猪血管内皮细胞的培养与表型鉴定
异种移植,,血管内皮细胞;异种移植;细胞培养;猪,1材料和方法,2结果,3讨论,【参考文献】
【关键词】 血管内皮细胞;异种移植;细胞培养;猪[摘要] 目的: 原代培养猪血管内皮细胞并纯化和成功传代.方法: 自乳猪活体状态下获取腹主动脉,以胶原酶消化、培养PAEC,观察细胞形态、贴壁率,以DiIAcLDL吸收试验进行细胞类型的鉴定.结果: 原代PAEC贴壁率约90%,培养至第2代即可获得纯化的PAEC,第5代至第12代细胞增殖较快,形态正常,呈圆形、短梭形和三角形,DiIAcLDL吸收试验阳性.结论: 通过活体状态下获取血管、控制杂细胞污染的途径以及合理选择酶消化法可以有效快捷地获得纯化的PAEC并稳定传代.
1材料和方法
1.1材料
乳猪(体质量8 kg)由第四军医大学西京医院实验动物中心提供,Ⅰ型胶原酶(Sigma),胰蛋白酶,DMEM培养基(Gibco),胎牛血清(Gibco),DiIAcLDL(美国Cell Applications公司),一次性培养瓶(Nunc),荧光显微镜等.
1.2方法
以氯胺酮80 mg/kgim麻醉 ......
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