陈皮总DNA提取方法的研究.PDF
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2006年2月23日
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参见附件(84KB，2页)。
陈皮总DNA提取方法的研究
严寒静1
高晓霞2
陈晓颖2
(广东药学院 1.药用植物与生药学教研室; 2.药物分析化学教研室 广东 广州 510240)
摘 要 目的 寻找一种以市售中药材陈皮为材料 ,可获得高质量的陈皮总 DNA的方法。方法 采用 CTAB 法提取总 DNA ,在
研磨过程加入 PVP ,经琼脂糖凝胶电泳检测。结果 用非可溶性 PVP(Polyvinylpyrrolidone)研磨 ,CTAB法能较好的去除色素、多糖
等干扰物质。 结论 该方法可以用于多糖、色素含量高的中药材的总DNA的提取。
关键词 陈皮;总DNA;PVP
中图号 R 284. 1 文章编号:1006 - 8783(2004) 06 - 0592 - 02 文献标识码:A
Total DNA extraction from Pericarpium Citri Reticulatae
YAN Han2jing1
, GAO Xiao2xia
2
, CHENG Xiao2ying2
( 1. Departmet of Chinese Materia Medica , Guangdong College of Pharmacy ,Guangzhou 510240 , China ; 2. Departmet of Pharmacy , Guangdong College of Pharmacy , Guangzhou 510240 , China)
Abstract Objective To explore the method for extraction of high quality DNA from Pericarpium citri Reticulatae. Methods Two
methods , i . e. , CTAB , and modified CTAB with PVP , were used to extract total DNA from traditional Chinese medicinal material
Pericarpium citri Reticulatae. Results The second method was preferable in removing pigments , polysaccharides , which disturbing PCR.
Conclusion This method can be used in extracting DNA from plant Chinese medicinal material that has high contents of pigments and
polysaccharides.
Key words Pericarpium Citri Reticulatae ; total DNA; PVP
作者简介:严寒静 ,女 ,硕士 ,在读博士 ,讲师。
研究方向:植物资源。
在对中药材进行 RAPD和 RFLP分析中 ,常以新
鲜植物叶片为提取DNA的原材料[1 - 6 ]
,但在实际工
作中有时原植物难以采集或者无法判断原植物时 ,仍需要对市售干品中药材进行分子生物学鉴定。以
市售干品中药材为原材料提取DNA更具实际意义 ,因此如何从市售的植物药材中简单、快速取得纯度
较高的总DNA 来进行相关研究是一个有待解决的
问题。市售中药材大多为干品 ,并且保存时间较长 ,在中药材的加工和贮藏过程中 ,有很多条件不利于
DNA的完整性 ,发生自然降解[7 ]。从新鲜植物细胞
基因组提取 DNA 的技术较为成熟 ,方法众多 ,如蛋
白酶 K消化法、快速高盐提取法、 CTAB法、 SDS裂解
法、丙酮 - 醋酸甲法等。这些方法是否适用于市售
干品中药材基因组DNA的提取 ,需根据所研究的中
药材的不同情况进行实验 ,以获得高质量的DNA样
品。陈皮(Pericarpium Citri Reticulatae) 为芸香科植物
橘( Citrus reticulata Blanco) 及其栽培变种的干燥成熟
果皮,含有较多的多糖、酚类、单宁、挥发油、色素等次
生代谢产物,在DNA提取过程中干扰较大,尚未有关
于陈皮总 DNA 的提取报道,鉴于此本研究对 CTAB
(cetyltrimethyle ammonium bromide)法加以改进,在研磨
过程中加入非可溶性 PVP(polyvinylpyrrolidone)提取,以提高陈皮总DNA质量 ......
严寒静1
高晓霞2
陈晓颖2
(广东药学院 1.药用植物与生药学教研室; 2.药物分析化学教研室 广东 广州 510240)
摘 要 目的 寻找一种以市售中药材陈皮为材料 ,可获得高质量的陈皮总 DNA的方法。方法 采用 CTAB 法提取总 DNA ,在
研磨过程加入 PVP ,经琼脂糖凝胶电泳检测。结果 用非可溶性 PVP(Polyvinylpyrrolidone)研磨 ,CTAB法能较好的去除色素、多糖
等干扰物质。 结论 该方法可以用于多糖、色素含量高的中药材的总DNA的提取。
关键词 陈皮;总DNA;PVP
中图号 R 284. 1 文章编号:1006 - 8783(2004) 06 - 0592 - 02 文献标识码:A
Total DNA extraction from Pericarpium Citri Reticulatae
YAN Han2jing1
, GAO Xiao2xia
2
, CHENG Xiao2ying2
( 1. Departmet of Chinese Materia Medica , Guangdong College of Pharmacy ,Guangzhou 510240 , China ; 2. Departmet of Pharmacy , Guangdong College of Pharmacy , Guangzhou 510240 , China)
Abstract Objective To explore the method for extraction of high quality DNA from Pericarpium citri Reticulatae. Methods Two
methods , i . e. , CTAB , and modified CTAB with PVP , were used to extract total DNA from traditional Chinese medicinal material
Pericarpium citri Reticulatae. Results The second method was preferable in removing pigments , polysaccharides , which disturbing PCR.
Conclusion This method can be used in extracting DNA from plant Chinese medicinal material that has high contents of pigments and
polysaccharides.
Key words Pericarpium Citri Reticulatae ; total DNA; PVP
作者简介:严寒静 ,女 ,硕士 ,在读博士 ,讲师。
研究方向:植物资源。
在对中药材进行 RAPD和 RFLP分析中 ,常以新
鲜植物叶片为提取DNA的原材料[1 - 6 ]
,但在实际工
作中有时原植物难以采集或者无法判断原植物时 ,仍需要对市售干品中药材进行分子生物学鉴定。以
市售干品中药材为原材料提取DNA更具实际意义 ,因此如何从市售的植物药材中简单、快速取得纯度
较高的总DNA 来进行相关研究是一个有待解决的
问题。市售中药材大多为干品 ,并且保存时间较长 ,在中药材的加工和贮藏过程中 ,有很多条件不利于
DNA的完整性 ,发生自然降解[7 ]。从新鲜植物细胞
基因组提取 DNA 的技术较为成熟 ,方法众多 ,如蛋
白酶 K消化法、快速高盐提取法、 CTAB法、 SDS裂解
法、丙酮 - 醋酸甲法等。这些方法是否适用于市售
干品中药材基因组DNA的提取 ,需根据所研究的中
药材的不同情况进行实验 ,以获得高质量的DNA样
品。陈皮(Pericarpium Citri Reticulatae) 为芸香科植物
橘( Citrus reticulata Blanco) 及其栽培变种的干燥成熟
果皮,含有较多的多糖、酚类、单宁、挥发油、色素等次
生代谢产物,在DNA提取过程中干扰较大,尚未有关
于陈皮总 DNA 的提取报道,鉴于此本研究对 CTAB
(cetyltrimethyle ammonium bromide)法加以改进,在研磨
过程中加入非可溶性 PVP(polyvinylpyrrolidone)提取,以提高陈皮总DNA质量 ......
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