正交试验法在牛蒡组织培养中的应用.PDF
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2006年2月23日
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参见附件(83KB，4页)。
第 26 卷第 6 期 西 南 农 业 大 学 学 报 (自然科学版) Vol . 26 ,No. 6
2004 年 12 月 Journal of Southwest Agricultural University (Natural Science) Dec. 2004
文章编号:1000 - 2642(2004) 06 - 0696 - 03
正交试验法在牛蒡组织培养中的应用①
何 建,梁国鲁 (西南农业大学 园艺园林学院 ,重庆 400716)
摘要:应用正交设计法研究BA ,NAA及蔗糖 3 个因子对牛蒡( A rct ium lappa L. )组培苗的增殖率的影响 ,同时考察了
NAA ,BA及不同浓度的 MS培养基 3 个因子对牛蒡组培苗生根培养的影响 ,各试验均按正交表L9 (34)形成 3 因素、 3
水平的不同配比。试验结果表明:最佳的增殖培养基是 MS + BA 2. 0 mg L + NAA 0. 05 mg L + 蔗糖30 g L ,最适于
生根的培养基是 1 2 MS + BA 0. 1 mg L + NAA 0. 05 mg L + 30 g L 蔗糖。
关 键 词:牛蒡;组织培养;正交试验法
中图分类号:S 567. 203. 53 文献标识码:A
APPL ICATION OF ORTHOGONAL EXPERIMENT IN TISSUE CUL TURE
OF A RCTIUM L A PPA L .
HE Jian , LIANG Guo - lu
(College of Horticulture and Landscape Engineering , Southwest Agricultural University , Chongqing 400176 , China)
Abstract :In order to analyze the effect of different contents of hormones and sucrose in the medium on tufted - bud induction and tufted -
bud rooting of A rctium lappa L. , tissue culture of the plant with the seeds as the ex plants was carried out , in which the orthogonal design , L9
(34) , was used. The results indicated that MS su pplemented with BA 2. 0 mg L + NAA 0. 05 mg L + sucrose 30 g L was suitable for its
multiplication and1 2MS su pplemented with BA 0. 1 mg L + NAA 0. 05 mg L + sucrose 30 g L was optimal for rooting.
Key words : A rct ium lappa L. ; tissue culture ; orthogonal experiment
牛蒡( A rct ium lappa L. ) ,别名恶实根、鼠粘根、牛菜、牛旁等 ,属于菊科牛蒡属 ,2 a生草本植物 ,以肉
质根为产品。肉质根细长呈圆柱形 ,长度一般为 60
～100 cm ,皮呈黄褐、黑褐等色;肉质为灰白色 ,稍粗
硬 ,药食 2 用。现代医学研究证明 ,牛蒡根中含有聚
乙炔化合物 ,对各种致病细菌及真菌有抑制作用。据
业内人士介绍 ,牛蒡含胡萝卜素是胡萝卜的 150 倍 ,它的蛋白质和钙的含量是根茎类蔬菜之首。另据了
解 ,牛蒡中还含有丰富的菊糖 ,对控制尿糖有一定的
辅助疗效 ,因此很适合糖尿病患者食用[1 ]。而牛蒡
组织培养工作未见报道。本文就牛蒡的丛生芽诱导、生根诱导 ,以及利用正交实验进行培养系统的优化作
初步探讨 ,以期为牛蒡的繁殖提供一条新途径。
1 材料与方法
1. 1 试验材料
供试材料为牛蒡成熟种子[2 ]。选取饱满的种
子 ,剥去种皮 ,用自来水冲洗种子后 ,置于三角瓶中 ,待用。
1. 2 试验方法
1. 2. 1 外植体消毒与初代培养 在超净工作台中 ,将牛蒡的去皮种子用 75 %的酒精表面消毒 15 s ,取
出后用 0. 1 %升汞水溶液消毒 10 min ,无菌水冲洗 5
次 ,接种于 MS +BA 1. 0 mg L + NAA 0. 05 mg L +
30 g L 蔗糖的初代培养基中。每瓶接种 4 颗去皮种
① 收稿日期:2004 - 06 - 28
