血培养常见病原菌分布和耐药性分析
摘要 :目的 了解血培养常见病原菌的分布和耐药情况，为临床正确选用抗生素提供依据。 方法 血培养不重复标本2150例，用API鉴定系统对细菌及真菌进行鉴定，药敏试验细菌采用纸片扩散法，真菌采用MIC法。 结果 从2150例血培养标本中分离出病原菌510株，阳性率为23.7%，主要病原菌有凝固酶阴性葡萄球菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、肠球菌、肺炎克雷伯菌等。其中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)占凝固酶阴性葡萄球菌的70.4%，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)占金黄色葡萄球菌的18.4%，未发现耐万古霉素的葡萄球菌，大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的菌株分别为30.7%和38.9%，高耐氨基甙类肠球菌(HLGR)检出率为57.1%，分离到耐万古霉素的肠球菌。 结论 血培养中病原菌复杂多样，耐药率高，及时监测血培养中病原菌的耐药性对于指导临床合理用药、防止滥用抗生素、减少耐药菌株的产生是很有必要的。
关键词 :血培养;病原菌;耐药性
随着抗生素、抗肿瘤药物、免疫抑制剂、各种侵袭性操作，特别是静脉导管及各种介入手段的应用，血行性感染在医院中的发生率有上升趋势[1] ，所以对血培养中病原菌的耐药性监测和寻找敏感的药物显得特别重要。为了解本地区血培养中病原菌的分布及耐药情况，对2003年10月—2005年10月徐州医学院附属医院2150份血培养中的病原菌分布及药敏情况作回顾性分析，为血培养病原菌的流行病学调查及用药提供依据，现将结果报道如下。
1 材料和方法
1.1 材料和仪器
1.1.1 标本来源 2003年10月—2005年10月徐州医学院附属医院门诊和住院患者血培养不重复标本2150例，分离菌株510株。
1.1.2 质控菌株 大肠埃希菌(ATCC25922)、铜绿假单胞菌(ATCC27853)、金黄色葡萄球菌(ATCC25923)、白色念珠菌(ATCC90028)购自北京天坛药物生物技术开发公司。
1.1.3 仪器和材料 美国BD公司BACTEC9120全自动血培养仪及其配套的培养瓶，哥伦比亚琼脂和M-H琼脂由法国生物-梅里埃公司提供，药敏纸片购于广州市乐通泰生物科技有限公司(英国OXOID公司提供)，真菌快速药敏试剂盒购于温州康泰生物科技有限公司。
1.2 方法
1.2.1 标本的采集及培养 由临床科室根据病情采集标本，无菌操作，小儿采血3～5ml注入儿童瓶，成人采血5～10ml注入成人瓶，送微生物室置BACTEC9120全自动血培养仪中。仪器报警阳性转种血平板，阴性标本培养5天时盲转，无细菌生长报告阴性。
1.2.2 鉴定方法 全部菌株均使用法国生物-梅里埃公司API鉴定系统进行鉴定。
1.2.3 药敏试验 细菌采用纸片扩散法(K-B法)，结果按NCCLS2000年版标准判定;真菌采用MIC法。计算中将“中介”归于“耐药”统计。
1.2.4 超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测 采用纸片扩散初筛试验和确正试验，按NCCLS2000年版标准进行。
1.2.5 耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)检测 采用4%M-H高盐琼脂6μg.片苯唑西林作K-B法测定，按NCCLS2000年版标准进行。
1.2.6 高耐氨基甙类肠球菌(HLGR)检测 采用M-H琼脂120μg.片的庆大霉素纸片作K-B法测定，按NCCLS2000年版标准进行。
2 结果
2.1 病原菌分布 2150例血培养中，阳性标本510例，阳性率为23.7%。其中革兰阳性球菌341株(66.9%)，革兰阴性杆菌148株(29.0%)，真菌16株(3.1%)，革兰阳性杆菌5株(0.98%)。最常见的菌种为凝固酶阴性葡萄球菌(189株)、大肠埃希菌(88株)、金黄色葡萄球菌(76株)、肠球菌(56株)、肺炎克雷伯菌(18株)。
