2型糖尿病患者血中培养出裂殖念珠菌分析
【摘要】 目的 探讨2型糖尿病的致病因素，从微生物感染角度寻求2型糖尿病的发病原因。方法 对60例2型糖尿病患者的血液进行培养。结果 全部检出裂殖念珠菌。结论 2型糖尿病与裂殖念珠菌感染有直接关系。
【关键词】 2型糖尿病；裂殖念珠菌
到目前为止，2型糖尿病的致病原因尚未研究清楚。不论是从理论上还是从实践中，遗传学说、病毒感染学说等均缺乏充分的说服力。2型糖尿病是否与胰岛B细胞对胰岛素的分泌不足或相对不足有关，研究资料得出了相反的结论：2型糖尿病患者的胰岛组织及B细胞没有明显的病理改变；血清胰岛素的浓度并不降低，相反还有所升高。证明2型糖尿病患者体内不缺乏胰岛素，与胰岛素分泌量的关系并非是直接的。本文总结对2型糖尿病的血培养的结论，证明了2型糖尿病可能与裂殖念珠菌感染有关。
1 资料与方法
1.1 一般资料 共统计病例60例，全部选自门诊及住院的2型糖尿病患者。男24例，女36例，年龄最大为78岁，最小为28岁，不要求空腹，采血后即可接种。
1.2 材料 (1)血液增菌培养基：上海伊华医学科技有限公司出品，按说明配置后分装100mm×12mm玻璃试管内，每管2.5ml，加塞灭菌后备用。(2)营养琼脂：上海伊华医学科技有限公司出品。照说明配置，灭菌后制作平板备用。(3)葡、乳、麦、甘、蔗、尿素微量发酵管，由杭州天和微生物试剂有限公司出品。(4)快速瑞氏染液：由四川迈克科技有限公司出品。(5)快速革兰染液：由珠海贝索生物技术有限公司出品。(6)1%煌焦油兰生理盐水溶液，自配。
1.3 方法 (1)静脉采血1~2ml，立即接种于血液增菌培养液中，接种量3~5滴，摇匀，37℃培养3~5天。可同时制作血片，进行瑞氏染色，镜检。寻找念珠菌，观察红细胞损害情况。(2)将增菌后的培养液，划线接种于琼脂平板上，37℃培养2~5天，观察菌落生长情况，如未生长，用原增菌管，继续接种1次。(3)挑取菌落接种于葡、乳、麦、甘、蔗及尿素各管，37℃培养24h观察结果。(4)去菌落涂片，革兰染色，镜检。观察菌体形态、分裂情况，是否有菌丝或假菌丝及染色性等。(5)取菌落少许。混悬于1%煌焦油兰生理盐水1ml溶液中，再加入任意新鲜血液1滴，混合后，放置3~5min，取1滴于玻片上，加盖玻片后用油镜检查，观察活动情况及对红细胞侵蚀现象。
2 结果
2.1 检验结果 60例患者血液中全部检出裂殖念珠菌，检出率为100%。
2.2 裂殖念珠菌的生物特性
2.2.1 染色性 革兰染色为阳性。在裂殖时期，由于染色体分裂、脱落，菌体可呈阴性表现。瑞氏染色为蓝黑色，煌焦油兰染色为蓝紫色。丫啶橙荧光染色为橙黄色。
2.2.2 形态 多形性。一般为球形、杆状、丝状、颗粒状。球形者为圆形、卵圆形，杆状者为粗杆状、单个或链状排列，形似炭疽杆菌，丝状常分枝，颗粒状者为脱落的染色体，常成堆或散在。各种形态均可形成菌丝和假菌丝。
2.2.3 大小 球形体的直径一般为2~5μm，杆状体为1.5μm×5μm，丝状体的长度在10~150μm或更长，颗粒体的直径一般小于1μm。
2.2.4 分裂方式 二分裂、四分裂、多分裂。多分裂者一个菌体可分裂为10个或更多的裂殖小体，出芽繁殖也是常见形式。
