螺杆菌_____螺杆菌，幽门；cagA基因；基因表达

球形幽门螺杆菌cagA基因原核表达质粒的构建及表达

http://www.100md.com 《第四军医大学学报》 2004年第16期

螺杆菌,,螺杆菌，幽门；cagA基因；基因表达,0引言,1材料和方法,2结果,3讨论,【参考文献】

     【关键词】螺杆菌，幽门；cagA基因；基因表达

     0引言

    球形幽门螺杆菌是H.pylori为抗逆生存而形成的多形性改变，其致病性尚存在争议，多数学者认为H.pylori球形体可能与H.pylori感染迁延不愈、反复发作及流行传播密切相关[1]. 目前有关球形H. pylori致病力和毒力基因方面的研究尚未见有系统的研究报道. 我们曾成功地克隆了球形H.pylori的cagA全长基因并进行了测序，证明球形H.pylori具有完整的cagA基因. 为进一步研究球形H.pylori cagA蛋白的生物学特性及为DNA疫苗奠定基础，我们构建了球形H.pylori cagA基因的原核表达质粒并在大肠杆菌中获得了高效表达.

     1材料和方法

    1.1材料

    E.coli BL21菌株和含有cagA基因的克隆测序质粒pMD18TcagA由本室构建保存，原核表达质粒pET32a(+)，BamHⅠ， SacⅠ， LA Taq DNA聚合酶、T4 DNA连接酶、4种dNTP，IPTG、丙烯酰胺、DNA凝胶回收试剂盒、QIAprep Spin Miniprep Kit等均购自大连宝生物公司.

    1.2方法

    用BamHⅠ+SacⅠ双酶切重组质粒pMD18TcagA ......

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