2.2 病原菌科室分布 内科146株(28.6%)，外科68株(13.3%)，儿科211株(41.4%)，ICU病房52株(10.2%)，门诊12株(2.4%)，其他科室21株(4.1%)。
2.3 药敏试验结果 革兰阳性球菌药敏试验结果见表1，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)分别占18.4%和70.4%，HLGR达57.1%。革兰阴性杆菌药敏试验结果见表2，产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别为30.7%和38.9%，产ESBLs株对大多数抗生素的耐药性均高于非产ESBLs株。真菌对5-氟胞嘧啶、两性霉素B、制霉菌素敏感性高，而对咪康唑、益康唑、伊曲康唑、氟康唑耐药率高，见表3。
表1 革兰阳性球菌对抗生素耐药率(略)
注:MSCNS(甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌)，MSSA(甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌)
表2 革兰阴性杆菌对抗生素的耐药率(略)
表3 真菌对抗生素的耐药率(略)
3 讨论
从病原菌谱来看，我院血培养阳性菌株以凝固酶阴性葡萄球菌居多，占37.1%，其次为大肠埃希菌，占17.3%，与文献报道有所不同[2] ，这可能是由于不同地区之间存在差异所致。在病区分布上，多集中于儿科，占41.4%，可能是由于小儿免疫功能不全，机体抵抗力弱，病原菌容易感染所致。其次是内科，占28.6%，与内科患者特别是老年科、血液病科、肿瘤科患者大多伴有呼吸道疾病、血液病、肿瘤等基础疾病有关;抗生素、激素、免疫抑制剂以及放疗、化疗、骨髓移植、介入等治疗手段的使用，易引起病原菌感染，发生菌血症。
抗生素的广泛使用，使细菌的耐药性问题越来越严重，MRSA、MRCNS、HLGR、产ESBLs革兰阴性杆菌的耐药问题非常突出。本组血培养中均分离到上述菌，并表现出很高的耐药性，应引起足够重视。
MRS的耐药率明显高于甲氧西林敏感的葡萄球菌(MSS)，MRS的耐药性主要表现为耐多种抗生素。根据NCCLS药敏标准，所有β-内酰胺类抗生素包括含酶抑制剂以及大环内酯类、氨基甙类、四环素对MRS的临床治疗均无效[3] ，在治疗上首选万古霉素。肠球菌属细菌对红霉素、青霉素、庆大霉素、氧氟沙星、氨苄西林、头孢唑啉耐药率均大于50%，其中32 株肠球菌为HLGR。当出现HLGR菌株时，在临床治疗中，对这些菌株用青霉素、氨苄西林、万古霉素与氨基甙类抗生素联合用药不能产生协同效应[4] 。产ESBLs菌株的耐药率明显高于非产ESBLs菌株，亚胺培南对产ESBLs细菌的抗菌活性高，为治疗产ES-BLs菌的首选用药。所有肠杆菌属细菌对亚胺培南耐药率最低，其次是头孢吡肟、头孢哌酮.舒巴坦、阿米卡星，对其余抗生素均显示较高的耐药性。非发酵菌耐药机制复杂，常对多种抗生素天然耐药，是临床治疗的一个难题。本组资料显示，非发酵菌对阿米卡星的耐药率较低，提示阿米卡星可作为非发酵菌菌血症的首选药物。
真菌对咪唑类抗菌药物耐药率高，抗真菌药物种类少，不能凭经验用药，而应根据药敏试验结果选择合适的抗菌药，以免延误病情，造成不必要的损失。
细菌耐药性监测是决定临床医生选择抗生素的重要参考，临床应加强对血培养的检测，对于发热患者怀疑有细菌感染的，应及时做血培养，根据药敏结果合理选择抗生素，这对于减少或延缓耐药菌株的产生具有重要作用。
参考文献 :
[1] 刘 瑛，谈意隽，沈 霞.血培养中常见病原菌及耐药性分析[J].上海医学检验杂志，2003，18(6):364-366.
[2] 叶惠芬，李红玉，赖福才，等.广州地区菌血症常见病原菌及耐药性调查[J].中华医院感染学杂志，2002，12(9):707-708.
