM检出率各有不同。杨光霖[7]的调查结果表明，人群中IM检出率为20%，并且随着年龄的增长检出率也随之增高。IM一旦形成，其转归可能因其类型和程度而异。分泌唾液酸粘液的小肠型肠化生有可能经过适当治疗而痊愈，而分泌硫酸粘液的大肠型肠化生则有可能进一步发展为不典型增生或癌变。随着免疫组化、电镜技术和粘液组化染色方法的发展和改进，人们对IM的研究日益深入。目前已有学者利用免疫组化、粘液组化染色和电镜技术对IM细胞进行研究，研究表明不同类型的IM与 胃癌之间的关系有差别，一般认为分泌硫酸粘液的大肠型化生与胃癌关系密切[8～11]。本文采用粘液组织化学法对胃癌及癌旁粘膜肠化生与慢性胃炎上皮肠化生进行了对比研究，结果显示慢性胃炎伴肠上皮化生以含唾液酸的小肠型化生为主， 胃癌旁粘膜肠化生以含硫酸粘液的大肠型化生为主，提示分泌硫酸粘液的大肠型肠化生与胃癌发生关系密切。本研究的粘液组化染色结果与文献[7，9]报道的基本一致。本研究还对胃癌分化程度及组织学类型与粘液物质类型的关系进行了对比观察，发现不同分化程度的胃癌分泌的粘液物质类型无统计学差异，胃癌组织学类型中管状腺癌和粘液腺癌分泌的粘液物质类型亦无统计学差异，提示胃癌分化程度及组织学类型与粘液物质类型的关系不密切，此结果可能与本实验的样本量小有关，有待于今后扩大样本量行进一步研究分析。本次实验结果表明，大肠型肠化生与肠型胃癌分泌的硫酸粘液物质类型差异有统计学意义。因此，建议在临床中对慢性胃炎伴肠上皮化生的病例应该进行常规粘液染色，以便及早发现分泌硫酸粘液的大肠型肠化生患者，并应对其进行随访观察，这将有利于胃癌的早期发现和早期诊断，从而提高胃癌的治疗效果。
参考文献:
[1]杨海鹰，王岩，董玉英，等.胃粘膜结肠型化生和小肠型化生对p21、p53、EGFR、PCNA及CEA的联合表达[J].肿瘤防治研究,2000，27(1)：1718.
[2]Stemmermann GN. Intestinal metaplasia of the stomach:A status report[J]. Cancer,1994,74:556.
[3]王丽冰，李秀娟，张尚紧，等.癌旁胃粘膜肠化与胃癌PCNA、癌基因蛋白产物同步检测对比分析[J]. 长治医学院学报,1997，11(4)：293295.
[4]Gregorio CD, Morandi P, Faante R, et al. Gastric dysplasia.A followup study[J]. Am J Gastroenterol , 1993,88:1704.
[5]Craanen ME, Bolck P, Dekker W, et al. Prevalence of subtypes of intestingal metaplasia in gastric antral mucosa[J].Dig Dis Sic,1991,36:1529.
[6]Lei DN, Yu JY. Types of mucosal metaplasia in relation to the histoginesis of gastric carcinoma[J]. Arch Pathol Lab Med,1984,108:220.
[7]杨光霖.胃粘膜肠化生类型及其在胃粘膜活检中的意义[J].临床与实验病理学杂志,1991,7(5):327330.
[8]周英发,沈琼,王敏,等.胃粘膜肠化和异型增生作为胃癌前兆的意义[J].胃肠病学和肝病学杂志,1998,7(1):4648.
[9]张亚琳,魏洪臣,田晨光，等.胃粘膜肠化与胃癌关系的粘液组织化学研究[J].中国肿瘤临床,1997,24(11):839840.
[10]刘勇,李启明,胡志坤,等.胃粘膜肠化生细胞增殖状态分型的研究[J].中国肿瘤临床,1997,24(12):892893.
[11]王东旭,房殿春,刘为纹，等.胃粘膜肠化生组织中P53,APC, Kras基因突变的研究[J].第三军医大学学报，1999,21(6):404405.
(新疆医科大学第一附属医院病理科，新疆乌鲁木齐830054), 百拇医药(谢辉 王莉 顾霞)