某些碱性吩嗪染料与肝素相互作用的共振瑞利散射光谱研究

    刘绍璞

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    张筑元 胡小莉 刘忠芳 王 芬

    (西南师范大学化学化工学院,重庆400715)

    摘 要 在pH为6. 6～7. 2、6. 0～7. 0和5. 2～6. 4的介质中,中性红(NR) 、藏红T( ST)和酚藏花红( PS)等

    碱性吩嗪染料与肝素反应形成复合物,使溶液共振瑞利散射(RRS)增强,并出现新的RRS光谱。其最大散射

    峰分别位于600 nm (NR体系) 、568 nm ( ST体系)和560 nm ( PS体系) ,其中以NR体系灵敏度最高。它对肝

    素的检出限(3σ)为0. 80μg/L。研究了适宜的反应条件和影响因素,并以中性红体系为例,考察了共存物质

    的影响,表明方法有较好的选择性,用于肝素钠注射液效价的测定,结果较好。

    关键词 肝素,共振瑞利散射,碱性吩嗪染料

    2004207231收稿; 2005201231接受

    本文系国家自然科学基金资助项目(No. 20175018、20475045)

    1 引 言

    肝素是一种重要的蛋白多糖,广泛存在于动物组织中。肝素在临床上主要作为抗凝剂使用。由于

    不同疾病最适宜剂量不同,临床上需进行监控。因此,研究肝素的定量测定有重要意义。

    测定肝素常使用生物法[ 1 ] 、分光光度法[ 2～5 ] 、荧光法[ 6 ] 、HPLC法[ 7, 8 ]和毛细管电泳法[ 9 ] 。其中分光

    光度法因操作简便、仪器价廉而得到较多的研究和应用,但是用于痕量肝素的测定,其灵敏度尚显不足。

    近年来,共振瑞利散射(RRS)作为一种新兴的分析技术,因其操作简便易行和高灵敏度而受到人们

    的关注。它在生物大分子(核酸[ 10 ] 、蛋白质[ 11 ] ) 、药物[ 12～14 ] 、金属和非金属离子[ 15 ]的测定方面得到越

    来越多的应用。文献[ 16, 17 ]曾报道用某些碱性二苯基萘基甲烷染料和某些吩噻嗪类染料RRS法测定

    肝素,不同染料对于肝素的检出限在26. 0～3. 4μg/L之间。实验发现中性红(NR) 、藏红T( ST)和酚藏

    花红( PS)等碱性吩嗪染料阳离子也能借静电引力和疏水作用力等与肝素大阴离子形成结合产物,并使

    RRS显著增强,其中中性红灵敏度最高,对肝素的检出限可达0. 8μg/L,更适用于痕量肝素的测定。本

    实验研究了肝素钠与这类碱性吩嗪染料的反应条件和反应产物的光谱特征,并以中性红为例研究了共 ......