第32 卷

    2004 年5 月

    分析化学(FENXI HUAXUE) 研究报告

    Chinese Journal of Analytical Chemistry

    第5 期

    615～618

    荧光法研究秋水仙碱和牛血清白蛋白的相互结合作用

    刘永明3 李桂芝 孙希芬

    (烟台大学化学院,烟台264005)

    摘 要 用荧光光谱法、分光光度法研究了水溶液中秋水仙碱与牛血清白蛋白(BSA) 的相互结合反应。研究

    表明:二者以摩尔比1∶1 牢固结合,其平衡常数K0 = 1. 92 ×105 L/ mol。根据FÊrster 非辐射能量转移机理,求

    算了给体(BSA) 与受体(秋水仙碱) 间距离r = 3. 63 nm 和能量转移效率E = 0. 17。实验表明:秋水仙碱与牛

    血清白蛋白的相互结合作用为单一的荧光静态猝灭过程。

    关键词 秋水仙碱,牛血清白蛋白,荧光猝灭,结合反应

    2003206214 收稿;2003212226 接受

    1 引 言

    秋水仙碱(colchicine) 是从欧洲的百合科植物秋水仙( Colchicum aut umnale L . ) 的球茎中分离而得

    到的一种卓酚酮类生物碱,也可从多种植物中提取。秋水仙碱可用于治疗痛风,对某些恶性肿瘤亦有较

    好的疗效1 。近年来随着人们对其了解的不断深入,秋水仙碱在预防与治疗家族性地中海热、肾脏淀

    粉样变、某些皮肤病及纤维化性疾病等方面均显示较好的应用前景2 。据报道秋水仙碱可与血浆蛋白

    结合而有高的生物利用率,并且可以通过与微管蛋白的结合起到抑制细胞的增殖、分化、运动和物质运

    输等作用3 。

    白蛋白是主要的血清蛋白,可与许多内源、外源性化合物结合4 。本实验应用分子荧光法研究了

    牛血清白蛋白(BSA) 与秋水仙碱的结合反应,计算了其平衡常数及结合点位,并根据能量转移机制计算

    了秋水仙碱与BSA 结合时的作用距离。对探讨秋水仙碱的药物作用机理提供了可资参考的实验数据

    与理论根据。

    2 实验部分

    2. 1 仪器和试剂

    850 型荧光光度计和U23400 型UV2Vis 分光光度计(均为日本日立公司产品) ;高纯水制备仪(日

    本Millipore 公司) 。

    秋水仙碱(C12H25NO6 ,399. 5 ,上海化学试剂供应站) ,配制成1 ×10 - 3 mol/ L 储备液;牛血清白蛋白 ......