关键词: 蛋白质;电泳;三氯乙酸;蛋白质结构

     0 引言

    SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)是蛋白质化学中最常用的研究技术之一，常用于检测蛋白质的纯度和测定蛋白质的分子量.当生物样品的浓度很低或样品中盐浓度>0.1mol·L-1 ，需要对待测样品溶液进行浓缩或除盐.最常用的方法是三氯乙酸(TCA)沉淀法.实验中我们观察到TCA对蛋白质的结构稳定性有较大的影响，它可使蛋白质分子间相互聚集或断裂成碎片，干扰分析结果的准确性.本研究选取了几种蛋白质，使用TCA沉淀，然后在不同时间进行电泳分析和活性测定，探讨TCA对蛋白质结构稳定性的影响.

     1 材料和方法

    1.1 材料

    三氯乙酸、丙酮均为分析纯试剂，由西安化学试剂厂.丙烯酰胺、双丙烯酰胺、考马斯亮兰G-250、十二烷基硫酸钠(SDS)、牛血清白蛋白(BSA)、胰蛋白酶(Try)、木瓜蛋白酶(Pap) ......