四、细胞及分子生物学技术 (一)细胞生物学技术

    细胞生物学(cellular biology)是从细胞、亚细胞和分子三个水平研究细胞生命活动的科学，是现代生命学科的前沿领域之一。细胞生物学主要包括以下几个方面：①细胞的结构和化学组成。②细胞及细胞器官的功能。③细胞的增殖与分化。④细胞的衰老与死亡。

    细胞生物学研究技术很多，包括形态学观察技术、细胞化学技术、分析细胞学技术、细胞培养和细胞融合技术等。细胞培养技术的应用已日益广泛，细胞培养是指细胞体外培养，是在无菌条件下，把动物或植物的细胞从有机体分离出来，制造合适条件，使细胞能继续生存和生长的一种方法。以其一般离体实验所不能替代的优点，应用于细胞周期及其调控，癌变机制与细胞衰老研究，基因表达与调控，细胞事例以及一些细胞工程技术的建立等。

    近10年来引人瞩目的研究是细胞的跨膜信号传递或称为信号传导(Signal transeuetion)，目前人们对跨膜信息链的构成，环节间的相互关系还只是一知半解，而对核膜内外信息的交流与核内信息传递链索的构成则所知更少，弄清信息传递链索特别是细胞核内的信息传递链索，是弄清有机体内有序调控的基础。迄今发现的癌基因都是编码信号传导系统有关蛋白质的基因经突变而产生的。对癌基因、抗癌基因和细胞癌变的研究，无疑具有重大的理论和实践意义。

    细胞凋亡(apoptosis)是由细胞内特定的基因所操纵、调控的细胞自杀行为，这种细胞的自杀过程又称为程序性细胞死亡(programmed cell death， PCD)，其所清除的是那些陈旧的受损伤的或癌变前的细胞。凋亡的出现可能与细胞识别和信号传导有关。寻找导致细胞凋亡的基因，研究它的调控作用，其意义也决不亚于对细胞增殖作用的研究。

    1.细胞生物学技术与方法

    (1)细胞培养技术

    ①培养基 细胞需要生长在具有充分营养物质的培养基中，培养基含有的成分如下：含氮化合物，它是蛋白质和核酸的基本构筑材料，动物细胞至少需要12～l3种氨基酸；维生素和某些金属离子，它们可维持酶的正常功能，一般需要8种水溶性维生素和铁、铜、锌等金属离子；无机盐离子，它们调节离子强度和渗透压，维持酸碱度；碳水化合物，它们是体外细胞的主要能源，动物细胞通常利用葡萄糖等单糖物质；促生长因子，激素、生长因子等可促进细胞增殖生长，维持某些细胞的特殊功能；血清，大多数培养液中需加入血清，常用经56℃、30分钟灭活的胎牛血清、小牛血清，血清中含有多种细胞生长因子、促贴附因子以及其他活性物质，培养液中血清的含量一般为10%～20% ......