收稿日期:2003 - 12 - 29

    作者简介:王慧琴(1972 - ) ,女 ,讲师 ,博士生 1

    文章编号:1006 - 0464 (2004) 02 - 0157 - 04

    温度对红花抗氧化活性的影响

    王慧琴 ,谢明勇

    (南昌大学 食品科学教育部重点实验室 ,江西 南昌 330047)

    摘 要:红花( Carthamus t inctorius L. ) 在100 ℃时 ,加热不同的时间2 ,6 ,15 ,21 ,30 h ,测定其红外漫反射光谱。图

    谱表明 ,加热可能使红花中某些化学成分的结构发生了变化。进一步比较加热前后红花水提物及乙醇提取物对超

    氧自由基 ,DPPH自由基的清除作用。结果进一步表明 ,加热使红花某些活性成分的结构发生了变化 ,而使其抗氧

    化活性受到较大影响。

    关键词:红花; FTIR ; 超氧自由基; DPPH自由基

    中图分类号:O657132 文献标识码:A

    红花( Carthamus t inctorius L. ) ,已被卫生部批

    准为可用于保健食品的物品 ,为菊科植物的干燥花 ,性温味辛 ,入心 ,肝经 ,临床上以水煎液入药。该药

    活血通经 ,化瘀止痛 ,主要用于治疗冠心病、脉管炎、脑梗死等多种血液循环障碍性疾病[1～2 ]

    ,近年来的

    研究表明红花活性成分具有抗氧化作用[3 ]。天然

    抗氧化活性物质的研究对于食品、化妆品以及医疗

    保健行业均有重要意义。

    由于近年来傅里叶变换红外光谱( FTIR)仪器

    和技术的迅速改进 ,所得的傅里叶红外透射图谱或

    漫反射图谱(将药材粉末直接压片或将研磨后的样

    品直接置于样品架上测得) ,不仅可以准确定位而且

    还能进行智能化对比 ,既简化了操作 ,又消除了溶剂

    干扰 ,可以得到整体混合成分的图谱。孙素琴等报

    道利用 FTIR光谱等技术可以直接鉴别中药材 ,并

    可以原位动态监控中药材的稳定性[4 - 6 ]。本文首

    次采用 FTIR漫反射光谱法无损快速分析红花在加

    热前后红外光谱的差别 ,并对加热不同时间红花样

    品的水提物及乙醇提取物对超氧自由基 ,DPPH 自

    由基清除能力作了测定 ,说明温度对红花中化学成

    分及对其抗氧化活性的影响。

    1 实验方法

    111 仪器及试剂

    Spect rum One傅里叶变换红外光谱仪和 Spec2

    t rum One HART Accessory with ZnSe Flat ( PE 公

    司) ;Unico UV - 2100型紫外 - 可见分光光度计(上

    海尤立克公司) ;超级恒温水浴锅(上海宏兴机械造

    公司) ,旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂) ,水泵(河

    南巩义市英峪豫华仪器厂) ,红花:采自新疆 ,由新疆红花红油脂工业有限责

    任公司提供。

    三羟甲基氨基甲烷 , HCl , 邻苯三酚 ,BHT ,DPPH (1 ,1 - diphenyl - 2 - picrylhydrazyl) 。以上

    试剂均为分析纯。

    112 红花的傅里叶变换漫反射光谱

    1. 2. 1 参数设置 4 cm- 1

    分辨率 ,16 次扫描累加。

    1. 2. 2 测定方法 红花于 60 ℃干燥后 ,放置在

    100 ℃烘箱中 , 分别于 2 ,6 ,15 ,21 ,30 h 时取样 ,把

    样品研磨 ,过 100 目筛。然后将研磨后的样品直接

    置于样品架上 ,进行傅里叶变换红外漫反射光谱扫

    描。

    113 抗氧化实验

    1. 3. 1 样品制备

    1. 3. 1. 1 红花水提物的制备 红花于 60 ℃干燥

    后 ,冷却 ,研磨 ,称取 0. 50 g ,加水 50 mL ,超声 1 h ,过滤 ,用少量水洗涤 ,合并滤液 ,减压浓缩 ,真空干

    燥 ,得水提物样品 1。红花(60 ℃干燥)于 100 ℃加

    热2 ,6 ,15 ,21 ,30 h 后 ,冷却 ,研磨 ,分别称取 0. 50

    g ,加水 50 mL ,其余操作同上 ,得水提物样品 2 ,3 ,4 ,5 ,6。

    1. 3. 1. 2 红花乙醇提取物的制备 红花于60 ℃干

    燥后 ,冷却 ,研磨 ,称取 0. 50 g ,加乙醇 50 mL ,超声

    1 h ,过滤 ,用少量乙醇洗涤 ,合并滤液 ,减压浓缩 ,真

    空干燥 ,得乙醇提取物样品 1。红花(60 ℃干燥)于

    100 ℃加热 2 ,6 ,15 ,21 ,30 h后 ,冷却 ,研磨 ,称取 0.

    第 28卷第 2 期

    2004年 6 月

    南昌大学学报(理科版)

    Journal of Nanchang University(Natural Science)

    Vol . 28 No. 2

    J un. 2004

    ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.50 g ,加乙醇 50 mL ,其余操作同上 ,得乙醇提取物

    样品 2 ,3 ,4 ,5 ,6。

    1. 3. 1. 3 抗氧化样品的配制 将 1. 3. 1. 1 中所得

    样品配制成浓度为 1. 0 g· L - 1

    的水溶液。将 1. 3. 1.

    2 中所得样品配制成浓度为 1. 0 g· L - 1

    的乙醇溶液。

    1. 3. 2 红花水提物及红花乙醇提取物 对 O -

    2 ·自

    由基的清除实验 参照文献[7 ]

    的方法进行了改进 ,在

    10 mL 容量瓶中加 5 mL Tris - HCl 缓冲液 ( 50

    mmol· L - 1

    的三羟甲基氨基甲烷 ,1 mmol· L - 1

    的二

    乙三胺基五乙酸 ,pH = 8. 2) ,1 mL 红花水提物或红

    花乙醇提取物溶液 ,在25 ℃恒温水浴中放置20 min

    后 ,加入 0. 1 mL 在 25 ℃预热的邻苯三酚溶液(45

    mmol· L - 1) ,迅速混匀 ,在5 min内 ,每隔30 s在420

    nm处测定溶液的吸光度。计算吸光度随时间的变

    化率 ,并与空白液比较 ,便可得出被测物抑制 O -

    2 ·

    积累作用的能力。每个样品测定 3 次 ,取其平均值。

    清除率计算式: 清除率 = ( Fo - Fx Fo) ×100 %

    式中 Fo和 Fx 分别表示空白溶液和被测液的吸光

    度随时间的变化率。

    1. 3. 3 红花水提物及红花乙醇提取物对 DPPH自

    由基(1 ,1 - diphenyl - 2 - picrylhydrazyl)的清除实

    验 参照文献[8 ]

    的方法 ,将 1 mL 红花水提物 ,乙醇

    提取物分别加入至2. 5 mL 0. 1 g· L - 1

    DPPH的乙醇

    溶液中 ,最后用乙醇定容至 10 mL ,迅速混匀 ,在暗

    处放置 30 min ,在 517 nm 处测定溶液的吸光度 ......