关键词: 肝癌细胞;免疫组化;消减免疫

    1 材料和方法

    1.1 材料

    ①实验动物:BALB/c雌性小鼠8wk龄，体质量18～20g，购自本校实验动物中心;②组织细胞:正常成人新鲜肝组织，肝癌组织取自本校外科手术标本，部分组织以中性福尔马林固定，低温石蜡包埋切片，4℃保存备用.Sp2/0细胞，肝癌细胞株SMMC-7721，HHCC，HePG2由本室保存;③主要试剂:HT，HAT选择培养基RPMI1640培养基购自Sigma公司，环磷酰胺注射液系连云港德瑞制药有限公司产品，Envision购自美国DAKO公司.

    1.2 方法

    ①正常成人肝组织于200目镍网中研磨后，无菌生理盐水悬浮制成肝细胞悬液，免疫小鼠，每只小鼠于ip0.3mL(7×106 )个细胞.于免疫后10min ......