2. 10 含量测定 按拟定含量测定方法 ,取 3 批供试

    品 ,每批重复3次测定 ,进样量为10 μl ,结果见表4。

    表4 3批样品中的丹参酮 Ⅱ A的含量测定(n = 3)

    批号 20020421 20020422 20020423

    含量(mg粒) 0131 0130 0130

    3 小结

    检测波长的选择[4 ]

    :选用269nm为检测波长 ,分离

    效果较好。

    提取条件的选择:用乙醇提取效果最好。

    本方法亦为含丹参酮 Ⅱ A 的其他复方制剂制定质

    控标准提供参考。

    参考文献:

    [1 ] 于彤,吴秀清1高效液相色谱法测定复方丹参颗粒中丹参酮A含

    量[J ]1中药材,1998 ,21(8) :421.

    [2 ] 谭生建,王文明,胡文祥,等1HPLC法测定通脉冲剂中丹参酮A含

    量的研究[J ] .中国中药杂志,1999 ,24(9) :545.

    [3 ] 焦杨,胡绍山1心脑康冲剂质量标准研究[J ] .天津药学,1999 ,11

    (3) :62.

    [4 ] 郑国墀 1 丹参化学成分的研究概况[J ]1 中国药学杂志,1989 ,24

    (1) :6.

    心肌康注射液丹参药材指纹图谱检测标准

    李永吉,蔡亚平,车欣颖

    (黑龙江中医药大学 ,黑龙江 哈尔滨 150040)

    摘 要:目的:用高效液相色谱 - 紫外(HPLC - UV)法对心肌康注射液中丹参部分指纹图谱中的酚酸类

    成分进行了定性和定量分析。方法:液相色谱条件为色谱柱 Novapark ○ R C18 ,319 ×150mm ,4um。所用洗

    脱剂均为色谱纯: (A) 1 %磷酸水溶液; (B)甲醇(美国Dikma 公司) 。以Waters2996检测器检测 ,检测波长

    269nm ,洗脱80min ,流速110ml min ,柱温 30 ℃,灵敏度 2AUFS。结果:得到了丹参供试品指纹图谱 ,并对

    其酚酸类成分进行了定性和定量分析。结论:方法简便、准确、重现性好。

    关键词:指纹图谱;相似度;回收率;精密度

    中图分类号:R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1002 - 2406(2005) 03 - 0068 - 01

    作者简介:李永吉(1957 - ) ,男,硕士生导师,现主要从事新药研究与

    开发。

    收稿日期:2005 - 01 - 29

    心肌康注射液是一种疗效确切、效果显著的中药

    注射剂 ,由丹参和黄芪两种中药组成。使用传统的紫

    外法不能对其成分进行快速而准确的定性和定量分

    析 ,笔者采用高效液相指纹图谱法 ,对丹参类成分一一

    进行了分析 ,取得了显著成果。

    1 实验材料

    111 仪器与试药

    美国 Waters 公司高效液相 2695 色谱仪: 600 泵 ,Waters2996检测器 ,Millennium32

    色谱工作站;色谱柱:

