冬虫夏草子囊孢子萌发及其无性型观察.PDF
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2006年2月23日
| 第1页 |
参见附件(150KB，3页)。
[收稿日期] 2002212216
[基金项目] 贵州省自然科学基金项目资助(95097B2146)
[作者简介] 刘作易(1959- ) , 男, 教授, 博士, 现任贵州省农业科学院院长, 从事微生物教学和虫草及其无性型的分类、生理及分子生物学研究。
研究报告 [文章编号]100123601 (2003) 012000120003203
冬虫夏草子囊孢子萌发及其无性型观察
刘作易1
, 梁宗琦2
, 刘爱英2
(1. 贵州省农业科学院, 贵阳 550006; 2. 贵州大学 生物技术学院虫生真菌研究室, 贵阳 550025)
[摘 要] 1995 年从云南德钦白马雪山和人支雪山调查收集了新鲜冬虫夏草(Cordy cep s sinensis)标本,对其子囊孢子微循环产孢进行了观察, 并将其与子囊孢子分离和组织分离菌株的产孢结构进行了比较。结果
表明, 微循环产孢的产孢结构和分离菌株的产孢结构相似, 并与中国被毛孢(H irsu tel la sinensis)的产孢结构
相似, 由此证明冬虫夏草的无性型应是中国被毛孢, 中华束丝孢(S y nnem at ium sinensis)为中国被毛孢的同物
异名。
[关键词] 冬虫夏草; 中国被毛孢; 中华束丝孢; 微循环产孢
[中图分类号] Q 949. 32 [文献标识码] A
Inve s t iga t ion onM ic rocyc le Conid ia t ion of As cos po re s a nd
Conid ioge nous S t ruc ture s of Anam o rph of Cordycep s s inens is
L IU Zuo2 yi
1
, L IAN G Zong2 qi
2
, L IU A i2 ying
2
(1 . Guizhou Academy of Ag r icul tura l Sciences, Guiyang 550006; 2 . L abora tory of En tomogenous
Mycology, Col lege of B iotechnology, Guizhou Un ivers ity, Guiyang 550025, Ch ina )
Abstract : F resh specimens of Cordy cep s sinensis co llected in BaimaMountains and Renzh iMountains,Deqin, Yunnan p rovince w ere studied . It w as found that conidiogenous st ructures ofm icrocycle conidiat ion of
asco spo res w ere sim ilar to tho se of H irsu tel la sinensis . H. sinensis w as considered to be the anamo rph of
Cordy cep s sinensis . S y nnem at ium sinensis w as t reated as a synonym of H irsu tel la sinensis .
Key words: Cordy cep s sinensis; H irsu tel la sinensis; S y nnem at ium sinensis; m icrocycle conidiat ion
冬虫夏草(Cordy cep s sinensis (Berk. ) Sacc . )在我国作为贵重中药材使用已有两千多年。
Berkeley ( 1843) 将其命名为 S p haeria sinensis Berk. , Saccardo 把该真菌转到虫草属
(Cordy cep s (F r . ) L ink)中[ 1 ]
, 并更名为冬虫夏草[Cordy cep s sinensis (Berk. ) Sacc . ]
[ 2 ]。由于该
菌对人体有重要的保健和医疗作用, 引起我国不少研究工作者的兴趣, 相继报道了与冬虫夏草
外观相似的几个新种[ 3～ 5 ]。其无性型研究更为活跃, 在世界范围内报道的冬虫夏草无性型有10
余种, 分属于 10 个属[ 6 ]。这种分类鉴定的混乱现象已为正确地开发和利用冬虫夏草造成了不
利影响, 故有必要对冬虫夏草无性型作进一步的观察。本文对采集的冬虫夏草新鲜标本培养物
产孢结构与冬虫夏草子囊孢子微循环产孢的结构进行了比较观察。
1 材料与方法
1 . 1 材料
1995 年 6 月到白马雪山和人支雪山采集了新鲜冬虫夏草标本: 95D03 采自云南白马雪
山; 95D04 采自云南人支雪山; 95D05 采自云南白马雪山(阔孢虫草采集地)。
