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    HPLC 法测定黄柏中小檗碱的含

    量

    刘传玲 , 董丽萍 , 丛永壮 (山东省威海市药品检

    验所 , 264200)

    中图分类号: R92712 文献标识码: A

    文章编号: 1002 - 7777 (2005) 06 - 0383 - 02

    黄柏具清热燥湿 , 泻火除蒸 , 解毒疗疮的功效 , 收载

    于《中国药典》2000 年版一部 , 无含量测定项目。黄柏含

    小檗碱 , 木兰花碱等多种生物碱[1 ]。为控制黄柏的内在质

    量 , 本文建立 HPLC法测定盐酸小檗碱含量的方法。本方

    法快速 , 方便 , 可靠。

    1 仪器与试药

    Agilent 1100 型组合式全自动高效液相色谱仪。黄柏

    药材 (市售) , 盐酸小檗碱对照品 (中国药品生物制品检定

    所 , 供含量测定用) , 乙腈为色谱纯 , 其他试剂均为分析

    纯。

    2 方法与结果

    211 色谱条件

    色谱柱: kromasil C18柱 (416 ×250mm , 5μm) , 流动

    相: 01033mol · L - 1

    磷酸二氢钾溶液 - 乙腈 (60 ∶40) , 流

    速: 1ml ·min - 1

    , 柱温: 室温 , 检测波长: 265nm , 进样

    量: 10 μl , 用外标法检测。理论板数: 按盐酸小檗碱峰计 ,不低于 5000。

    212 供试品溶液制备

    取本品中粉约 015g (同时另取本品粉末测定水分) ,精密称定 , 置 100ml 量瓶中 , 加盐酸 - 甲醇 (1 ∶100) 约

    95ml , 60 ℃ 水浴中加热 15 分钟 , 取出 , 超声处理 30 分钟 ,室温放置过夜 , 加甲醇至刻度 , 摇匀 , 滤过 , 精密量取续

    滤液 2ml , 加甲醇稀释成 10ml , 作为供试品溶液。

    213 对照品溶液的制备

    精密称取 100 ℃干燥 5 小时的盐酸小檗碱对照品

    0100808g , 至 100ml 量瓶中 , 加甲醇适量溶解 , 并稀释至

    刻度 , 摇匀 , 作为对照品储备液 (浓度 010808mg·ml

    - 1) ,精取 1ml 加甲醇稀释到 10ml , 作为对照品溶液。

    214 线性关系考察

    将上述盐酸小檗碱对照品溶液 , 分别进样 2 , 4 , 6 ,8 , 10 , 12 μl。记录峰面积 , 以峰面积 ( Y) 对进样量 (X)

    作图 , 得标准曲线 , 计算回归方程: Y = - 812744X +

    317237 , r = 019998 , 线性范围为: 010162～010970 μg。

    215 回收率试验

    精密称取已知含量为 1120 %样品适量 , 分别精密加入

    盐酸小檗碱储备液 110ml , 按上述方法测定 , 计算回收率。

    结果见表 1。

    表 1 回收率测定结果 (n = 5)

    样品盐酸

    小檗碱含量

    (mg·g - 1)

    加入量

    (mg)

    测得量

    (mg)

    回收率

    ( %)

    平均回收率

    ( %)

    RS D

    ( %)

    010673 010808 011472 9819

    010669 010808 011480 10014

    010668 010808 011488 10019 10011 018

    010664 010808 011468 9915

    010677 010808 011490 10016

    216 重复性试验

    取同一批黄柏样品 5 份 , 按上述方法测定盐酸小檗碱

    的含量 , 平均含量为 1120 % , 其 RSD = 114 % ......