高效液相色谱法测定蛇胆和人工蛇胆中的结合胆汁酸

    肖洪涛3 1

    杨 光2

    石朝周2

    1

    (襄樊市卫生学校 ,襄樊 441021) 2

    (同济医科大学药学院 ,武汉 430030)

    2000209225收稿;2001201205接受

    1 引 言

    人工蛇胆是天然蛇胆的人工模拟物 ,其中含有牛磺胆酸(taurocholic axid ,TCA) , 牛磺去氧胆酸(taurodeoxycholic acid ,TDCA) ,胆绿素 ,粘蛋白等成分。本品是正在开发的一类新药 ,为了制定质量标准 ,需要建立检测方法。以往天然蛇胆的

    质量检测方法主要采用薄层扫描法和先将 TCA和 TDCA水解成游离胆酸 ,再做成各种衍生物测定 ,操作繁琐费时 ,且精

    确性及重复性不如高效液相色谱法(HPLC) 。本文采用 HPLC法 ,直接测定人工蛇胆中 TCA和 TDCA ,选择二苯胺为内标

    物 ,操作简单 ,方法准确 ,并用于测定天然蛇胆干燥品(乌梢蛇)的含量同时与人工蛇胆进行了比较。

    2 实验部分

    2. 1 仪器与试剂 LC23A高效液相色谱仪(日本岛津公司) ,SPD22A检测器(日本岛津公司) ,C2R1B 数据处理机(日本岛

    津公司) 。天然蛇胆和人工蛇胆样品 ,TCA(Na盐)和 TDCA(Na 盐)标准品(同济医科大学药学院物理化学教研室提供) ,二苯胺(DA ,内标) ,分析纯 ,其他试剂也均为分析纯 ,双蒸水。

    2. 2 实验条件及溶液配制 (1)色谱条件 色谱柱 Spherisorb C18 4. 6 ×25 mm(中国科学院大连化学物理研究所) ,流动

    相:甲醇20. 02 molP L 磷酸缓冲液(60∶ 40 VP V) ,pH为4. 10 ,流速1mLP min , 柱温50℃,检测波长 210 nm , 灵敏度 0. 08AUFS ,进样量10μ L ......