作者简介:何 建(1980 - ) ,男,重庆綦江人,西南农业大学硕士研究生,从事果树生物技术研究。
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.子 ,共 90 瓶。各种培养基加琼脂至 6 g L ,pH 调至
5. 8。
1. 2. 2 正交试验设计与继代增殖培养 选取 BA ,NAA和蔗糖 3 个因子 ,每个因子取 3 个水平。因子
水平安排见表 1。采用L9 (34)正交表 ,考察对牛蒡增
殖率的影响。待接种的种子萌发并抽出幼芽后 ,切取
幼芽转入表 3 中按正交试验 L9 (34)设计的不同的继
代增殖培养基中 ,去掉污染的材料。每处理 10 瓶 ,每
瓶 3～4 个幼芽。30 d后统计增殖率。
表1 增殖培养基的L9 (34)正交试验设计表头[3 ]
(供试因子和水平)
Table 1 Orthogonal table of medium for multiplication (factors and levels)
因子水平
Levels of
factor
因子种类 Factor
A B C
BA (mg· L - 1) NAA (mg· L - 1) 蔗糖 (g· L - 1)
1 0. 5 0. 05 20
2 1. 0 0. 1 30
3 2. 0 0. 2 40
表2 生根培养基正交试验设计表头(供试因子及水平)
Table 2 Orthogonal table of medium for rooting (factors and levels)
因子水平
Levels of
factor
因子种类 Factor
D E F
NAA (mg· L - 1) BA (mg· L - 1) 培养基
1 0. 5 0 1
2 1. 0 0. 1 1 2
3 2. 0 0. 2 1 3
1. 2. 3 正交试验设计与生根培养 将牛蒡嫩茎接种
于不同浓度的培养基以及不同浓度的生长素和分裂
素配比的培养基上(见表 2) ,同样采用 L9 (34) 正交
表 ,考察对牛蒡生根率的影响 ,以筛选最佳生根培养
基 ......
2004 年 12 月 Journal of Southwest Agricultural University (Natural Science) Dec. 2004
文章编号:1000 - 2642(2004) 06 - 0696 - 03
正交试验法在牛蒡组织培养中的应用①
何 建,梁国鲁 (西南农业大学 园艺园林学院 ,重庆 400716)
摘要:应用正交设计法研究BA ,NAA及蔗糖 3 个因子对牛蒡( A rct ium lappa L. )组培苗的增殖率的影响 ,同时考察了
NAA ,BA及不同浓度的 MS培养基 3 个因子对牛蒡组培苗生根培养的影响 ,各试验均按正交表L9 (34)形成 3 因素、 3
水平的不同配比。试验结果表明:最佳的增殖培养基是 MS + BA 2. 0 mg L + NAA 0. 05 mg L + 蔗糖30 g L ,最适于
生根的培养基是 1 2 MS + BA 0. 1 mg L + NAA 0. 05 mg L + 30 g L 蔗糖。
关 键 词:牛蒡;组织培养;正交试验法
中图分类号:S 567. 203. 53 文献标识码:A
APPL ICATION OF ORTHOGONAL EXPERIMENT IN TISSUE CUL TURE
OF A RCTIUM L A PPA L .
HE Jian , LIANG Guo - lu
(College of Horticulture and Landscape Engineering , Southwest Agricultural University , Chongqing 400176 , China)
Abstract :In order to analyze the effect of different contents of hormones and sucrose in the medium on tufted - bud induction and tufted -
bud rooting of A rctium lappa L. , tissue culture of the plant with the seeds as the ex plants was carried out , in which the orthogonal design , L9
(34) , was used. The results indicated that MS su pplemented with BA 2. 0 mg L + NAA 0. 05 mg L + sucrose 30 g L was suitable for its
multiplication and1 2MS su pplemented with BA 0. 1 mg L + NAA 0. 05 mg L + sucrose 30 g L was optimal for rooting.
