【论 著】

    作者简介:梅家俊(1931 - ) ,男,湖北中医学院教授、原博士生导师,享受国务院特殊津贴。

    川芎防治动脉粥样硬化症机制的实验研究

    梅家俊 ,蔡大勇 ,赵婷秀 ,田文红 ,叶根梅 ,陈振发 ,乔 明 ,周安方 ,赵 刚

    (湖北中医学院病理教研室 , 湖北 武汉 430061)

    摘要: 川芎防治AS机制的实验研究 目的方法:为探讨川芎对AS的防治作用 ,采用家兔添加 1g胆固醇和 5g

    甘油三酯为致AS的主要膳食造模 ,与造模膳食同步给予含30倍人的等效剂量川芎进行治疗。结果 显示川芎逆转

    了AS病变 ,与模型组比较 ,治疗组表现为: ①动物后肢间歇性跛行和皮肤真菌感染发生率降低; ②动物血清甘油三

    酯(TG)和总胆固醇(T- Ch)明显回降、高密度脂蛋白 Ch (HDL - Ch)和 HDL - Ch T - Ch之比值显著回升; ③主动脉

    AS病变明显好转 ,尤其主动脉AS面积的百分比明显回降; ④冠状动脉病变和心肌萎缩均明显好转; ⑤主动脉内膜

    一氧化氮合酶的活性明显回升; ⑥主动脉内膜超微病变减轻 ,泡沫细胞荷脂少及损伤减轻。结论 结果表明川芎

    能通过多环节有效防治家兔AS病变和病症。

    关键词: 川芎; 动脉粥样硬化症; 平滑肌细胞

    中图分类号: R28515 文献标识码: A 文章编号: 1008 - 987X(2004) 02 - 0005 - 04

    动脉粥样硬化症(AS)是危害人类健康的主要原因 ,我

    们基于多年对含有川芎的参麝活络丸、大活络丸和脑脉通

    等复方防治 AS的研究[1～3 ]

    及川芎兼治 AS病症的临床报

    道 ,实验研究川芎防治家兔AS模型的效果及其机制。

    1 材料和方法

    1. 1 主要材料和设备

    胆固醇(荷兰UPS进口 ,武汉卫检医药试剂公司分装) 、甘油三酯 (市购新鲜生猪油 ,煅炼、过滤的甘油三酯) 、甲巯

    咪唑片(北京市燕京制药厂) 、〔浓〕维生素 AD 胶丸(大连水

    产制药厂) 、一氧化氮合酶(NOS)检测标准试剂 ①氯化硝基

    四氮唑兰NBT:中国上海前进试剂厂 ②还原性辅酶 Ⅱ四钠盐

    NADPH: B.M.公司进口、双目 Olympus光学显微镜及 C5 目

    镜测微尺、 Olympus 2AU560自动生化分析仪、 H2600 电子扫描

    显微镜、 H2300电子透射显微镜。

    1. 2 川芎浸膏的制备及剂量

    川芎购于武汉市武昌中药材供应站。经湖北中医学院

    中药鉴定教研室鉴定为伞形科川芎 ,川芎提取与浓缩液由

    湖北中医学院中心实验室制备。川芎成人用量为 6g ,家兔

    的等效剂量为01335g×(kg· d)

    - 1

    ,按等效剂量的30倍计算。

    1. 3 动物处理

    购于武汉大学医学院动物房的 24 只雄性新西兰家兔 ,体重11354± 011835Kg。 随机分三组 ,每组 8 只 ,组间体重无

    差别。每笼一只家兔分笼喂养。A.正常组(8 只) :每 d8 时 ,每只家免先供应50g基本饲料及充分的冷开水; 每 d12 时 ,每只家免补充供应200g青叶白菜、充足基本饲料及冷开水;

    每d20时撤去每只家免的所有饮料和饮水。B. 模型组(8

    只) : 以56g高脂高胆固醇饲料(即基本饲料 50g加胆固醇

    1g、 甘油三酯5g、甲巯咪唑片5mg、维生素AD胶丸1丸)代替

    每 d8时供应给每只家兔的 50g基本饲料 ,余同正常组。C.

