地黄茎尖快繁技术及其问题探讨.PDF
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2006年2月23日
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参见附件(123KB，3页)。
文章编号:1002 - 2481(2003) 04 - 0066 - 03
地黄茎尖快繁技术及其问题探讨
X
解晓红, 武宗信, 冯文龙, 解红娥, 陈 丽, 李红霞, 李江辉 (山西省农业科学院棉花研究所,山西 运城 044000)
摘 要:在解剖镜下切取0. 2～0. 4mm的地黄茎尖进行组织培养。试验结果表明 ,诱导地黄茎尖成
苗的培养基为MS + 6 - BA 0. 5mg L ,快繁培养基为 1 2MS培养基 (蔗糖浓度不减半) 。另外 ,对影
响试管苗生长、快繁等一些个性化因素进行了探讨。
关键词:地黄;组织培养;快繁
中图分类号:S644. 9 文献标识码:A
地黄( Rehomania glutinosa Libosch)属玄参科地黄属多年生草本植物。由于其特殊的药用
价值和保健作用 ,在中药材用量上一直居首位。然而由于地黄退化病毒 (DDV) 、地黄 X病毒
和 CMV等病原菌的为害 ,使地黄种性退化 ,严重影响产量和品质。利用组织培养技术 ,通过微
茎尖诱导成苗 ,获得脱毒植株 ,可使地黄恢复种性 ,提高产量和品质。
1 材料和方法
1. 1 外植体的选择及培养条件
选用优良地黄苗 ,剪成2cm左右的茎段 ,用0. 1 %洗衣粉溶液浸泡 15min ,在超净工作台上
选用75 %酒精表面消毒30s ,然后用0. 05 %升汞消毒数分钟 ,用无苗水冲洗 4～5 次 ,将嫩茎接
种到MS培养基中 ,20d左右获得无菌苗。待无菌苗长至5～6片叶时 ,在超净工作台上用双目
实体解剖镜40x切取0. 2～0. 4mm含1～2个叶原基的茎尖组织 ,分别接种到 8 种不同激素配
比( ① 6 - BA 0. 25mg L ; ② 6 - BA 0. 5mg L ; ③6 - BA 1mg L ; ④6 - BA 2mg L ; ⑤6 - BA 4mg L ;
⑥ NAA 0. 01mg L + 6 - BA 0. 5mg L ; ⑦NAA 0. 01mg L + 6 - BA 1mg L ; ⑧NAA 0. 01mg L + 6 -
BA 0. 5mg L + GA3 0. 1mg L)茎尖成苗培养基中分化培养。培养室温度 27～29 ℃,光照强度
1 600～2 000lx ,时间12h d ,pH值6. 0 ,琼脂浓度0. 65 %～0. 70 % ,蔗糖含量30 %。
1. 2 试管苗的快繁培养
当茎尖苗长到6～7片叶时 ,将苗切成带一个芽的若干茎段 ,进行离体快速繁殖培养。将
茎段分别接种于MS ,1 2MS培养基中 ,以优质白砂糖代替蔗糖 , 35d后各调查20株。
2 结果与分析
2. 1 不同激素配比对茎尖培养的影响
植物组织培养的成功 ,一定要选择出合适的培养基、激素及其他添加物。从表 1 可以看
出 ,8种培养基处理对地黄茎尖培养有促进生长作用 ,接种 7～10d 当 6 - BA 浓度大于 2mg L
时 ,分化出的丛生苗少且弱 ,长势较差。采用单一6 - BA(0. 25～1mg L)即能诱导一次成苗 ,成
66
山西农业科学 2003 ,31(3) :66～68 Journal of Shanxi Agricultural Sciences
X 收稿日期:2003 - 01 - 14
作者简介:解晓红(1969 - ) ,女,山西万荣人,助理研究员,农学学士,主要从事农作物及中药材组织培养工作。
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.苗率达95 %。
表1 不同激素配比对茎尖成苗的影响(20d愈伤组织生长情况)
不同激素配比(mg L) 颜色 状态 增殖速度 丛生苗生长情况
6 - BA 0. 25 淡绿 疏松 较快 叶片清晰可见
6 - BA 0. 5 淡绿 疏松 较快 叶片清晰可见
6 - BA 1 淡绿 疏松 较快 叶片清晰可见
6 - BA 2 较绿 较密 较慢 叶片较清晰
6 - BA 4 较绿 致密 慢 茎尖开始变绿
NAA 0. 01 + 6 - BA 0. 5 淡绿 疏松 较快 叶片较清晰
NAA 0. 01 + 6 - BA 1 淡绿 较密 较快 叶片较清晰
NAA 0. 01 + 6 - BA 0. 5 + GA3 0. 1 淡绿 疏松 较慢 叶片清晰可见
2. 2 培养基成分对地黄快繁的影响
试验结果表明 ,两种培养基中试管苗生长速度、植株鲜重、株高、叶片数、长势等相当 ,无显
著差异(表2) ......