2.2.5 活动力 在液体中运动活泼，呈曲线运动。
2.2.6 培养 营养要求不高，在普通培养基上均能生长。不溶血。在营养琼脂平板上，菌落圆形，湿润，白色、米黄色，陈旧培养基上能形成白色绒毛菌落，绒毛向深层伸展，为假菌丝。在液体培养初期可见大量小分生孢子，后期可形成菌丝。
2.2.7 生化反应 不发酵戊糖，尿素酶试验阳性，芽管试验阴性。
2.2.8 致病性 给两只家兔的耳静脉注射裂殖念珠菌悬液各0.5ml，已观察3个月，每只家兔月血糖递升约1mmol/L左右。菌体侵入人红细胞内，可吸吮细胞质，并寄生于红细胞内，形似疟原虫，使红细胞边缘缺损呈花边状，或形成空洞。
裂殖念珠菌的生物学特点比较复杂，它兼有细菌、真菌、原虫的许多特点。
3 结论
试验证明，在2型糖尿病患者血中均可检出裂殖念珠菌。家兔实验，裂殖念珠菌感染家兔后，能使家兔血糖持续升高。可以认为，2型糖尿病与裂殖念珠菌的感染有直接关系。
4 讨论
裂殖念珠菌并非微生物学中固有的菌种名称，由于它生物特性比较特殊，兼有细菌、真菌、原虫的特点，基本属于念珠菌，但与其他念珠菌又不完全相同，根据其繁殖的特殊性，故由笔者给以临时冠名，待进一步研究清楚后，再决定名称。
裂殖念珠菌可能是一种条件致病菌，笔者在人的粪便、白带、口腔中均发现过，且在一些慢性增生性贫血、慢性肾病、动脉硬化患者的血中，也能检出。
2型糖尿病的发病原因至今还未研究清楚，裂殖念珠菌的发现，也只能是一个初步的认识，有待进一步更加深入地探讨。关于裂殖念珠菌引发糖尿病的机制，与下列因素有关：(1)裂殖念珠菌在红细胞中大量寄生，以红细胞浆为营养来源，会减弱红细胞对葡萄糖的酵解功能；(2)裂殖念珠菌的代谢产物在血液中蓄积，改变了机体的内环境，使胰岛素功能的发挥受到限制，与糖代谢有关的酶的活性受到抑制，因而葡萄糖代谢速度减慢，造成葡萄糖在血液中的慢性蓄积。使用对裂殖念珠菌敏感药物治疗，可以使患者血糖逐渐下降，直至恢复正常水平，有力证明了裂殖念珠菌感染与2型糖尿病的关系。
作者单位： 723000 陕西汉中，汉中市友好医院
(编辑：丁剑辉), 百拇医药(任万明)
【关键词】 2型糖尿病；裂殖念珠菌
到目前为止，2型糖尿病的致病原因尚未研究清楚。不论是从理论上还是从实践中，遗传学说、病毒感染学说等均缺乏充分的说服力。2型糖尿病是否与胰岛B细胞对胰岛素的分泌不足或相对不足有关，研究资料得出了相反的结论：2型糖尿病患者的胰岛组织及B细胞没有明显的病理改变；血清胰岛素的浓度并不降低，相反还有所升高。证明2型糖尿病患者体内不缺乏胰岛素，与胰岛素分泌量的关系并非是直接的。本文总结对2型糖尿病的血培养的结论，证明了2型糖尿病可能与裂殖念珠菌感染有关。
1 资料与方法
1.1 一般资料 共统计病例60例，全部选自门诊及住院的2型糖尿病患者。男24例，女36例，年龄最大为78岁，最小为28岁，不要求空腹，采血后即可接种。
1.2 材料 (1)血液增菌培养基：上海伊华医学科技有限公司出品，按说明配置后分装100mm×12mm玻璃试管内，每管2.5ml，加塞灭菌后备用。(2)营养琼脂：上海伊华医学科技有限公司出品。照说明配置，灭菌后制作平板备用。(3)葡、乳、麦、甘、蔗、尿素微量发酵管，由杭州天和微生物试剂有限公司出品。(4)快速瑞氏染液：由四川迈克科技有限公司出品。(5)快速革兰染液：由珠海贝索生物技术有限公司出品。(6)1%煌焦油兰生理盐水溶液，自配。
