用于DNA提取的油茶叶片保存方法探讨.pdf
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2006年2月23日
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参见附件(133KB，3页)。
第 2 6卷第 6期
2 0 0 4年 1 2月
江 西 农 业 大 学 学 报
Ac t a Ag r i c u l t u r a e Un i v e r s i t a t i s J i a n g x i e n s i s
Vo 1 . 26. No. 6
Dec .. 2 00 4
文章编号 ： 1 0 0 0— 2 2 8 6 ( 2 0 0 4) 0 6— 0 9 1 7— 0 3
用于 D N A提取的油茶叶片保存方法探讨
齐 清 琳
( 福建省林业科学技术推广总站 . 福建 福州 3 5 0 0 0 3 )
摘要： 探讨用于 DN A提取的油茶叶片保存方法 ， 比较 了冷冻(一 7 O℃) 保存与 3种不 同配方 溶液( 窒温 ) 保存
油茶叶片对提取 D N A质量的影响。结果表明， 冷冻法保存 1 0 d 、 2 0 d、 3 0 d 、 6 0 d的油茶叶片提 取的 D N A分子
量约为 4 8 k b ， A . , 6 o A 2 。 值为 1 . 8 3 3—1 . 9 3 6 ， 得率为 3 0 7—3 8 2~ g g ( F W) ， 与从新鲜叶 片提取 的 D N A质量基本
一
致 。实验结果表明. 冷冻法适合于油茶叶片的保存 . 而 3种不同配方溶液保存法不适合 于油茶叶片的保存 。
关键词 ： 油茶 ； DN A提取； 保存
中图分类号 ： 7 9 4 . 4 0 1 文献标识码 ： A
A S t u dy o n M e a n s f o r Pr e s e r v a t i o n o f Le a v e s of
C a me l l i a o l e i f e r a f or DNA E x t r a c t i o n
Q I Qi n g — — l i n
( Ex t e n d i n g S t a t i o n o f F o r e s t r y .S c i e n c e a n d T e c h o n o l o g y， F u j i a n P r o v i n c e.F u z h o u 3 5 0 0 0 3，C h i n a )
Ab s t r ac t： A c o mp a r a t i v e s t u d y o n f o u r me t h o d s f o r pr e s e r v at i o n o f l e a v e s o f Came l l i a o l e r n f or DNA Ex ·
t r a c t i o n wa s c o n du c t e d.The r e s ul t i n di c a t e d t h a t t he mo l e c ul a r we i g ht o f t he e x t r a c t e d DNA f r o m t h e l e a v e s
p r e s e r v e d i n 一7 0 ℃ f r e e z e r f or 1 0 d，2 0 d.30 d a n d 6 0 d wa s a b o ut 48 kb. a nd t he DNA y i e l d wa s 3 0 7 ～
3 8 2I x g g ( f re s h we i g h t ) .T h e r a t i o o f A2 6 0 t o A 2 8 o o f DNA wa s 1 . 8 3 3～1 . 9 3 6 .T h i s r e s u l t wa s s i mi l a r t o t h a t
f ro m f re s h l e a v e s . I t i s s u g g e s t e d t h a t f r e e z i ng p r e s e r v a t i o n i s a n i d e a l me t ho d f or l e a v e s o f C. 0 r a. An d
o t h e r t hr e e me t h o ds，wi t h whi c h l e a v e s we r e pr e s e r v e d i n me di u m c o ns i s t i n g o f di f fe r e nt c o mp o n e nt s a r e n o t
e n c o u r a g i ng .
Ke y wo r d s ：C a me l l i a o l e i f e r a； DNA e x t r a c t i o n； p r e s e r v a t i o n
用于分子生物学研究的植物材料大部分是从远离实验室的野外采集获得 ， 从野外到实验室， 植物材
料的保存是一个关键环节。早在 1 9 8 7年， D o y l e和 D i c k s o n就曾用解剖学上常用的化学试剂来保存植
物材料， 但获得的 D N A均被严重降解…。1 9 9 1年， C h a s e和 Hi l l s用硅胶 快速干燥法保存金 虎尾科
( Ma l p i g h i a c a e ) 等植 物叶 片 ， 获 得 的 DN A与 新 鲜 叶 片 相 似 。1 9 9 2年 ， Ro g s t a d提 出 用 饱 和 N a C I —
C T A B溶液保存番荔枝科( A n n o n a c e a e ) 等植物， 取得 良好效果 】 。2 0 0 2年 ， 王经源等用 S D S提取液保
存刺桫椤 ( A l s o p h i l a s i p i n u l o s a ) 叶片 l 8 0 d ， 获得的 DN A与鲜叶基本一致 。上述方法 的建 立 ， 使野 外大
规模采样成为可能， 大大促进了植物分子生物学研究的进展。然而， 具体应用时， 这些方法也存在一定
的局限， 如硅胶快速干燥法 ......