地黄茎尖快繁技术及其问题探讨
X
解晓红, 武宗信, 冯文龙, 解红娥, 陈 丽, 李红霞, 李江辉 (山西省农业科学院棉花研究所,山西 运城 044000)
摘 要:在解剖镜下切取0. 2～0. 4mm的地黄茎尖进行组织培养。试验结果表明 ,诱导地黄茎尖成
苗的培养基为MS + 6 - BA 0. 5mg L ,快繁培养基为 1 2MS培养基 (蔗糖浓度不减半) 。另外 ,对影
响试管苗生长、快繁等一些个性化因素进行了探讨。
关键词:地黄;组织培养;快繁
中图分类号:S644. 9 文献标识码:A
地黄( Rehomania glutinosa Libosch)属玄参科地黄属多年生草本植物。由于其特殊的药用
价值和保健作用 ,在中药材用量上一直居首位。然而由于地黄退化病毒 (DDV) 、地黄 X病毒
和 CMV等病原菌的为害 ,使地黄种性退化 ,严重影响产量和品质。利用组织培养技术 ,通过微
茎尖诱导成苗 ,获得脱毒植株 ,可使地黄恢复种性 ,提高产量和品质。
1 材料和方法
1. 1 外植体的选择及培养条件
选用优良地黄苗 ,剪成2cm左右的茎段 ,用0. 1 %洗衣粉溶液浸泡 15min ,在超净工作台上
选用75 %酒精表面消毒30s ,然后用0. 05 %升汞消毒数分钟 ,用无苗水冲洗 4～5 次 ,将嫩茎接
种到MS培养基中 ,20d左右获得无菌苗。待无菌苗长至5～6片叶时 ,在超净工作台上用双目
实体解剖镜40x切取0. 2～0. 4mm含1～2个叶原基的茎尖组织 ,分别接种到 8 种不同激素配
比( ① 6 - BA 0. 25mg L ; ② 6 - BA 0. 5mg L ; ③6 - BA 1mg L ; ④6 - BA 2mg L ; ⑤6 - BA 4mg L ;
⑥ NAA 0. 01mg L + 6 - BA 0. 5mg L ; ⑦NAA 0. 01mg L + 6 - BA 1mg L ; ⑧NAA 0. 01mg L + 6 -
BA 0. 5mg L + GA3 0. 1mg L)茎尖成苗培养基中分化培养。培养室温度 27～29 ℃,光照强度
1 600～2 000lx ,时间12h d ,pH值6. 0 ,琼脂浓度0. 65 %～0. 70 % ,蔗糖含量30 %。
1. 2 试管苗的快繁培养
当茎尖苗长到6～7片叶时 ,将苗切成带一个芽的若干茎段 ,进行离体快速繁殖培养。将
茎段分别接种于MS ,1 2MS培养基中 ,以优质白砂糖代替蔗糖 , 35d后各调查20株。
2 结果与分析
2. 1 不同激素配比对茎尖培养的影响
植物组织培养的成功 ,一定要选择出合适的培养基、激素及其他添加物。从表 1 可以看
出 ,8种培养基处理对地黄茎尖培养有促进生长作用 ,接种 7～10d 当 6 - BA 浓度大于 2mg L
时 ,分化出的丛生苗少且弱 ,长势较差。采用单一6 - BA(0. 25～1mg L)即能诱导一次成苗 ,成
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山西农业科学 2003 ,31(3) :66～68 Journal of Shanxi Agricultural Sciences
X 收稿日期:2003 - 01 - 14
作者简介:解晓红(1969 - ) ,女,山西万荣人,助理研究员,农学学士,主要从事农作物及中药材组织培养工作。
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.苗率达95 %。
表1 不同激素配比对茎尖成苗的影响(20d愈伤组织生长情况)
不同激素配比(mg L) 颜色 状态 增殖速度 丛生苗生长情况
6 - BA 0. 25 淡绿 疏松 较快 叶片清晰可见
6 - BA 0. 5 淡绿 疏松 较快 叶片清晰可见
6 - BA 1 淡绿 疏松 较快 叶片清晰可见
6 - BA 2 较绿 较密 较慢 叶片较清晰
6 - BA 4 较绿 致密 慢 茎尖开始变绿
NAA 0. 01 + 6 - BA 0. 5 淡绿 疏松 较快 叶片较清晰
NAA 0. 01 + 6 - BA 1 淡绿 较密 较快 叶片较清晰
NAA 0. 01 + 6 - BA 0. 5 + GA3 0. 1 淡绿 疏松 较慢 叶片清晰可见
2. 2 培养基成分对地黄快繁的影响
试验结果表明 ,两种培养基中试管苗生长速度、植株鲜重、株高、叶片数、长势等相当 ,无显
著差异(表2) ......
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