桔梗冬花片质量标准的研究

    金 斌

    (安徽省药品检验所, 安徽 合肥230061)

    摘要: 目的 制定桔梗冬花片质量控制方法。方法 采用薄层色谱法对处方中的桔梗、甘草进行定性鉴

    别; 采用高效液相色谱法对处方中甘草中甘草酸进行含量测定。结果 甘草酸在0. 186 6 ～ 1. 679 4 Lg 呈良好

    的线性关系, r= 0. 999 97,平均回收率为98. 70à , R SD = 0. 77à 。 结论 该方法准确可靠地进行定性、定量检

    测, 能有效地控制制剂的质量。

    关键词: 桔梗冬花片; 定性鉴别; 甘草酸; 薄层色谱; 高效液相色谱

    中图分类号: R284. 1 文献标识码:A 文章编号: 100422199 (2003) 0520039203

    桔梗冬花片由桔梗, 款冬花, 甘草, 远志 4 药味

    经提取制成的。具有镇咳祛痰之功效, 临床上用于治

    疗咳嗽痰多, 支气管炎。原标准为安徽省药品标准,无定性、定量指标, 新修定的药品管理法规定取消地

    方药品标准后, 该品种上升为国家药品标准, 为了有

    效地控制本品的内在质量, 对处方中桔梗, 甘草进行

    薄层定性鉴别, 并采用高效液相色谱法对甘草酸进

    行含量测定, 方法简便灵敏可靠。

    1 仪器与试药

    仪器与试药 液相色谱仪: 美国W atersModel

    510 泵、日本岛津SPD210A vp 检测器、 C2 R 7A 色谱

    处理机; 天平: 瑞士M ETTL ER A E2240 (0. 01m g) ;

    甘草酸铵对照品: 中国药品生物制品检定所提供(批

    号: 073129704, ) ; 桔梗冬花片样品: 由安徽古井集团

    华佗国药厂提供。所用试剂: 水为重蒸馏水, 甲醇为

    色谱纯, 其余试剂均为分析纯。

    2 薄层定性鉴别

    2 . 1 取本品 10 片, 除去包衣, 研细, 取 1. 5 g, 加盐

    酸溶液(1→10) 20 m l, 加热回流 1 h, 放冷, 滤过, 滤

    液用氯仿振摇提取 2 次, 每次 20 m l, 合并氯仿液,加水 30 m l 洗涤, 弃去水洗液, 氯仿液, 置水浴上挥

    干, 残渣加甲醇1m l使溶解, 作为供试品溶液。另取

    桔梗对照药材1 g, 同法制成对照药材溶液。照薄层

    色谱法试验, 吸取对照品溶液和供试品溶液各 5 Ll,分别点于同一硅胶 G 薄层板上, 以氯仿2乙醚(1∶

    1)为展开剂, 展开, 取出, 晾干, 喷以 10%硫酸乙醇

    溶液, 在 100℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱

    中, 在与对照药材色谱相应的位置上, 显相同颜色的

    斑点, 而阴性对照则无相应斑点。

    2 . 2 取本品 10 片, 除去包衣, 研细, 取 2 g, 加乙醚

    40 m l, 加热回流1 h, 弃去乙醚液, 残渣挥去乙醚, 加

    甲醇 30 m l, 加热回流 1 h, 放冷, 滤过, 滤液蒸干, 残

    渣加水 40 m l使溶解, 用水饱和的正丁醇提取 3 次,每次 20 m l, 合并提取液, 用正丁醇饱和的水洗涤 3

    次, 弃去水洗液, 正丁醇液置水浴上蒸干, 残渣加甲

    醇1 m l使溶解, 作为供试品溶液。另取甘草酸单铵

    盐对照品, 加无水乙醇制成每1 m l含1 m g 的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法试验, 吸取上述两种

    溶液各2 Ll, 分别点于同一硅胶G 薄层板上, 以醋酸

    乙酯2甲酸2冰醋酸2水(15∶1∶1∶2)为展开剂, 展

    开, 取出, 晾干, 喷以10%硫酸乙醇溶液, 在100℃加

    热至斑点显色清晰。供试品色谱中, 在与对照品色谱

    相应的位置上, 显相同颜色的斑点, 而阴性对照则无

    相应斑点。

    3 含量测定

    文 献[ 1, 2 ]

    报 道, 甘 草 主 要 含 有 甘 草 酸

    (glycyr rh izic acid)、甘草次酸等三萜皂苷类化合物。

    关于甘草药材及其制剂中甘草酸的测定方法已有不

    少报道[ 2～ 5 ]。在参考文献的基础上, 结合《中国药典》

    2000 年版一部甘草药材的测定及本制剂的特点, 选

    择了HPLC 法测定方中甘草酸的含量。试验表明:

    方法简便、准确、重现性好。其方法学考察如下。

    3 . 1 对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷

    干燥器真空干燥 24 h 的甘草酸铵对照品 9. 33 m g,加 50%甲醇溶解制成每 1 m l 含 0. 093 3 m g 的溶

    液, 作为对照品溶液(储备液)。

    3 . 2 供试品溶液的制备 取本品 10 片, 精密称定,研细, 取约 0. 5 g, 精密称定, 精密加入 50%甲醇 25

    m l, 称定重量, 超声处理 30 m in, 放冷, 称定重量, 用

    50%甲醇补足减失的重量, 摇匀, 滤过, 弃去初滤液,取续滤液作为供试品溶液。

    3 . 3 阴性对照溶液的制备 按处方组成, 取除甘草

    — 93 — 现代中药研究与实践 2003 年第 17 卷第 5 期 Research and P ract ice of Ch ineseM edicines

    ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.外的其余药味, 按制备工艺要求, 制成不含甘草的阴

    性对照样品, 再按供试品溶液的制备方法, 制成阴性

    对照溶液。

    3 . 4 提取条件选择

    3 . 4 . 1 提取方法确定 考虑超声提取方便、快捷,结合中国药典甘草药材的提取, 因此确定超声提取

    方法。

    3 . 4 . 2 溶媒选择 据甘草酸能溶于水、醇的性质,试验中对不同溶媒 30%甲醇、 50%甲醇、 70%甲醇、甲醇及流动相提取进行了比较, 结果以 30%甲醇、50%甲醇及流动相提取色谱行为一致, 以 70%甲醇

    及甲醇提取在甘草酸峰前有一倒峰; 甘草酸的含量

    以 50%甲醇及流动相提取最高(见表 1) ......