气相色谱法测定杀菌剂咪鲜胺及其代谢物在水稻中的残留量
来稿摘登
气相色谱法测定杀菌剂咪鲜胺及其代谢物在水稻中的残留量
韩丽君
3
钱传范 江才鑫 王武杰
(中国农业大学理学院,农业部农药化学及使用技术重点开放实验室,北京100094)
2004205227收稿; 2005201224接受
1 引 言
咪鲜胺(p rochloraz)是一种咪唑类广谱杀菌剂,主要通过抑制甾醇的生物合成而起作用。咪鲜胺在环境中首先降解
成为BTS 44 595和BTS 44 596,最后都降解为2, 4, 62三氯苯酚。尽管咪鲜胺属低毒杀菌剂,但其最终代谢产物2, 4, 62三
氯苯酚是环境中的重要污染物之一。因此,在进行咪鲜胺残留研究时,应同时检测其代谢产物。
咪鲜胺的残留检测方法有HPLC法和GC法,国内有采用GC方法研究咪鲜胺及其代谢物在柑橘上的残留的报道。
目前尚未有咪鲜胺在水稻上的残留分析报道。本实验先将咪鲜胺及代谢物在高温下与吡啶盐酸盐反应,转化为最终代
谢物2, 4, 62三氯苯酚,然后用GC测定2, 4, 62三氯苯酚的量,即可同时检测水稻中咪鲜胺及其代谢物的残留量。
2 实验部分
2. 1 仪器及试剂 HP 4890D气相色谱仪(带ECD检测器) ;DS200高速组织捣碎机; DüCH I R2114旋转蒸发仪; DWT290
型植物粉碎机;MW1型振荡器;沙浴锅。咪鲜胺标准品(质量分数为98. 3% ) 、2, 4, 62三氯苯酚标准品(质量分数为
9810% ) ,均由中国农科院植保所提供;丙酮、甲苯、二氯甲烷、石油醚、正己烷、吡啶盐酸盐等均为分析纯试剂。
2. 2 实验方法 植株样品经粉碎称取5 g,土壤样品过筛后称取10 g,分别置于三角瓶中,加5 mL饱和食盐水, 5 mL蒸
馏水, 2 mL 1. 0 mol/L盐酸和60 mL丙酮振荡1 h,抽滤。将滤液减压蒸去丙酮,转入分液漏斗,加饱和食盐水40 mL,蒸
馏水60 mL,然后用60 mL二氯甲烷萃取两次。有机相减压浓缩至5 mL,转入25 mL反应瓶中,继续浓缩近干,吹干。在
反应瓶里,加吡啶盐酸盐8 g和少量沸石,接冷凝管置沙浴中于220～250℃反应1 h,冷却后加40 mL蒸馏水将反应液转
移至分液漏斗中,加入1 mL 1 mol/L盐酸,分别用石油醚2甲苯(16 mL + 4 mL)和石油醚2甲苯(18 mL + 2 mL) 萃取。合
并有机相,用0. 1 mol/L NaOH溶液50 mL提取两次,弃有机相。水相用5 mL 1 mol/L盐酸酸化后,用30 mL石油醚萃取
两次。有机相减压浓缩至近干,用正己烷定容至10 mL, GC2ECD测定。
3 结果与讨论
3. 1 样品前处理方法的选择 在提取剂中加入少量的酸能提高回收率,尤其是对于土壤和稻秆样品,在不加酸的情况
下回收率较差。提取液需要经初步净化,否则在高温下转化分解的过程中少量杂质炭化,转化产物难以完全转移,影响
回收率。咪鲜胺及其代谢物转化为2, 4, 62三氯苯酚后,作者曾试图采用弗罗里硅土净化柱和硅胶型固相萃取柱进行净
化,但净化效果不好,色谱图杂峰很多,影响残留量的测定。根据2, 4, 62三氯苯酚在不同酸碱条件下的分配差异,采用多
次酸碱转化和液液分配,达到净化的目的。虽然前处理过程略微复杂,但是样品经前处理后,色谱图杂质较少,净化效果