1 . 2 菌株分离及形态学观察
1. 2. 1 菌株分离 (1)子囊孢子分离: 在不同的塑料盒内, 分别将新鲜标本(95D03, 95D04 和
95D05)虫体部分用脱脂棉保湿, 以促进成熟度不够的子座成熟和子囊孢子弹射。子座头部悬
于灭菌的载片上。用玻璃盖住盒子, 透过的光线可刺激子囊孢子释放。室温下成熟的子座3～
5 d 内就释放子囊孢子, 成熟度差的需10～ 15 d 才释放子囊孢子。将弹射到载片上的子囊孢子
部分接种到PDA 试管中(每块载片上的子囊孢子可接 20 支PDA 试管)于 10℃冰箱中培养。
(2)将载片上剩余的子囊孢子用于诱导微循环产孢: 把载片放在培养皿中于 17～ 20℃下保湿
贵州农业科学 2003, 31 (1) : 3～ 5
Guizhou A gr icultural Sciences
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.培养, 有时还可加上 1 滴液体培养基, 诱导子囊孢子的微循环产孢, 并对微循环产孢现象绘图
或显微拍照。 (3)组织分离: 将新鲜标本(同上)菌核部分(虫体部分)仔细剥下, 用 75%酒精表
面消毒, 挑取虫体背部组织块于 PDA 试管中, 采用同样方法对子座部分进行了分离, 把接种
的试管放在10℃冰箱中培养。
1. 2. 2 形态学观察 培养特征观察: 子囊孢子分离的试管和组织分离的试管在 10℃下经60 d
的培养长出很小的菌落, 将其再转接到新鲜的PDA 试管中, 于 15℃培养 45 d 后, 采用常规方
法再观察其形态。
2 结果
2 . 1 子囊孢子微循环产孢
在保湿条件下, 对弹射到载
玻片上的子囊孢子进行培养, 发
现每个子囊孢子的每个细胞似乎
均有萌发产生芽管形成菌丝或产
孢细胞——瓶梗的能力 ......
[基金项目] 贵州省自然科学基金项目资助(95097B2146)
[作者简介] 刘作易(1959- ) , 男, 教授, 博士, 现任贵州省农业科学院院长, 从事微生物教学和虫草及其无性型的分类、生理及分子生物学研究。
研究报告 [文章编号]100123601 (2003) 012000120003203
冬虫夏草子囊孢子萌发及其无性型观察
刘作易1
, 梁宗琦2
, 刘爱英2
(1. 贵州省农业科学院, 贵阳 550006; 2. 贵州大学 生物技术学院虫生真菌研究室, 贵阳 550025)
[摘 要] 1995 年从云南德钦白马雪山和人支雪山调查收集了新鲜冬虫夏草(Cordy cep s sinensis)标本,对其子囊孢子微循环产孢进行了观察, 并将其与子囊孢子分离和组织分离菌株的产孢结构进行了比较。结果
表明, 微循环产孢的产孢结构和分离菌株的产孢结构相似, 并与中国被毛孢(H irsu tel la sinensis)的产孢结构
相似, 由此证明冬虫夏草的无性型应是中国被毛孢, 中华束丝孢(S y nnem at ium sinensis)为中国被毛孢的同物
异名。
[关键词] 冬虫夏草; 中国被毛孢; 中华束丝孢; 微循环产孢
[中图分类号] Q 949. 32 [文献标识码] A
Inve s t iga t ion onM ic rocyc le Conid ia t ion of As cos po re s a nd
Conid ioge nous S t ruc ture s of Anam o rph of Cordycep s s inens is
L IU Zuo2 yi
1
, L IAN G Zong2 qi
2
, L IU A i2 ying
2
(1 . Guizhou Academy of Ag r icul tura l Sciences, Guiyang 550006; 2 . L abora tory of En tomogenous
Mycology, Col lege of B iotechnology, Guizhou Un ivers ity, Guiyang 550025, Ch ina )
Abstract : F resh specimens of Cordy cep s sinensis co llected in BaimaMountains and Renzh iMountains,Deqin, Yunnan p rovince w ere studied . It w as found that conidiogenous st ructures ofm icrocycle conidiat ion of
asco spo res w ere sim ilar to tho se of H irsu tel la sinensis . H. sinensis w as considered to be the anamo rph of
Cordy cep s sinensis . S y nnem at ium sinensis w as t reated as a synonym of H irsu tel la sinensis .