    Novapark ○ R C18 ,319mm ×150mm ,4um。所用洗脱剂均

    为色谱纯:甲醇(美国 Dikma 公司) ,水(娃哈哈纯净

    水) ,磷酸(分析纯 ,产于天津化学试剂厂) 。

    112 材料与对照器

    丹参来源于唇形科鼠尾草属植物 Salciamiltiorrhiza

    Bge的干燥根 ,产于天士力的丹参药材基地。丹参素

    和原儿茶醛购于中国药品生物制品检定所;迷迭香酸

    和丹酚酸B 均为自制 ,纯度大于96 %。

    2 实验部分

    211 供试品的制备 取 5g 药材 ,加入 10 倍量的水 ,置索氏提取器中 ,在100 ℃水浴中回流提取 2h ,趁热过

    滤药液 ,将滤液蒸干 ,用适量甲醇超声溶解 ,定容置

    25ml 容量瓶中 ,过滤即得 012g 生药 ml 的供试品溶

    液。

    212 对照品溶液的制备

    将迷迭香酸、原儿茶醛、丹参素、丹酚酸B 对照品

    分别 用 甲 醇 定 容 制 成 0198mg ml , 01041mg ml ,01776mg ml ,013mg ml对照品溶液。

    · 86 · ITCM.May. 2005 ,Vol . 22 ,NO. 3

    ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.213 测定方法

    21311 色谱条件

    用甲醇 - 水梯度洗脱 ,检测波长 280nm ,洗脱

    80min ,流速 110ml min ,柱温 30 ℃,灵敏度 2AUFS。流

    动相为甲醇 - 1 %磷酸梯度洗脱 ,波长 269nm ,洗脱时

    间50min。缓冲液和甲醇使用前须以0145um 滤膜过

    滤 ,超声脱气。洗脱程序见表1。

    表1 梯度洗脱程序

    t min 容剂A的百分率 溶剂B的百分率

    0 70 30

    9 70 30

    35 62 38

    50 50 50

    60 30 70

    65 20 80

    213. 2 丹参标准曲线的制备

    将212制得的对照品溶液按照一定比例注入色谱

    仪中 ,测得峰面积积分值 ,以对照品质量为横坐标 ,以

    峰面积为纵坐标 ,得到:

    原儿茶醛标准曲线方程:

    Y= 511 × 106

    X + 713 × 105

    r = 019997

    丹参素标准曲线方程:

    Y= 417 × 105

    X + 414 × 104

    r = 019998

    迷迭香酸标准曲线方程:

    Y= 111 × 106

    X + 115 × 106

    r = 019994

    丹酚酸B 标准曲线方程:

    Y= 114 × 106

    X + 613 × 104

    r = 019996

    213. 3 精密度实验

    取原儿茶醛、丹参素、迷迭香酸和丹酚酸 B 对照

    品溶液 5 μl 在选定色谱条件下重复进样 5 次 ,计算相

    对标准偏差 RSD( %)为1148 %～2196 %。

    213. 4 重现性实验

    精密吸取注射剂 200205 号样品 5 份 ,按“按样品

    含量测定”项下方法分别测定原儿茶醛、丹参素、迷迭

    香酸和丹酚酸B 的含量 ,计算相对标准偏差 RSD( %)

    为115 %～2195 %。

    213. 5 回收率实验

    精密称取注射剂 200206 号 ,已知原儿茶醛( Ⅰ) 、丹参素( Ⅱ) 、迷迭香酸( Ⅲ)和丹酚酸B ( Ⅳ)含量的样

    品01192、 11082、 11115、 101920mg ,加入适量对照品 ,用

    甲醇定溶于10ml 容量瓶中 ,按标准曲线项下方法进行

    HPLC测定 ,计算回收率在9615 %～102 %之间。

    213. 6 含量测定

    精密吸取丹参供试品液 10 μl ,注于液相色谱仪中

    测量 ,得十批制剂的原儿茶醛、丹参素、迷迭香酸、丹酚

    酸B 的峰面积积分值 ,由线性方程求得相应的含量 ,结果见表2。

    表2 10批丹参提取物各成分的含量

    对照品

    批号 原儿茶醛 丹参素 迷迭香酸 丹酚酸B

    1 01154 01854 01930 91345

    2 01204 11187 11095 101552

    3 01229 11416 11115 111460

    4 01201 11242 11105 101499

    5 01219 11203 11105 101620

    6 01213 01904 01905 111595

    7 01215 11150 11105 101455

    8 01151 11044 01995 111196

    9 01215 11121 11370 111595

    10 01123 01698 11420 111685

    含量(mg ml) 01192 11082 11115 101920

    5ml 成品中

    酚酸量(mg)

    01960 51410 51575 541600

    3 结论

    通过建立丹参注射剂指纹图谱来对丹参提取液中

    的主要成分进行定性后定量分析 ,速度快、误差小、精

    密度高、效果显著 ......