皱瘤海鞘的化学成分研究

    王超杰3

    苏镜娱 曾陇梅

    (河南大学化学系 ,开封 475001) (中山大学化学系 ,广州 510275)

    摘 要 从中国广东惠州大亚湾海域采集的皱瘤海鞘的甲醇2氯仿提取物中分离出混合甾醇和神经酰

    胺两类化合物 ,混合甾醇经波谱分析和 GCP MS联机分析 ,发现其主要由9种甾醇组成 ,含量约为甲醇2氯

    仿提取物的20 %。通过波谱分析(如 IR ,1

    HNMR ,13

    CNMR(DEPT) 、 1

    H21

    H COSY、 RCT、 FABMS)和 GCP MS分

    析证明神经酰胺结构是由4个同系物组成 ,含量为提取物的0. 1 %。同时也初步探讨了共生的皱瘤海鞘

    与冠瘤海鞘化学成分差异的原因。

    关键词 皱瘤海鞘 ,甾醇 ,神经酰胺 ,气相色谱P 质谱法

    2000212213收稿;2001205211接受

    本文系国家自然科学基金资助项目(No. 29572088)

    1 引 言

    海鞘因含有很多种生理活性良好的化合物 ,如抗肿瘤活性物质等〔 1〕,而受到越来越多的研究者的关

    注 , 国内也已开始这方面的研究工作〔 2〕。皱瘤海鞘(Styela. plicata)是一种可以食用的海鞘 ,国外有关其

    营养成分的研究很多 ,如氨基酸、多糖等〔 3 ,4〕。从美国佛罗里达产皱瘤海鞘中还曾分离出西松烷型二萜 ,这也是首次从海鞘中分到的萜类物质〔 5〕。而产于南中国海的皱瘤海鞘化学成分的研究尚未见报道。

    采自广东惠州大亚湾的皱瘤海鞘与前文报道过的冠瘤海鞘〔 6〕共生在养殖的贝壳上 ,皱瘤海鞘样品

    呈暗红色圆柱状 ,长约5～8 cm ,比冠瘤海鞘(1～3 cm)大。经研究发现二者化学成分有异有同。在对皱

    瘤海鞘甲醇2氯仿提取物的研究中也分离得到甾醇 B和神经酰胺 C这两个生理活性组分 ,甾醇组分经波

    谱分析和 GCP MS联机分析鉴定出9种甾醇 ,总量约占甲醇2氯仿提取物的 20 %;神经酰胺经波谱分析和

    GCP MS分析证明它是由多个同系物组成 ,总量约占提取物的0. 1 %。

    2 实验部分

    2. 1 仪器

    HP5972型气相色谱2质谱联用仪(美国 HP 公司) ,Nicolet 5DX FT红外光谱仪(美国 Nicolet 公司) ,J EOL FX90QFT核磁共振仪(日本J EOL 公司) ,UNITY 2500核磁共振仪(美国UNITY公司) ,VG 2ZAB2HS质

    谱仪(英国VG公司) ,LABCONCO冻干机(美国 CONCO公司) ,分离用硅胶材料系青岛海洋化工厂产品。

    2. 2 色谱分析条件

    HP25石英毛细管柱(30 m×0. 25 mm i . d. ) ; EI 70 eV ;柱初始温度 100 ℃,保留 5 min ,终止温度为

    290 ℃,保留30 min ;升温速度为3 ℃ P min ;进样口温度290 ℃,检测温度260 ℃。

    2. 3 提取分离

    皱瘤海鞘采自广东惠州大亚湾 ,由中国科学院南海海洋研究所杨国峰教授鉴定种属。皱瘤海鞘甲

    醇2氯仿提取物的分离方法同文献〔 6〕,得甾醇组分 B和神经酰胺 C。用甾醇组分 B进行 GCP MS联机分

    析 , B经精制得白色针状晶体( Ⅰ a) ,用( Ⅰ a)进行波谱分析。

    3 结果与讨论

    3. 1 甾醇组分 B

    3. 1. 1 甾醇结构分析 分离出的白色针状晶体( Ⅰa)的红外光谱中 3345 ,1652 ,1075 ,1041 cm- 1

    处的吸

    收峰 ,以及1

    HNMR和13

    CNMR(CDCl3 ,TMS)具有的典型的甾醇类化合物特征 ,说明这些化合物是甾醇类物

    第29卷

    2001年11月 分析化学 (FENXI HUAXUE) 研究简报

    Chinese Journal of Analytical Chemistry

    第11期

    1311～1314质。组分在 FABMS(甘油 ,相对丰度)的高质区出现415 (32) ,413 (11) ,399 (23) ,387 (26)等强度不等的离

    子峰 ,同时还有一系列甾醇的特征碎片峰如: mP z 314 ,299 ,297 ,271 ,255 ,253 ,231 ,229 ,213等 ,进一步证

    明它是具有正常甾核的混合甾醇。而且由于没有明显的分子离子峰 ,可能没有一种成分占绝对优势 ,因

    此 ,用常规层析方法很难将其分开。

    3. 1. 2 甾醇组分的 GCP MS分析 采用 GCP MS联用技术对混合甾醇进行了测定 ,从中检出了 10 种物

    质 ,经计算机谱库检索及质谱谱图解析〔 7〕,鉴定了其中 9 种 ,另一种物质未鉴定出。甾醇相对含量在

    10 %以上有4种 ,1～10 %间有4种 ,1 %以下有1种 ,混合甾醇的 GC总离子流谱图(TIC)见图1 ,GC保留

    时间( tR)及各组分的相对含量见表1。

    表1 皱瘤海鞘中的甾醇组成

    Table 1 The sterol composition in Styela plicata

    序号 No.

    名称 Name 分子式 Formula

    分子离子

    M+

    保留时间 Retention time

    (min)

    相对含量%

    Relative

    content

    相似度 Similarity

    ( %)

    1 未知物 Unknown compound 34. 76 0. 25

    2 胆甾25 ,222二烯23 β 2醇 Cholest25 ,222dien23 β 2 ol C27H44O 384 37. 23 1. 82 87

    3 胆甾252烯23 β 2醇 Cholest252en23 β 2 ol C27H46O 386 38. 40 25. 06 96

    4 麦角甾2222烯23 β 2醇 Ergosta2222en23 β 2 ol C28H46O 398 39. 11 16. 56 97

    5 麦角甾224(28)2烯23 β 2醇 Ergosta224(28)2en23 β 2 ol C28H48O 400 40. 14 22. 60 94

    6 豆甾25 ,222二烯23 β 2醇 Stigma25 ,222dien23 β 2 ol C29H48O 412 40. 59 7. 83 91

    7 豆甾252烯23 β 2醇 Stigma252en23 β 2 ol C29H50O 414 41. 62 23. 28 95

    8 豆甾272烯23 β 2醇 Stigma272en23 β 2 ol C29H50O 414 41. 77 1. 84 92

    9 豆甾25 ,24 (28)2二烯23 β 2醇 Stigma25 ,24(28)2dien23 β 2 ol C29H50O 412 42. 12 0. 34 88

    10 豆甾224 (28)2烯23 β 2醇 Stigma224(28)2en23 β 2 ol C29H50O 414 42. 43 0. 42 90

    图1 混合甾醇的总离子流图

    Fig. 1 The total ion chromatogram of sterols

    峰号同表1 (peak No. as in table 1) ......