半粒法在胡麻组织培养中的应用.pdf
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2006年2月23日
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内蒙古农业科技2 0 0 5 ( 1 ) : 7 - 8
I n ne r Mo n g o l i a Ag r i c u l t u r a l S c i e n c e And Te c h n o l o g y
半粒法在胡麻组织培养中的应用
黄凤 兰 , 赵志强 , 张志东 , 崔 凯 , 温 国刚 5
( 1 . 东北农业大学, 黑龙江 哈尔滨 1 5 0 0 3 0 ; 2 . 内蒙古民族大学, 内蒙古 通辽 0 2 8 0 0 0; 3 . 赤峰市巴林右旗建设局 , 内蒙古 大板镇
0 2 5 1 5 0 ; 4 . 赤峰市草原站, 内蒙古 赤峰 0 2 4 0 0 0; 5 . 赤峰市巴林右旗水务局, 内蒙古 大板镇 0 2 5 1 5 0 )
摘 要 : 研 究 了应用半粒法使 E l 和 内亚三号正 、 反 交大量低 亚麻 酸后代种子胚 芽端 经济 、 迅速地再 生幼
苗。结果表明: 半粒法经济 实用、 简单 易行 , 能使 大量种子胚 芽端再生幼苗. 且能保证幼苗有较 高的成活率。
半粒 法对胡麻优质单粒种质保 留、 繁代有重要作 用, 为胡麻品质育种提供 了可靠的技 术手段 . 也 可以作 为
其他 油料作物品质育种的借鉴。
关键词 : 胡麻 : 半粒法
中图分类号 : 5 6 5 . 9 3 5 . 3 文献标 识码 : A 文章编号 : 1 0 0 7 — 0 9 0 7( 2 0 0 5 ) 0 1 — 0 0 0 7 — 0 2
胡 麻 属 于 亚 麻 科 ( L i n a c e a e ) 、 亚 麻 属
( 1 i n u m) , 是一种重要的油料作物。 胡麻籽实 中亚
麻酸含量 占总脂肪酸含量的比率小于 2 %时, 才
宜于作为食用油的原料 ,但现在栽培 的胡麻品
种种子 中亚麻酸含量 占总脂肪酸含量 的比率在
3 0 %一 5 0 %,这就要求我们选育低亚麻酸含量的
胡麻品种 。加拿大 S a s k a t c h e w a n大学作物发展
中心 的 G. G. R o w l a n d等人 , 于 1 9 9 0年用 4 %的甲
基磺酸乙酯( E MC) 诱导胡麻栽培种 Mc G r e g o r获
得了 3个突变系,其 中突变系 E , 的亚油酸含
量不但没有降低反而增加 ,而且亚麻酸含量降
低到 2 %。我们用 E 阳作亲本 , 与内亚三号品种
进行正、反交 ,然后再经 回交等一系列育种程
序 , 以期获得其他性状接近 内亚三号 、 而亚麻酸
含量低、 亚油酸含量高的胡麻品种。本文研究的
主要任务是 : 用印迹法定性分析 、 鉴定 E , 和内
亚三号正 、反交大量后代种子无胚端亚麻酸含
量低以后 , 怎样利用其胚芽端经济、 迅速地获得
幼苗。
1 材料和方法
所用胡 麻材 料为 E , 变异 系和 内亚 三号
正 、 反交的低亚麻酸含量的后代种子。该种子由
内蒙古农业大学李心文教授提供。
操作流程 :切割种子一筛选适宜培养基一
确定最佳移栽时间一 常规栽培。
2 结果分 析
2 . 1 最适培养基的 筛选
2 . 1 . 1 接 种 取胡 麻种 子 ,在无 菌条件下 用