很好,而且采用本方法能一次性地将母体及其代谢物全部检测出来。
3. 2 分解转化率测定 实验中,咪鲜胺是否完全转化成2, 4, 62三氯苯酚将直接影响方法的可靠性和准确度,因此,实验
进行了分解转化率测定。添加19. 00 mg/L咪鲜胺标准溶液1 mL,置于25 mL反应瓶中,按前述方法测定三氯苯酚的含
量。结果表明, 3次测定的转化率均接近100% ,说明咪鲜胺完全得到了转化,将咪鲜胺转化成代谢产物后进行测定是可
行的。但是当样本中同时存在其他也能转化成为2, 4, 62三氯苯酚的污染源时,检测结果将会偏高。
3. 3 线性及灵敏度 配制一系列标准溶液绘制标准曲线,回归方程为Y = 56. 85 X + 10183,相关系数r = 0. 9995,符合测
定要求。在所建立的色谱条件下, 2, 4, 62三氯苯酚的保留时间为9. 5 min,最小检出量为0. 01 ng,色谱图中杂峰较少。咪
鲜胺在稻苗、稻米和土壤中最低检出浓度均为0. 02 mg/kg,在稻秆中为0. 04 mg/kg。目前咪鲜胺在水稻中的最高残留限
量只有台湾省有规定,为0. 5 mg/kg,本方法的检出限远低于该值。
3. 4 回收率与精密度 在稻米、稻苗、稻秆或土壤空白样本中添加咪鲜胺标准溶液,振荡平衡10min后测定,平均添加
回收率为72. 9%～103. 4%;相对标准偏差为1. 46%～9. 38% ,符合残留分析的要求。
第33卷
2005年7月
分析化学( FENXIHUAXUE) 来稿摘登
Chinese Journal of Analytical Chemistry
第7期
1049, http://www.100md.com(韩丽君 钱传范 江才鑫 王武杰)
气相色谱法测定杀菌剂咪鲜胺及其代谢物在水稻中的残留量
韩丽君
3
钱传范 江才鑫 王武杰
(中国农业大学理学院,农业部农药化学及使用技术重点开放实验室,北京100094)
2004205227收稿; 2005201224接受
1 引 言
咪鲜胺(p rochloraz)是一种咪唑类广谱杀菌剂,主要通过抑制甾醇的生物合成而起作用。咪鲜胺在环境中首先降解
成为BTS 44 595和BTS 44 596,最后都降解为2, 4, 62三氯苯酚。尽管咪鲜胺属低毒杀菌剂,但其最终代谢产物2, 4, 62三
氯苯酚是环境中的重要污染物之一。因此,在进行咪鲜胺残留研究时,应同时检测其代谢产物。
咪鲜胺的残留检测方法有HPLC法和GC法,国内有采用GC方法研究咪鲜胺及其代谢物在柑橘上的残留的报道。
目前尚未有咪鲜胺在水稻上的残留分析报道。本实验先将咪鲜胺及代谢物在高温下与吡啶盐酸盐反应,转化为最终代
谢物2, 4, 62三氯苯酚,然后用GC测定2, 4, 62三氯苯酚的量,即可同时检测水稻中咪鲜胺及其代谢物的残留量。
2 实验部分
2. 1 仪器及试剂 HP 4890D气相色谱仪(带ECD检测器) ;DS200高速组织捣碎机; DüCH I R2114旋转蒸发仪; DWT290
型植物粉碎机;MW1型振荡器;沙浴锅。咪鲜胺标准品(质量分数为98. 3% ) 、2, 4, 62三氯苯酚标准品(质量分数为
9810% ) ,均由中国农科院植保所提供;丙酮、甲苯、二氯甲烷、石油醚、正己烷、吡啶盐酸盐等均为分析纯试剂。
2. 2 实验方法 植株样品经粉碎称取5 g,土壤样品过筛后称取10 g,分别置于三角瓶中,加5 mL饱和食盐水, 5 mL蒸