[3] 苏建荣，马纪平，许淑珍，等.药物联用对耐甲氧西林表皮葡萄球菌的体外抗菌治疗性探讨[J].中华检验医学杂志，2002，25(3):172.
[4] 张 冰，腾春燕，张曙东.氨基糖甙类高水平耐药的肠球菌检测及其药敏结果分析[J].中国实验诊断学，2004，8(4):409-410.
本文编辑 :孙立杰
(徐州医学院附属医院检验科，江苏徐州221002), http://www.100md.com(邓丽华，胡丽萍，许美荣)
关键词 :血培养;病原菌;耐药性
随着抗生素、抗肿瘤药物、免疫抑制剂、各种侵袭性操作，特别是静脉导管及各种介入手段的应用，血行性感染在医院中的发生率有上升趋势[1] ，所以对血培养中病原菌的耐药性监测和寻找敏感的药物显得特别重要。为了解本地区血培养中病原菌的分布及耐药情况，对2003年10月—2005年10月徐州医学院附属医院2150份血培养中的病原菌分布及药敏情况作回顾性分析，为血培养病原菌的流行病学调查及用药提供依据，现将结果报道如下。
1 材料和方法
1.1 材料和仪器
1.1.1 标本来源 2003年10月—2005年10月徐州医学院附属医院门诊和住院患者血培养不重复标本2150例，分离菌株510株。
1.1.2 质控菌株 大肠埃希菌(ATCC25922)、铜绿假单胞菌(ATCC27853)、金黄色葡萄球菌(ATCC25923)、白色念珠菌(ATCC90028)购自北京天坛药物生物技术开发公司。
1.1.3 仪器和材料 美国BD公司BACTEC9120全自动血培养仪及其配套的培养瓶，哥伦比亚琼脂和M-H琼脂由法国生物-梅里埃公司提供，药敏纸片购于广州市乐通泰生物科技有限公司(英国OXOID公司提供)，真菌快速药敏试剂盒购于温州康泰生物科技有限公司。
1.2 方法
1.2.1 标本的采集及培养 由临床科室根据病情采集标本，无菌操作，小儿采血3～5ml注入儿童瓶，成人采血5～10ml注入成人瓶，送微生物室置BACTEC9120全自动血培养仪中。仪器报警阳性转种血平板，阴性标本培养5天时盲转，无细菌生长报告阴性。
1.2.2 鉴定方法 全部菌株均使用法国生物-梅里埃公司API鉴定系统进行鉴定。
1.2.3 药敏试验 细菌采用纸片扩散法(K-B法)，结果按NCCLS2000年版标准判定;真菌采用MIC法。计算中将“中介”归于“耐药”统计。
1.2.4 超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测 采用纸片扩散初筛试验和确正试验，按NCCLS2000年版标准进行。
1.2.5 耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)检测 采用4%M-H高盐琼脂6μg.片苯唑西林作K-B法测定，按NCCLS2000年版标准进行。
1.2.6 高耐氨基甙类肠球菌(HLGR)检测 采用M-H琼脂120μg.片的庆大霉素纸片作K-B法测定，按NCCLS2000年版标准进行。
2 结果
2.1 病原菌分布 2150例血培养中，阳性标本510例，阳性率为23.7%。其中革兰阳性球菌341株(66.9%)，革兰阴性杆菌148株(29.0%)，真菌16株(3.1%)，革兰阳性杆菌5株(0.98%)。最常见的菌种为凝固酶阴性葡萄球菌(189株)、大肠埃希菌(88株)、金黄色葡萄球菌(76株)、肠球菌(56株)、肺炎克雷伯菌(18株)。
2.2 病原菌科室分布 内科146株(28.6%)，外科68株(13.3%)，儿科211株(41.4%)，ICU病房52株(10.2%)，门诊12株(2.4%)，其他科室21株(4.1%)。