7 5 %酒精处理 3 0 s , 0 . 1 % H . g C l 消毒 1 0 mi n ,无菌
水刷洗 8 一 l 0次 , 再用无菌滤纸吸干种皮上的液
体 。将种子切割成两半 , 比例为胚芽端: 无胚端=
3 : 2, 两端对应编号。胚芽端用于培养幼苗。
实验选用无菌湿滤纸和含琼脂 的培养基 ,培养基浓度有 3种 : 1 0 g琼, I J ~ ' 1 O 0 0 ml 水 、 1 5 g琼
脂, 1 O 0 0 ml 水 、 2 0 g琼脂, 1 O o o m l 水 ( 培养基中不
加入其他物质 , 主要是为 了降低成本) 。每个处
理 2 0个培养皿。 将胡麻种子消毒后切割( 如前所
述1 、 编号 , 并将胚芽端接种到 4个不同处理的培
养皿内, 每个培养皿 内接种 2 0粒 。将接种后 的
半粒种子放置于恒温 、恒湿光照培养箱 中, 在
2 0 ℃ 、 光照 1 6 h和 l 5 ℃ 、 黑暗 8 h的交替条件下
培养。放有无菌湿滤纸的培养皿应定期注入适
量无菌水 , 以保持滤纸湿润。
2 . 1 . 2 现象观察 接种后 2 4 h,胚芽端 的半截
子叶部分地从切 口处突出种皮 , 子 叶为乳黄色 :
第二天 , 部分种子胚根从切 口处伸 出种皮外 , 子
叶由乳黄变为极浅的绿色 ; 第三天 , 子叶明显变
绿 , 成为浅绿色 ; 第 四天至第六 天 , 胚根明显变
长 , 子叶颜 色逐渐加深 ; 第 1 1天至第 1 3天 , 幼
苗根部逐渐枯萎 ,湿滤纸上个别幼苗子叶半展
开。以上现象说 明, 幼苗在此时已不宜在培养皿
内继续培养, 4种处理的胚芽端 ,子叶伸出种皮
率可达 9 9 %以上 。
4种不同处理的种子再生幼苗长度( 从根尖
至顶端 ) 见表 1 。对幼苗每 日长度测量值进行方
差分析 ......
I n ne r Mo n g o l i a Ag r i c u l t u r a l S c i e n c e And Te c h n o l o g y
半粒法在胡麻组织培养中的应用
黄凤 兰 , 赵志强 , 张志东 , 崔 凯 , 温 国刚 5
( 1 . 东北农业大学, 黑龙江 哈尔滨 1 5 0 0 3 0 ; 2 . 内蒙古民族大学, 内蒙古 通辽 0 2 8 0 0 0; 3 . 赤峰市巴林右旗建设局 , 内蒙古 大板镇
0 2 5 1 5 0 ; 4 . 赤峰市草原站, 内蒙古 赤峰 0 2 4 0 0 0; 5 . 赤峰市巴林右旗水务局, 内蒙古 大板镇 0 2 5 1 5 0 )
摘 要 : 研 究 了应用半粒法使 E l 和 内亚三号正 、 反 交大量低 亚麻 酸后代种子胚 芽端 经济 、 迅速地再 生幼
苗。结果表明: 半粒法经济 实用、 简单 易行 , 能使 大量种子胚 芽端再生幼苗. 且能保证幼苗有较 高的成活率。
半粒 法对胡麻优质单粒种质保 留、 繁代有重要作 用, 为胡麻品质育种提供 了可靠的技 术手段 . 也 可以作 为
其他 油料作物品质育种的借鉴。
关键词 : 胡麻 : 半粒法
中图分类号 : 5 6 5 . 9 3 5 . 3 文献标 识码 : A 文章编号 : 1 0 0 7 — 0 9 0 7( 2 0 0 5 ) 0 1 — 0 0 0 7 — 0 2
胡 麻 属 于 亚 麻 科 ( L i n a c e a e ) 、 亚 麻 属
( 1 i n u m) , 是一种重要的油料作物。 胡麻籽实 中亚