馏水, 2 mL 1. 0 mol/L盐酸和60 mL丙酮振荡1 h,抽滤。将滤液减压蒸去丙酮,转入分液漏斗,加饱和食盐水40 mL,蒸
馏水60 mL,然后用60 mL二氯甲烷萃取两次。有机相减压浓缩至5 mL,转入25 mL反应瓶中,继续浓缩近干,吹干。在
反应瓶里,加吡啶盐酸盐8 g和少量沸石,接冷凝管置沙浴中于220～250℃反应1 h,冷却后加40 mL蒸馏水将反应液转
移至分液漏斗中,加入1 mL 1 mol/L盐酸,分别用石油醚2甲苯(16 mL + 4 mL)和石油醚2甲苯(18 mL + 2 mL) 萃取。合
并有机相,用0. 1 mol/L NaOH溶液50 mL提取两次,弃有机相。水相用5 mL 1 mol/L盐酸酸化后,用30 mL石油醚萃取
两次。有机相减压浓缩至近干,用正己烷定容至10 mL, GC2ECD测定。
3 结果与讨论
3. 1 样品前处理方法的选择 在提取剂中加入少量的酸能提高回收率,尤其是对于土壤和稻秆样品,在不加酸的情况
下回收率较差。提取液需要经初步净化,否则在高温下转化分解的过程中少量杂质炭化,转化产物难以完全转移,影响
回收率。咪鲜胺及其代谢物转化为2, 4, 62三氯苯酚后,作者曾试图采用弗罗里硅土净化柱和硅胶型固相萃取柱进行净
化,但净化效果不好,色谱图杂峰很多,影响残留量的测定。根据2, 4, 62三氯苯酚在不同酸碱条件下的分配差异,采用多
次酸碱转化和液液分配,达到净化的目的。虽然前处理过程略微复杂,但是样品经前处理后,色谱图杂质较少,净化效果
很好,而且采用本方法能一次性地将母体及其代谢物全部检测出来。
3. 2 分解转化率测定 实验中,咪鲜胺是否完全转化成2, 4, 62三氯苯酚将直接影响方法的可靠性和准确度,因此,实验
进行了分解转化率测定。添加19. 00 mg/L咪鲜胺标准溶液1 mL,置于25 mL反应瓶中,按前述方法测定三氯苯酚的含
量。结果表明, 3次测定的转化率均接近100% ,说明咪鲜胺完全得到了转化,将咪鲜胺转化成代谢产物后进行测定是可
行的。但是当样本中同时存在其他也能转化成为2, 4, 62三氯苯酚的污染源时,检测结果将会偏高。
3. 3 线性及灵敏度 配制一系列标准溶液绘制标准曲线,回归方程为Y = 56. 85 X + 10183,相关系数r = 0. 9995,符合测
定要求。在所建立的色谱条件下, 2, 4, 62三氯苯酚的保留时间为9. 5 min,最小检出量为0. 01 ng,色谱图中杂峰较少。咪
鲜胺在稻苗、稻米和土壤中最低检出浓度均为0. 02 mg/kg,在稻秆中为0. 04 mg/kg。目前咪鲜胺在水稻中的最高残留限
量只有台湾省有规定,为0. 5 mg/kg,本方法的检出限远低于该值。
3. 4 回收率与精密度 在稻米、稻苗、稻秆或土壤空白样本中添加咪鲜胺标准溶液,振荡平衡10min后测定,平均添加
回收率为72. 9%～103. 4%;相对标准偏差为1. 46%～9. 38% ,符合残留分析的要求。
第33卷
2005年7月
分析化学( FENXIHUAXUE) 来稿摘登
Chinese Journal of Analytical Chemistry
第7期
1049, http://www.100md.com(韩丽君 钱传范 江才鑫 王武杰)