Key words : A rct ium lappa L. ; tissue culture ; orthogonal experiment
牛蒡( A rct ium lappa L. ) ,别名恶实根、鼠粘根、牛菜、牛旁等 ,属于菊科牛蒡属 ,2 a生草本植物 ,以肉
质根为产品。肉质根细长呈圆柱形 ,长度一般为 60
～100 cm ,皮呈黄褐、黑褐等色;肉质为灰白色 ,稍粗
硬 ,药食 2 用。现代医学研究证明 ,牛蒡根中含有聚
乙炔化合物 ,对各种致病细菌及真菌有抑制作用。据
业内人士介绍 ,牛蒡含胡萝卜素是胡萝卜的 150 倍 ,它的蛋白质和钙的含量是根茎类蔬菜之首。另据了
解 ,牛蒡中还含有丰富的菊糖 ,对控制尿糖有一定的
辅助疗效 ,因此很适合糖尿病患者食用[1 ]。而牛蒡
组织培养工作未见报道。本文就牛蒡的丛生芽诱导、生根诱导 ,以及利用正交实验进行培养系统的优化作
初步探讨 ,以期为牛蒡的繁殖提供一条新途径。
1 材料与方法
1. 1 试验材料
供试材料为牛蒡成熟种子[2 ]。选取饱满的种
子 ,剥去种皮 ,用自来水冲洗种子后 ,置于三角瓶中 ,待用。
1. 2 试验方法
1. 2. 1 外植体消毒与初代培养 在超净工作台中 ,将牛蒡的去皮种子用 75 %的酒精表面消毒 15 s ,取
出后用 0. 1 %升汞水溶液消毒 10 min ,无菌水冲洗 5
次 ,接种于 MS +BA 1. 0 mg L + NAA 0. 05 mg L +
30 g L 蔗糖的初代培养基中。每瓶接种 4 颗去皮种
① 收稿日期:2004 - 06 - 28
作者简介:何 建(1980 - ) ,男,重庆綦江人,西南农业大学硕士研究生,从事果树生物技术研究。
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.子 ,共 90 瓶。各种培养基加琼脂至 6 g L ,pH 调至
5. 8。
1. 2. 2 正交试验设计与继代增殖培养 选取 BA ,NAA和蔗糖 3 个因子 ,每个因子取 3 个水平。因子
水平安排见表 1。采用L9 (34)正交表 ,考察对牛蒡增
殖率的影响。待接种的种子萌发并抽出幼芽后 ,切取
幼芽转入表 3 中按正交试验 L9 (34)设计的不同的继
代增殖培养基中 ,去掉污染的材料。每处理 10 瓶 ,每
瓶 3～4 个幼芽。30 d后统计增殖率。
表1 增殖培养基的L9 (34)正交试验设计表头[3 ]
(供试因子和水平)
Table 1 Orthogonal table of medium for multiplication (factors and levels)
因子水平
Levels of
factor
因子种类 Factor
A B C
BA (mg· L - 1) NAA (mg· L - 1) 蔗糖 (g· L - 1)
1 0. 5 0. 05 20
2 1. 0 0. 1 30
3 2. 0 0. 2 40
表2 生根培养基正交试验设计表头(供试因子及水平)
Table 2 Orthogonal table of medium for rooting (factors and levels)
因子水平
Levels of
factor
因子种类 Factor
D E F
NAA (mg· L - 1) BA (mg· L - 1) 培养基
1 0. 5 0 1
2 1. 0 0. 1 1 2
3 2. 0 0. 2 1 3
1. 2. 3 正交试验设计与生根培养 将牛蒡嫩茎接种
于不同浓度的培养基以及不同浓度的生长素和分裂
素配比的培养基上(见表 2) ,同样采用 L9 (34) 正交
表 ,考察对牛蒡生根率的影响 ,以筛选最佳生根培养
基 ......
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