Key words: Cordy cep s sinensis; H irsu tel la sinensis; S y nnem at ium sinensis; m icrocycle conidiat ion
冬虫夏草(Cordy cep s sinensis (Berk. ) Sacc . )在我国作为贵重中药材使用已有两千多年。
Berkeley ( 1843) 将其命名为 S p haeria sinensis Berk. , Saccardo 把该真菌转到虫草属
(Cordy cep s (F r . ) L ink)中[ 1 ]
, 并更名为冬虫夏草[Cordy cep s sinensis (Berk. ) Sacc . ]
[ 2 ]。由于该
菌对人体有重要的保健和医疗作用, 引起我国不少研究工作者的兴趣, 相继报道了与冬虫夏草
外观相似的几个新种[ 3～ 5 ]。其无性型研究更为活跃, 在世界范围内报道的冬虫夏草无性型有10
余种, 分属于 10 个属[ 6 ]。这种分类鉴定的混乱现象已为正确地开发和利用冬虫夏草造成了不
利影响, 故有必要对冬虫夏草无性型作进一步的观察。本文对采集的冬虫夏草新鲜标本培养物
产孢结构与冬虫夏草子囊孢子微循环产孢的结构进行了比较观察。
1 材料与方法
1 . 1 材料
1995 年 6 月到白马雪山和人支雪山采集了新鲜冬虫夏草标本: 95D03 采自云南白马雪
山; 95D04 采自云南人支雪山; 95D05 采自云南白马雪山(阔孢虫草采集地)。
1 . 2 菌株分离及形态学观察
1. 2. 1 菌株分离 (1)子囊孢子分离: 在不同的塑料盒内, 分别将新鲜标本(95D03, 95D04 和
95D05)虫体部分用脱脂棉保湿, 以促进成熟度不够的子座成熟和子囊孢子弹射。子座头部悬
于灭菌的载片上。用玻璃盖住盒子, 透过的光线可刺激子囊孢子释放。室温下成熟的子座3～
5 d 内就释放子囊孢子, 成熟度差的需10～ 15 d 才释放子囊孢子。将弹射到载片上的子囊孢子
部分接种到PDA 试管中(每块载片上的子囊孢子可接 20 支PDA 试管)于 10℃冰箱中培养。
(2)将载片上剩余的子囊孢子用于诱导微循环产孢: 把载片放在培养皿中于 17～ 20℃下保湿
贵州农业科学 2003, 31 (1) : 3～ 5
Guizhou A gr icultural Sciences
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.培养, 有时还可加上 1 滴液体培养基, 诱导子囊孢子的微循环产孢, 并对微循环产孢现象绘图
或显微拍照。 (3)组织分离: 将新鲜标本(同上)菌核部分(虫体部分)仔细剥下, 用 75%酒精表
面消毒, 挑取虫体背部组织块于 PDA 试管中, 采用同样方法对子座部分进行了分离, 把接种
的试管放在10℃冰箱中培养。
1. 2. 2 形态学观察 培养特征观察: 子囊孢子分离的试管和组织分离的试管在 10℃下经60 d
的培养长出很小的菌落, 将其再转接到新鲜的PDA 试管中, 于 15℃培养 45 d 后, 采用常规方
法再观察其形态。
2 结果
2 . 1 子囊孢子微循环产孢
在保湿条件下, 对弹射到载
玻片上的子囊孢子进行培养, 发
现每个子囊孢子的每个细胞似乎
均有萌发产生芽管形成菌丝或产
孢细胞——瓶梗的能力 ......
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