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编号:10872359
应用红细胞花环形成试验筛选肿瘤膜抗原单克隆抗体
http://www.100md.com 《第四军医大学学报》 2004年第14期
肿瘤,,红细胞花环形成试验;抗体,单克隆;抗原,肿瘤,0引言,1材料和方法,2结果,3讨论,【参考文献】
     【关键词】 红细胞花环形成试验;抗体,单克隆;抗原,肿瘤

     0引言

    红细胞花环形成试验(rosette assay)中被检细胞处于生长状态,表面抗原表达密度较高,并保持在一种天然分子的构象,因此与免疫组化方法相比,敏感性高,特异性好. 在用肿瘤细胞或新鲜组织为免疫原制备和筛选mAb中有很大的应用价值[1]. 我们对花环形成试验在肿瘤膜抗原mAb制备上的应用进行了探讨,并与间接免疫荧光染色和流式细胞术分析的筛选方法进行了比较.

     1 材料和方法

    1.1材料

    COLO205, CACO2, SW480(结肠癌),HEP2(喉癌),HHCC(肝癌),WISH(人羊膜上皮)均为本室保存的细胞系,复苏后用100 mL/L FCS的RPMI1640培养. 检测时用60孔小盘(NUNC)培养细胞;兔抗鼠的多抗血清购自DAKO公司; CrCl3用0.15 mol/L NaCl配制成10 g/L,调整pH值到4.0,作为储存液避光保存,用前稀释成0.1 g/L. Alsevers 液 ......

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