    防治组(8只) :以65g高脂高胆固醇含川芎饲料(56g高脂高

    胆固醇饲料加9g川芎浸膏)代替每 d8时供应给每只家兔的

    50g基本饲料 ,余同正常组。观察家兔的活动、皮毛、大便、进食、饮水总量、每周空腹称量体重一次 ,注意脚掌和耳后

    皮肤的真菌感染情况。连续饲养 91d ,颈动脉插管处死家

    兔 ,分离血清用于血脂检测;取大、中动脉、心脏等组织立即

    固定于4 %磷酸缓冲甲醛溶液中。

    1. 4 观察指标

    ①一般观察中的阳性指标:实验中发现部分动物有脚

    掌和耳后皮肤的真菌感染 ,在实验接近终止时部分动物出

    现后肢间歇性跛行样运动改变。对此按等级资料的秩和检

    验 ,统计比较各组间的阳性率。②血脂检测:实验结束时检

    测血清甘油三酯(TG) 、总胆固醇(T 2Ch) 、高密度脂蛋白胆固

    醇(HDL2Ch) 、并计算 HDL2Ch T 2Ch百分比。组间t 检验。③

    主动脉AS斑块面积的百分比:主动脉用苏丹 Ⅲ70 %酒精饱

    和溶液中浸润染色后测动脉内膜粥样斑块面积的直接百分

    比。因偏态分布 ,故对百分比数值进行平方根反正弦变换

    后作组间t 检验; ④组织结构的光镜观察:取主动脉各段、心

    脏等组织。常规石蜡包埋 H2E染色 ,光镜观察 ,依病变性质

    和程度对各组动物病变进行分级 ,用等级资料的秩和检验 ,统计比较各组间病变的严重程度。⑤组织结构内一氧化氮

    合酶(NOS)的定性观察:取主动脉各段严格按试剂盒说明书

    进行操作 ,且所有动物切片均同步处理。光镜观察。⑥动

    脉壁结构的电镜观察:胸、腹主动脉的起始部位各取 1mm3

    和 4mm3

    组织块立即固定。lmm3

    组织常规超薄切片 ,铀2铅

    · 5 · 2004年6月第6卷第2期

    June12004 ,Vol16 ,No12

    湖北中医学院学报

    Journal of Hubei College of TCM

    ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.染色 ,日立 H300 透射电镜观察。4mm3

    组织 CO2 临界点干

    燥 ,镀膜:日立 H600扫描电镜观察。

    2 结果

    2. 1 一般观察中的阳性指标

    ①皮肤感染:正常组、模型组和治疗组家兔实验过程中

    脚掌和耳后皮肤真菌感染发病分别为0、 8、 2只 ,进行等级资

    料的秩和检验 ,结果显示:模型组皮肤感染发生率高于正常

    组( P < 0101) ,治疗组高于正常组无显著意义( P > 0105) ,治

    疗组低于模型组( P < 0101) 。②运动异常:正常组、模型组

    和治疗组家兔在实验接近终止时出现后肢间歇性跛行发病

    分别为0、 8、 1只 ,进行等级资料的秩和检验 ,结果显示:模型

    组后肢运动异常高于正常组( P < 0101) , 治疗组高于正常组

    无显著意义( P > 0105) ,治疗组低于模型组( P < 0101) 。

    2. 2 血脂检测

    ① TG: 正常组、模型组、治疗组 TG值分别为 1125 ±

    01383、 31584± 21531、 0184± 01295。组间 t 检验结果显示:模

    型组 TG含量高于正常组( P < 0105) ,治疗组低于正常组( P

    < 0105) ,治疗组低于模型组( P < 0101) 。②T 2Ch :正常组、模

    型组、治疗组 T 2Ch 值分别为 1104 ±01210、 14195 ±41331、111414±31336。组间 t 检验结果显示:模型组 T 2Ch 含量高

    于正常组( P < 0105) ,治疗组 T 2Ch含量高于正常组低于模型

    组( P < 0105) 。③HDL2Ch :正常组、模型组、治疗组 HDL2Ch

    值分别为0145±01076、 0128 ±01084、 0130 ±01116。 组间 t 检

    验结果显示:模型组和治疗组 HDL2Ch含量低于正常组( P <

    0101) ,治疗组高于模型组( P > 0105) ......