自然杂志 l 8 卷5 期 研究通信

    用二茂铁作底物测定

    漆树漆酶的活性

    燕 龆 4 3 0 0 7 2， y - - 武 汉 大 学 生 奇 科 学 学 院 武 汉 o ( 0 ， V 武 汉 大 学 化 学 永 武 汉 4 3 0 0 7 2

    关 键 调 ， . 1 苎 ， 堡 测定， . - — 一 ， .— 一 ，●～ ， ，漆酶是古铜金属酶， 在自然界 主要分布于漆树濠液( 生

    濠) 和真菌类植物中， 分别称漆树漆酶和真菌漆酶. 濠酶能催

    化多元酚和多氪基苯等底物氧化0 ] ， 对垒属有机化合物的

    催化氧化尚不多见_ . _ . 测定漆酶的活性有氧吸收法、 分光光

    度法和高压液相色谱法等口 ， 这些方法采用的底物多为邻、对苯二酚( 胺) 或其衍生物. 用金属有机化合物测定漆酶活性

    未见报道. 本文以二茂铁( F c — H) 为底物. 在二乙二醇单丁醚

    ( D GB E) 磷酸盐缓冲液中， 用分光光度法测定漆树濠酶的

    活性 ， 该法无劓产物干扰、 简便、 准确、 易行.

    禳树禳酶来 自湖北建始毛坝生禳， 接文献方法从生漆分

    离、 纯化 ] ， 纷 C M— S e p h a d e x C ； 。 柱层析， 得蓝色酶藏 I、I、I 3个组分， 分别测其活性. 将二茂铁溶于 D GB E制成0 . 1

    m o l L的=茂铁溶藏， 取体积比为 1 5的 D GB E ~酸盐缓

    冲藏( 0 . 1 m o l L， p H8 . 0 ) 混合溶液 3 m l ， 加入 2 0 二茂铁

    溶液， 混匀后于 2 5 C下恒温 2 0 n， 加入 2 l 漆酶溶} 葭， 搅

    拌 1 0 S ， 追踪 … 处吸光度( A ) 的变化， 求出反应初速率

    v o ( AⅢ r ai n ) ， 换算成底物浓度和古量( 馓摩尔， 。 1 ) . 以二

    茂铁 r 血 表示漆酶活性似 ) ， 以U ml 表示濠酶浓度，测定结果如表 L 所示.

    裹 1 3 种漆酶样品的酶活性及酶浓度

    以上结果表明 ......