关键词: 膀胱肿瘤;热休克蛋白质类70;克隆，分子;T 24 细胞;细胞培养

    摘 要:目的 筛选耐热T24 细胞亚克隆，研究其生物学特性变化. 方法 用热暴露筛选，联合应用免疫荧光化学方法及流式细胞仪筛选高表达HSP70的T24 细胞亚克隆，计数法测定其细胞生长曲线及细胞倍增时间，流式细胞仪分析其细胞周期的变化.分子生物学方法及细胞化学方法观察有无凋亡出现. 结果 有限稀释法筛选获取耐热T24 单克隆细胞株(HrT24 )共26株，应用免疫荧光法筛选出HSP70阳性克隆12株，取荧光较强的两株命名为HrT24e ，HrT24j ，FCM(平均荧光强度为0.29)检测HSPs分子的阳性表达率T24 ，HrT24e ，HrT24j 分别为2.4%，37.6%，65.8%.细胞周期分析显示T24 ，HrT24e ，HrT24j 增殖指数(proliferation index，PI分别为44.3%，39.0%，38.5%，HrT24e 与T24相比差异有显著意义(Yates corrected，χ2 =5.56，P=0.0183)，HrT24e 与T24j 相比差异无显著意义(Yates corrected，χ2 =0.03，P=0.8543).HrT24e 与HrT24j 凋亡率分别为4.7%，5.9%.分子生物学方法观察到DNA凋亡梯带出现，细胞化学方法观察到凋亡小体. 结论 HrT24 细胞HSP70表达增加，出现了一定的增殖抑制现象，同时观察到细胞凋亡，推测它们有较好的免疫原性.

    Biological characteristics of human cystic cancer cell line T24 with higher HSP70expression

    YAN Quan-Jian，WANG He ，YAN Xiao-Jun ，ZHANG Yu-Mei ，WANG Peng-Fei，CHEN Bao-Qi

    ，SHAO Guo-Xing，SU Cheng-Zhi

    1 Department of Urology，Xijing Hospital，2 Institute of Genic Diagnosis of Chinese PLA，Fourth Military Medical University，Xi'an710033，China

    Keywords:bladder neoplasm;heat-shock proteins70;cloning，molecular;T24 cells;cell culture ......