收稿日期:2004 - 09 - 21

    作者简介:贾英(1969 - ) ,女(汉族) ,辽宁沈阳人 ,讲师 ,在读博士 ,主要从事教学和中药质量控制方面的研究 ,Tel .

    024 - 23986466 ,E- mail xiaojia877877 @sina. com。

    文章编号: 1006 - 2858 (2005) 03 - 0217 - 03

    正交设计法优选白芷的提取工艺

    贾 英 , 孙振蛟 , 包文芳

    (沈阳药科大学 中药学院 , 辽宁 沈阳 110016)

    摘要: 目的 以欧前胡素、异欧前胡素的提取总量为考察指标 ,对影响香豆素类化合物提取工艺的

    因素进行研究 ,优选白芷的最佳提取工艺。方法 采用 RP2HPLC 法 ,Accusil C18柱 (250 mm ×

    416 mm ,10μm) ,流动相为甲醇2水(体积比 65∶ 35) ;检测波长 251 nm。结果 欧前胡素与异欧前胡

    素分别在 01768～19120 mg· L - 1

    ( r = 01999 7) 、 012～1610 mg· L - 1

    ( r = 01999 8) 内与峰面积呈

    良好的线性关系( n = 6) ,方法回收率( n = 9)分别为 9618 %、 9810 % ,RSD 分别为 210 %、 119 %。

    结论 白芷的最佳提取工艺为 A3 B2 C3 ,即用 8 倍量的 95 %( w)的乙醇提取 3 次 ,每次 4 h。

    关键词: 反相高效液相色谱法; 正交试验; 白芷; 提取工艺; 欧前胡素; 异欧前胡素

    中图分类号: R 97122 文献标识码: A

    白芷(Radix Angelicae Dahuricae)为伞形科当

    归属植物白芷 ( A ngel ica dahurica ( Fisch. ex

    Hoffm. )Benth. et Hook. f . ) 或杭白芷 ( A ngel ica

    dahurica (Fisch. ex Hoffm. )Benth. et Hook. f . var .

    f ormosana (Boiss. ) Shan et Yuan)的干燥根 ,为一

    常用中药。具有除风散湿、通窍止痛、消肿排脓等

    功效。用于感冒头痛、眉棱骨痛、鼻塞、牙痛、疮痈

    肿痛等[1 ]。白芷中总香豆素类为其镇痛的主要

    成分 ,又以欧前胡素和异欧前胡素为其中主要两

    种 ,其止痛效果已被充分肯定[2 ]。曾有人用薄层

    扫描法定量考察白芷的提取工艺[3 ,4 ]。作者以欧

    前胡素和异欧前胡素为指标 ,采用反相高效液相

    色谱法 ,通过正交试验对影响回流提取效果的诸

    因素进行考察 ,选择最佳提取条件 ,优化白芷主要

    活性部位香豆素类成分的提取工艺 ,为白芷的提

    取开发提供可借鉴的工艺。

    1 仪器与材料

    LC— 10AT VP Shimadzu 高效液相色谱仪

    (日本岛津公司) , SPD—10A VP Shimadzu 紫外

    检测器(日本岛津公司) , RE—52A 旋转蒸发仪

    (上海亚荣生化仪器厂) ,HH—2 数显恒温水浴锅

    (常州国华电器有限公司) ,DT—100 光电天平

    (北京光学仪器厂) 。

    乙腈 (色谱纯 , Caledon laboratories L TD ,Canada) ,甲醇(色谱纯 ,山东禹王实业有限公司禹

    城化工厂) ,乙醇(分析纯 ,天津市博迪化工有限公

    司) ,欧前胡素对照品(自制 ,经面积归一化法测

    定 ,纯度 > 99 %) ,异欧前胡素对照品(自制 ,经面

    积归一化法测定 ,纯度 > 99 %) 。

    2 白芷中欧前胡素和异欧前胡素的

    含量测定

    211 色谱条件选择及测定

    色谱柱:Accusil C18柱(250 mm ×416 mm ,10μm) ;流动相:甲醇2水(体积比 65∶ 35) ;检测波

    长:251 nm;流速:018 mL· min - 1;柱温:35 ℃;进

    样量:20μL。测定结果见图 1。

    212 供试品溶液制备

    取杭白芷干燥根 25 g ,粉碎成 40 目粗粉 ,加

    入8 倍量 95 %( w)的乙醇回流提取多次 ,每次提

    取 2 h。合并滤过液 ,蒸干 ,残渣用甲醇溶解 ,定

    容至 25 mL ,取 1 mL ,用甲醇稀释至 10 mL ,密

    封 ,低温避光保存 ,备用。

    213 线性关系考察

    分别精密称取欧前胡素对照品 916 mg、异欧

    前胡素对照品 510 mg ,分别置 25 mL 量瓶中 ,用

    甲醇溶解并定容至刻度 ,摇匀 ,备用。再精密量取

    欧前胡素和异欧前胡素对照品溶液 1 mL 稀释至

    10 mL ,即配成欧前胡素、异欧前胡素的质量浓度

    分别为 01038 4 g· L - 1

    、0102 g· L - 1

    的对照

    品溶液。分别精密量取欧前胡素、异欧前胡素对

    第 22 卷 第 3 期

    2 0 0 5 年 5 月

    沈 阳 药 科 大 学 学 报

    Journal of Shenyang Pharmaceutical University

    Vol122 No13

    May 2005 p1217

    ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.A—Imperatorin standard ; B—isoimperatorin standard ; C—Samples of A ngel ica dahurica

    Fig. 1 RP 2HPLC chromatograms

    照品溶液 011、 012、 014、 016、 110、 210、 310、 510 mL

    置 10 mL 量瓶中,用 50 %(φ)甲醇定容至刻度,摇

    匀 ......