第 2 1卷第 4期 泉州师范 学院学报 ( 自然科 学) Vo 1 . 2 1 No . 4

    2 0 0 3年 7月 J o u r n a l o f Qu a n z h o u No r ma l Un i v e r s i t y( Na t u r a l Sc i e n c e ) J u 1 . 2 0 0 3

    赤楠茎叶果总黄酮提取与含量测定

    黄 晓冬 ， 刘 剑秋 ， 陈炳 华

    ( 1 _ 泉 州 师范 学 院 教科 院 ， 福 建 泉 州 3 6 2 0 0 0； 2 福 建 师范 大学 生物 工程学 院 ， 福 州 3 5 0 0 0 7 )

    摘 要 ： 以不 同 浓度 的酒 精 、 料 液 比 、 提取 温度 及提 取 时 间等条 件 对赤 楠茎 叶果等 不 同器 官 的

    总黄 酮的 提取 进 行正 交设 计实 验 ， 并 用 聚酰胺 吸附 一硝酸 铝 显色 法测 定 的总 黄 酮含 量. 结 果表 明 ：

    茎 的 最佳 提取 条 件为 5 5 乙醇 7 0 ~8 0℃提取 2 h， 含 量 为 1 . 5 0 ； 叶为 7 O%乙醇 9 O～i 0 0℃ 提取

    1 h， 含 量 为 7 . 4 3 ； 青果 皮 为 5 5 乙醇 7 0~8 0℃提 取 2 h， 含 量 为 1 . 2 8 .

    关键 词 ： 赤 楠 ； 茎 ； 叶 ； 青果 皮 ； 总黄 酮 ； 测定

    中 图分 类号 ： Q9 4 9 . 7 41 ， R2 8 4 . 2文献标 识 码 ： A 文章 编号 ： 1 0 0 9 —8 2 2 4( 2 0 0 3) O 4—0 07 2一O 5

    赤楠 S y z y g i u m b u x i f o l i u m Ho o k . e t . 为桃 金娘 科蒲桃属植物 的常绿灌木 ， 多生 于低

    山疏林 或灌丛 中 ， 分 布 于广 东 、 广西 、 贵州 、 湖 南 、 台湾 、 江西 、 浙江 、 安 徽 等省 ， 福 建 各地 极 常

    见[ 1 ] ， 资源极 为丰富. 对赤楠化 学成分的研究 ， 吴兆 明等[ 2 ] 报道该 植物 中稀土元 素 的含量 与分

    布 ， 周法兴等【 3 ] 也分离 与鉴定 了根 与茎 的 6种化 学成 分. 鉴于 迄 今为 止有关 赤 楠 黄酮类 化 合

    物 的研究 未见报道 ， 本文 主要 对赤楠 植物 体不 同器官 的黄酮类 化 合物 进行 预试 ， 并 以正交 试

    验 的优化条件测定其 含量.

    1 材料与方法

    1 . 1 仪 器

    索式提取器 、 粉碎 机 、 恒 温水浴锅 、 砂芯漏斗 、 7 2 1型分光光度计 .

    1 . 2 材料 、 药 品

    阴干粉碎 的赤楠茎 、 叶 、 青 果皮粉末 ( 植 物材 料采 自福州鼓 山) ， 聚酰 胺粉 ( 经 7 O 酒 精预

    处理 ) 、 0 . 1 mg ml 芦 丁标准 液等.

    1 . 3 方法

    1 . 3 . 1 样 品处理 足够重量 的茎 、 叶 、 青果皮粉末 三样 品分别 以石油 醚为溶剂 在索 氏提取 器

    中抽 提以去除叶绿素 和脱蜡 、 脱脂 ， 之后 自然 挥去石油醚 ， 粉末备用.

    1 . 3 . 2 赤楠 ( 茎 、 叶、 果) 化 学成分预 实验 称 取处 理后 的茎 、 叶 、 青 果皮 粉 末各 1 . 0 g， 各 加

    7 O 乙醇 ， 索 氏抽提 3 O mi n ， 得抽 提液. 取抽 提液并 将其 作 为预实验 供试 液 ， 进行 系 列颜 色反

    收 稿 日期 ： 2 O O 3 一O 3 一O 4

    作者简介 ： 黄晓冬 ( 1 9 7 3 一 ) ， 男 ， 福建南安人 ， 讲师， 主要从事植物资源研究.

