桔梗外植体的离体培养和植株再生

    朱玉灵 吴 涛 范泽民 (阜阳市农科所组培中心,阜阳 236031)

    摘要 对桔梗的茎尖、茎段、叶片进行离体培养和植株再生试验研究,结果表明:诱导茎尖、茎段和叶片分化的最佳培养基分别为MS + 62

    BA0. 8mg L + NAA0. 2mg L、 MS + 62BA3. 0mg L + NAA0. 1mg L 和MS + 62BA0. 1mg L + NAA0. 05mg L ,生根成苗的最佳培养基为1 2MS +

    NAA0. 2mg L。

    关键词 桔梗;外植体离体培养;植株再生;培养基配方

    桔梗( Platycodon grandiflorum)又名包袱花、桔梗菜 ,属

    桔梗科桔梗属多年生草本植物 ,根可入药,有润肺、散寒、祛痰、排脓等功效,还是朝鲜族及国外制作酱菜的原料之

    一,其用途十分广泛,市场需求量大。目前生产中,桔梗是

    采用种子繁殖,一般2a 开花,2～3a 为一个生产周期。种

    子寿命仅1a ,当年的发芽率也只有 70 %左右,而且种子繁

    殖易导致种性退化和混杂现象,限制了生产的发展。采用

    组织培养技术快速繁育优良株系,可获得高产高效,是发

    展桔梗生产的一个好的途径。为此,笔者进行了桔梗的外

    植体离体培养基筛选试验和植株成苗培养基筛选试验。

    1 材料与方法

    1. 1 材料的制备

    将2a 生的桔梗块根放在培养箱内催芽 ,待苗长到

    10cm左右时,分别取其顶端嫩芽、中上部叶片和嫩茎 ,用

    质量浓度为 1g L 的洗衣粉水浸泡 1min ,并不断搅动 ,用

    自来水冲洗干净。在无菌条件下 ,用体积分数为 0. 75 的

    酒精灭菌 1min ,再用质量分数 0. 03 的 NaClO 溶液消毒

    15min后用无菌水冲洗4 次。

    1. 2 培养条件与方法

    将消毒处理后的茎尖、茎段和叶片分别接种到 MS附

    加不同激素配比的培养基中 ,琼脂 7g L ,蔗糖 30g L ,pH5. 8 ,27 ±1 ℃,2 500～3 000lx ,连续光照 14h 条件下培

    养,观察记载诱导分化状况。

    2 结果与分析

    2. 1 茎尖的诱导

    在无菌条件下,从嫩芽上切取 0. 5mm 左右的桔梗茎

    尖,接种到MS附加不同激素配比的培养基中培养 ,30 天

    后调查,结果见表 1。桔梗茎尖在培养基 MS + 62BA 0. 8

    mgL + NAA 0. 2mg L中培养,6d 左右芽体开始膨大 ,15d

    左右开始芽分化 ,30 天后每个茎尖分化成具有 7～8 个芽

    的芽丛,并进一步分化成无根幼苗。其他各处理均形成

    较多的愈伤组织 ,仅能分化出极少数的芽 ,或根本不能分

    化出幼芽。

    表1 茎尖诱导的培养基配方及分化状况

    培养基 接种芽数

    个

    芽增殖数

    个瓶

    MS + 62BA0. 8mg L + NAA0. 2mg L 10 7～8

    MS + 62BA1. 5mg L + NAA0. 2mg L 10 3～4

    MS + 2. 42D0. 2mg L 10 0～3

    MS + 2. 42D0. 4mg L 10 0～2

    表2 嫩芽分化诱导的培养基配方及分化状况

    培养基 接种茎段数 个 分化芽数 个瓶 愈伤组织状况

    MS + 62BA0. 5mg L + NAA0. 1mg L 10 1～2 一般 ,致密 ,淡绿色

    MS + 62BA1. 0mg L + NAA0. 1mg L 10 1～2 一般 ,致密 ,淡绿色

    MS + 62BA3. 0mg L + NAA0. 1mg L 10 6～7 少 ,淡绿色

    MS + 62BA4. 0mg L + NAA0. 2mg L 10 2～3 少 ,致密 ,淡绿色

    2. 2 茎段的分化诱导

    将嫩茎按每段 1 个叶节截取,接种到不同激素配比

    作者简介:朱玉灵(1968 - ) ,女,安徽太和县人,安徽农业大学毕业,农

    艺师,主要从事甘薯育种工作 ......