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编号:10856111
带有蛋白转导结构域的bcr/abl癌蛋白片段表达及其跨膜转运
http://www.100md.com 《第四军医大学学报》 2001年第7期
大肠杆菌,,蛋白转导;bcr,abl;慢性粒细胞白血病;基因表达;大肠杆菌,1材料和方法,2结果,3讨论,参考文献:
     关键词: 蛋白转导;bcr/abl;慢性粒细胞白血病;基因表达;大肠杆菌

    人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)-1编码的反式激活蛋白TAT具有独特的跨膜运转方式,而且有转导速度快,效率高的特点,被称为蛋白转导结构域(protein transduction domain,PTD)[1,2] .本研究用PCR扩增了慢性粒细胞白血病慢粒bcr/abl融合蛋白的基因片段,在其5′端融合PTD结构域的编码区后在大肠杆菌中进行了表达.表达产物经纯化后,加入培养的HL60细胞,表达的蛋白可直接进入细胞内.这一结果为用外源蛋白负载(Loading)免疫细胞提供了新的途径.

    1 材料和方法

    1.1 DNA重组

    人工合成(宝生物工程公司)编码HIV-1TAT蛋白的PTD结构域的DNA片段(序列是:有意义链:5′-TATGTATGGTAGGAAGAAACGTCGACAGCGTCGTCG GC;反意义链:5′-TCGAGCCGACGACGCTGTCGACGTTT-CTTCCTACCATACA) ......

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