文章编号: 1002 - 1302(2004) 04 - 0088 - 02

    灵芝菌丝体深层培养特性研究

    董洪新 , 梁建光 , 曲红静

    (烟台师范学院生命科学学院,山东烟台 264025)

    摘要: 采用液体深层发酵培养法 ,对灵芝( Ganoderma lucidum)液体发酵的摇瓶装液量、培养基初始pH值、碳

    源、氮源等进行了探讨。结果表明 ,灵芝液体发酵最适条件为 ,在25 ℃下 ,摇瓶250 ml三角瓶装量为100～120 ml ,培养基初始pH值为4. 5～5. 0 ,适用碳源、氮源分别为玉米粉和酵母粉。

    关键词: 灵芝; 深层培养; 菌丝体

    中图分类号: S64612 文献标识码: A

    收稿日期:2004 - 01 - 13

    基金项目:山东省科技攻关项目(编号:011100108) 。

    作者简介:董洪新(1976 - ) ,男,山东高密人,硕士,助教,主要从事微

    生物和菌物方面的教学和研究工作。Tel : (0535) 6681053 ; E -

    mail :ytdhx@163. com。

    灵芝( Ganoderma lucidum)是珍贵的药用真菌 ,属担子菌亚门 ,多孔菌科 ,灵芝属。灵芝性温 ,味甘 ,以子实体或孢子入药 ,有健脑、强身、消炎、利尿、健

    胃、抗肿瘤等作用[1 ]。目前 ,人们大多采用人工栽培

    的灵芝子实体加工成各种药物和保健品。人工栽培

    灵芝子实体生长周期长 ,产量低 ,单靠人工培养子实

    体已远远不能满足需要。利用深层发酵技术 ,缩短

    培养周期 ,扩大药源就显得十分必要。本研究对液

    体发酵的摇瓶装量、培养基初始 pH值、碳源、氮源

    对灵芝菌丝体生长的影响进行探讨。

    1 材料与方法

    1. 1 供试菌种

    灵芝由烟台师范学院食用真菌研究所提供。

    1. 2 培养基

    (1)斜面培养基:土豆 20 %、葡萄糖 2 %、琼脂

    2 %、麦麸 5 %、蛋白胨 0. 5 %、 MgSO4· 7H2O 0. 3 %、KH2 PO4 0. 15 %、维生素 B1 10 mgP L、 pH值自然; (2)

    液体培养基:土豆 20 %、蔗糖 2 %、麦麸 5 %、蛋白胨

    0. 5 %、 KH2 PO4 0. 2 %、 MgSO4· 7H2O 0. 1 %、维生素B1

    10 mgP L、 pH值自然; (3)基础培养基:土豆 20 %、葡

    萄糖 2 %、蛋白胨 1 %、 KH2 PO4 2 %、 MgSO4 · 7H2O

    1 %、 pH值自然。

    1. 3 菌丝体的培养

    1. 3. 1 菌种活化 将保存的菌种接种到斜面培养

    基上 ,25 ℃培养6～7 d。

    1. 3. 2 接种和培养 500 ml 摇瓶装 150 ml 液体培

    养基 ,接种2～3块1 cm2

    斜面菌块 ,置旋转式摇床 ,25 ℃振荡(150 rP min)培养 7～8 d ,将长满菌球的一

    级菌种接入各组试验培养基中 ,振荡培养。

    1. 4 分析测定

    1. 4. 1 菌球计数 取 10 ml 发酵液于平皿中 ,计数[2 ]。

    1. 4. 2 菌丝干重 以纱布过滤 ,用蒸馏水洗 3 次 ,收集沉淀的菌球 ,于60 ℃下烘干后称重。

    1. 4. 3 pH值测定 pHS - 3C型精密pH计测定 ......