    维普资讯 http:www.cqvip.com 第 4期 黄 晓冬等 ： 赤楠茎 叶果 总黄酮提取与含量测 定 7 3

    应 ， 检识 总黄酮化合物 的有无 .

    1 . 3 . 3 标 准曲线的制备 精确 吸 取 0 . 1 mg ml 的芦 丁标准 液 0 、 1 . 0 、 2 . 0 、 3 . 0 、 4 . 0 、 5 . 0 ml

    于 6只具 塞试管 中， 各加 6 0 %乙醇使成 5 ml ， 加 5 %Na NOz溶液 0 . 3 ml ， 摇匀 ， 放置 6 mi n； 加

    1 0~AI ( NO。 ) 溶 液 0 . 3 ml ， 摇 匀 ， 放 置 6 mi n； 加 1 mo l L Na OH 溶 液 4 ml ， 加蒸 馏 水 0 . 4

    ml ， 摇匀 ， 放置 1 5 mi n , 于 5 1 0 n m 波长下 测定消光值Ⅲ ， 以消光值对标 样含量 mg数作 图.

    1 . 3 . 4 提取条件 的正 交优选 以提 取剂 浓度 、 提取 时 间、 提 取温 度 、 料 液 比 四个 因素 ， 设 三

    个水平 ， 按 ( 3 ) 正交设计 与实验 .

    1 . 3 . 5 茎叶果总黄 酮含 量测定与 比较 以正 交优选 的最佳条 件 ， 提取 总黄酮 ， 分 别 以聚酰胺

    吸附 一硝酸铝显 色法测定总黄酮 含量 . 计算公 式为

    样 品中总黄酮含量 ( 以芦丁计 ) ( ) 一 × ， ( 1 )

    式 中 ： C—— 样 液含总黄酮 量 ( mg) ； V。 —— 抽 提倍 量体 积 ( m1 ) ； Vz —— 聚酰 胺 处理 时 取样 体

    积 ( m1 ) ； V。 —— 聚 酰胺 处 理 后 定 容 体 积 ( m1 ) ； V —— 显 色 反 应 测 定 取 用 样 液 体 积 ( m1 ) ；

    W—— 称样 量 ( g ) .

    2 结果与分析

    2 . 1 赤楠 ( 茎 、 叶 、 果 ) 黄酮 类化 合物颜色反应检识

    赤楠茎 、 叶 、 果 的黄酮类化合物颜色 反应 检识结果见表 1 .

    表 1 赤楠 茎 、 叶 、 果中 总黄酮 的检识

    注 ：滤 纸 上 进 行 .

    表 1的颜色反应 与黄酮类化合物 的颜色 反应相似 ， 说 明赤楠 的茎 、 叶 、 青果 皮含 有黄酮 类。

    化合 物.

    2 . 2 实验测得 的芦丁标准 曲线

    实验测得芦丁标准品浓度与吸光度的关系见 ： ‘

    图 1 . 以一元线性回归分析图 1 ， 得标准曲线为 Y M 塞 o . 3

    = 1 . 2 4 5 x一 0 . 0 0 5 5， 线性 范 围为 0～0 . 5 mg ， 相 0

    关系数 r - - - -0 . 9 9 9 2 .

    2 . 3 赤楠 ( 茎 、 叶 、 果 ) 总黄酮 最佳提 取条件优选

    0 0 . 1 0. 2 0. 3 0. 4 0. 5

    芦 丁古量【 mg )

    图 1 芦 丁标 准品 浓度 与 吸光 度 的关 系

    准确称取处理过 的样 品各 1 . 0 g ， 以乙醇为 提

    取剂 ， 设 四个 因素三个水平 ， 进行 正交设计 与 实验 ， 提取 液按 制作标 准 曲线 法 处理 ， 测 定其 消

    光值 ， 按公 式( 1 ) 求 出总黄酮含量. 正交设计 与实验 结果 、 实验 分析分别见表 2 —4 .

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