麻酸含量 占总脂肪酸含量的比率小于 2 %时, 才
宜于作为食用油的原料 ,但现在栽培 的胡麻品
种种子 中亚麻酸含量 占总脂肪酸含量 的比率在
3 0 %一 5 0 %,这就要求我们选育低亚麻酸含量的
胡麻品种 。加拿大 S a s k a t c h e w a n大学作物发展
中心 的 G. G. R o w l a n d等人 , 于 1 9 9 0年用 4 %的甲
基磺酸乙酯( E MC) 诱导胡麻栽培种 Mc G r e g o r获
得了 3个突变系,其 中突变系 E , 的亚油酸含
量不但没有降低反而增加 ,而且亚麻酸含量降
低到 2 %。我们用 E 阳作亲本 , 与内亚三号品种
进行正、反交 ,然后再经 回交等一系列育种程
序 , 以期获得其他性状接近 内亚三号 、 而亚麻酸
含量低、 亚油酸含量高的胡麻品种。本文研究的
主要任务是 : 用印迹法定性分析 、 鉴定 E , 和内
亚三号正 、反交大量后代种子无胚端亚麻酸含
量低以后 , 怎样利用其胚芽端经济、 迅速地获得
幼苗。
1 材料和方法
所用胡 麻材 料为 E , 变异 系和 内亚 三号
正 、 反交的低亚麻酸含量的后代种子。该种子由
内蒙古农业大学李心文教授提供。
操作流程 :切割种子一筛选适宜培养基一
确定最佳移栽时间一 常规栽培。
2 结果分 析
2 . 1 最适培养基的 筛选
2 . 1 . 1 接 种 取胡 麻种 子 ,在无 菌条件下 用
7 5 %酒精处理 3 0 s , 0 . 1 % H . g C l 消毒 1 0 mi n ,无菌
水刷洗 8 一 l 0次 , 再用无菌滤纸吸干种皮上的液
体 。将种子切割成两半 , 比例为胚芽端: 无胚端=
3 : 2, 两端对应编号。胚芽端用于培养幼苗。
实验选用无菌湿滤纸和含琼脂 的培养基 ,培养基浓度有 3种 : 1 0 g琼, I J ~ ' 1 O 0 0 ml 水 、 1 5 g琼
脂, 1 O 0 0 ml 水 、 2 0 g琼脂, 1 O o o m l 水 ( 培养基中不
加入其他物质 , 主要是为 了降低成本) 。每个处
理 2 0个培养皿。 将胡麻种子消毒后切割( 如前所
述1 、 编号 , 并将胚芽端接种到 4个不同处理的培
养皿内, 每个培养皿 内接种 2 0粒 。将接种后 的
半粒种子放置于恒温 、恒湿光照培养箱 中, 在
2 0 ℃ 、 光照 1 6 h和 l 5 ℃ 、 黑暗 8 h的交替条件下
培养。放有无菌湿滤纸的培养皿应定期注入适
量无菌水 , 以保持滤纸湿润。
2 . 1 . 2 现象观察 接种后 2 4 h,胚芽端 的半截
子叶部分地从切 口处突出种皮 , 子 叶为乳黄色 :
第二天 , 部分种子胚根从切 口处伸 出种皮外 , 子
叶由乳黄变为极浅的绿色 ; 第三天 , 子叶明显变
绿 , 成为浅绿色 ; 第 四天至第六 天 , 胚根明显变
长 , 子叶颜 色逐渐加深 ; 第 1 1天至第 1 3天 , 幼
苗根部逐渐枯萎 ,湿滤纸上个别幼苗子叶半展
开。以上现象说 明, 幼苗在此时已不宜在培养皿
内继续培养, 4种处理的胚芽端 ,子叶伸出种皮
率可达 9 9 %以上 。
4种不同处理的种子再生幼苗长度( 从根尖
至顶端 ) 见表 1 。对幼苗每 日长度测量值进行方
差分析 ......
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