2.3 药敏试验结果 革兰阳性球菌药敏试验结果见表1，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)分别占18.4%和70.4%，HLGR达57.1%。革兰阴性杆菌药敏试验结果见表2，产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别为30.7%和38.9%，产ESBLs株对大多数抗生素的耐药性均高于非产ESBLs株。真菌对5-氟胞嘧啶、两性霉素B、制霉菌素敏感性高，而对咪康唑、益康唑、伊曲康唑、氟康唑耐药率高，见表3。
表1 革兰阳性球菌对抗生素耐药率(略)
注:MSCNS(甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌)，MSSA(甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌)
表2 革兰阴性杆菌对抗生素的耐药率(略)
表3 真菌对抗生素的耐药率(略)
3 讨论
从病原菌谱来看，我院血培养阳性菌株以凝固酶阴性葡萄球菌居多，占37.1%，其次为大肠埃希菌，占17.3%，与文献报道有所不同[2] ，这可能是由于不同地区之间存在差异所致。在病区分布上，多集中于儿科，占41.4%，可能是由于小儿免疫功能不全，机体抵抗力弱，病原菌容易感染所致。其次是内科，占28.6%，与内科患者特别是老年科、血液病科、肿瘤科患者大多伴有呼吸道疾病、血液病、肿瘤等基础疾病有关;抗生素、激素、免疫抑制剂以及放疗、化疗、骨髓移植、介入等治疗手段的使用，易引起病原菌感染，发生菌血症。
抗生素的广泛使用，使细菌的耐药性问题越来越严重，MRSA、MRCNS、HLGR、产ESBLs革兰阴性杆菌的耐药问题非常突出。本组血培养中均分离到上述菌，并表现出很高的耐药性，应引起足够重视。
MRS的耐药率明显高于甲氧西林敏感的葡萄球菌(MSS)，MRS的耐药性主要表现为耐多种抗生素。根据NCCLS药敏标准，所有β-内酰胺类抗生素包括含酶抑制剂以及大环内酯类、氨基甙类、四环素对MRS的临床治疗均无效[3] ，在治疗上首选万古霉素。肠球菌属细菌对红霉素、青霉素、庆大霉素、氧氟沙星、氨苄西林、头孢唑啉耐药率均大于50%，其中32 株肠球菌为HLGR。当出现HLGR菌株时，在临床治疗中，对这些菌株用青霉素、氨苄西林、万古霉素与氨基甙类抗生素联合用药不能产生协同效应[4] 。产ESBLs菌株的耐药率明显高于非产ESBLs菌株，亚胺培南对产ESBLs细菌的抗菌活性高，为治疗产ES-BLs菌的首选用药。所有肠杆菌属细菌对亚胺培南耐药率最低，其次是头孢吡肟、头孢哌酮.舒巴坦、阿米卡星，对其余抗生素均显示较高的耐药性。非发酵菌耐药机制复杂，常对多种抗生素天然耐药，是临床治疗的一个难题。本组资料显示，非发酵菌对阿米卡星的耐药率较低，提示阿米卡星可作为非发酵菌菌血症的首选药物。
真菌对咪唑类抗菌药物耐药率高，抗真菌药物种类少，不能凭经验用药，而应根据药敏试验结果选择合适的抗菌药，以免延误病情，造成不必要的损失。
细菌耐药性监测是决定临床医生选择抗生素的重要参考，临床应加强对血培养的检测，对于发热患者怀疑有细菌感染的，应及时做血培养，根据药敏结果合理选择抗生素，这对于减少或延缓耐药菌株的产生具有重要作用。
参考文献 :
[1] 刘 瑛，谈意隽，沈 霞.血培养中常见病原菌及耐药性分析[J].上海医学检验杂志，2003，18(6):364-366.
[2] 叶惠芬，李红玉，赖福才，等.广州地区菌血症常见病原菌及耐药性调查[J].中华医院感染学杂志，2002，12(9):707-708.
[3] 苏建荣，马纪平，许淑珍，等.药物联用对耐甲氧西林表皮葡萄球菌的体外抗菌治疗性探讨[J].中华检验医学杂志，2002，25(3):172.
[4] 张 冰，腾春燕，张曙东.氨基糖甙类高水平耐药的肠球菌检测及其药敏结果分析[J].中国实验诊断学，2004，8(4):409-410.
本文编辑 :孙立杰
(徐州医学院附属医院检验科，江苏徐州221002), http://www.100md.com(邓丽华，胡丽萍，许美荣)