2 0 0 4年 1 2月
江 西 农 业 大 学 学 报
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Vo 1 . 26. No. 6
Dec .. 2 00 4
文章编号 ： 1 0 0 0— 2 2 8 6 ( 2 0 0 4) 0 6— 0 9 1 7— 0 3
用于 D N A提取的油茶叶片保存方法探讨
齐 清 琳
( 福建省林业科学技术推广总站 . 福建 福州 3 5 0 0 0 3 )
摘要： 探讨用于 DN A提取的油茶叶片保存方法 ， 比较 了冷冻(一 7 O℃) 保存与 3种不 同配方 溶液( 窒温 ) 保存
油茶叶片对提取 D N A质量的影响。结果表明， 冷冻法保存 1 0 d 、 2 0 d、 3 0 d 、 6 0 d的油茶叶片提 取的 D N A分子
量约为 4 8 k b ， A . , 6 o A 2 。 值为 1 . 8 3 3—1 . 9 3 6 ， 得率为 3 0 7—3 8 2~ g g ( F W) ， 与从新鲜叶 片提取 的 D N A质量基本
一
致 。实验结果表明. 冷冻法适合于油茶叶片的保存 . 而 3种不同配方溶液保存法不适合 于油茶叶片的保存 。
关键词 ： 油茶 ； DN A提取； 保存
中图分类号 ： 7 9 4 . 4 0 1 文献标识码 ： A
A S t u dy o n M e a n s f o r Pr e s e r v a t i o n o f Le a v e s of
C a me l l i a o l e i f e r a f or DNA E x t r a c t i o n
Q I Qi n g — — l i n
( Ex t e n d i n g S t a t i o n o f F o r e s t r y .S c i e n c e a n d T e c h o n o l o g y， F u j i a n P r o v i n c e.F u z h o u 3 5 0 0 0 3，C h i n a )
Ab s t r ac t： A c o mp a r a t i v e s t u d y o n f o u r me t h o d s f o r pr e s e r v at i o n o f l e a v e s o f Came l l i a o l e r n f or DNA Ex ·
t r a c t i o n wa s c o n du c t e d.The r e s ul t i n di c a t e d t h a t t he mo l e c ul a r we i g ht o f t he e x t r a c t e d DNA f r o m t h e l e a v e s
p r e s e r v e d i n 一7 0 ℃ f r e e z e r f or 1 0 d，2 0 d.30 d a n d 6 0 d wa s a b o ut 48 kb. a nd t he DNA y i e l d wa s 3 0 7 ～
3 8 2I x g g ( f re s h we i g h t ) .T h e r a t i o o f A2 6 0 t o A 2 8 o o f DNA wa s 1 . 8 3 3～1 . 9 3 6 .T h i s r e s u l t wa s s i mi l a r t o t h a t
f ro m f re s h l e a v e s . I t i s s u g g e s t e d t h a t f r e e z i ng p r e s e r v a t i o n i s a n i d e a l me t ho d f or l e a v e s o f C. 0 r a. An d
o t h e r t hr e e me t h o ds，wi t h whi c h l e a v e s we r e pr e s e r v e d i n me di u m c o ns i s t i n g o f di f fe r e nt c o mp o n e nt s a r e n o t
e n c o u r a g i ng .
Ke y wo r d s ：C a me l l i a o l e i f e r a； DNA e x t r a c t i o n； p r e s e r v a t i o n
用于分子生物学研究的植物材料大部分是从远离实验室的野外采集获得 ， 从野外到实验室， 植物材
料的保存是一个关键环节。早在 1 9 8 7年， D o y l e和 D i c k s o n就曾用解剖学上常用的化学试剂来保存植
物材料， 但获得的 D N A均被严重降解…。1 9 9 1年， C h a s e和 Hi l l s用硅胶 快速干燥法保存金 虎尾科
( Ma l p i g h i a c a e ) 等植 物叶 片 ， 获 得 的 DN A与 新 鲜 叶 片 相 似 。1 9 9 2年 ， Ro g s t a d提 出 用 饱 和 N a C I —
C T A B溶液保存番荔枝科( A n n o n a c e a e ) 等植物， 取得 良好效果 】 。2 0 0 2年 ， 王经源等用 S D S提取液保
存刺桫椤 ( A l s o p h i l a s i p i n u l o s a ) 叶片 l 8 0 d ， 获得的 DN A与鲜叶基本一致 。上述方法 的建 立 ， 使野 外大
规模采样成为可能， 大大促进了植物分子生物学研究的进展。然而， 具体应用时， 这些方法也存在一定
的局限， 如硅胶快速干燥法 ......
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