1.3 方法 (1)静脉采血1~2ml，立即接种于血液增菌培养液中，接种量3~5滴，摇匀，37℃培养3~5天。可同时制作血片，进行瑞氏染色，镜检。寻找念珠菌，观察红细胞损害情况。(2)将增菌后的培养液，划线接种于琼脂平板上，37℃培养2~5天，观察菌落生长情况，如未生长，用原增菌管，继续接种1次。(3)挑取菌落接种于葡、乳、麦、甘、蔗及尿素各管，37℃培养24h观察结果。(4)去菌落涂片，革兰染色，镜检。观察菌体形态、分裂情况，是否有菌丝或假菌丝及染色性等。(5)取菌落少许。混悬于1%煌焦油兰生理盐水1ml溶液中，再加入任意新鲜血液1滴，混合后，放置3~5min，取1滴于玻片上，加盖玻片后用油镜检查，观察活动情况及对红细胞侵蚀现象。
2 结果
2.1 检验结果 60例患者血液中全部检出裂殖念珠菌，检出率为100%。
2.2 裂殖念珠菌的生物特性
2.2.1 染色性 革兰染色为阳性。在裂殖时期，由于染色体分裂、脱落，菌体可呈阴性表现。瑞氏染色为蓝黑色，煌焦油兰染色为蓝紫色。丫啶橙荧光染色为橙黄色。
2.2.2 形态 多形性。一般为球形、杆状、丝状、颗粒状。球形者为圆形、卵圆形，杆状者为粗杆状、单个或链状排列，形似炭疽杆菌，丝状常分枝，颗粒状者为脱落的染色体，常成堆或散在。各种形态均可形成菌丝和假菌丝。
2.2.3 大小 球形体的直径一般为2~5μm，杆状体为1.5μm×5μm，丝状体的长度在10~150μm或更长，颗粒体的直径一般小于1μm。
2.2.4 分裂方式 二分裂、四分裂、多分裂。多分裂者一个菌体可分裂为10个或更多的裂殖小体，出芽繁殖也是常见形式。
2.2.5 活动力 在液体中运动活泼，呈曲线运动。
2.2.6 培养 营养要求不高，在普通培养基上均能生长。不溶血。在营养琼脂平板上，菌落圆形，湿润，白色、米黄色，陈旧培养基上能形成白色绒毛菌落，绒毛向深层伸展，为假菌丝。在液体培养初期可见大量小分生孢子，后期可形成菌丝。
2.2.7 生化反应 不发酵戊糖，尿素酶试验阳性，芽管试验阴性。
2.2.8 致病性 给两只家兔的耳静脉注射裂殖念珠菌悬液各0.5ml，已观察3个月，每只家兔月血糖递升约1mmol/L左右。菌体侵入人红细胞内，可吸吮细胞质，并寄生于红细胞内，形似疟原虫，使红细胞边缘缺损呈花边状，或形成空洞。
裂殖念珠菌的生物学特点比较复杂，它兼有细菌、真菌、原虫的许多特点。
3 结论
试验证明，在2型糖尿病患者血中均可检出裂殖念珠菌。家兔实验，裂殖念珠菌感染家兔后，能使家兔血糖持续升高。可以认为，2型糖尿病与裂殖念珠菌的感染有直接关系。
4 讨论
裂殖念珠菌并非微生物学中固有的菌种名称，由于它生物特性比较特殊，兼有细菌、真菌、原虫的特点，基本属于念珠菌，但与其他念珠菌又不完全相同，根据其繁殖的特殊性，故由笔者给以临时冠名，待进一步研究清楚后，再决定名称。
裂殖念珠菌可能是一种条件致病菌，笔者在人的粪便、白带、口腔中均发现过，且在一些慢性增生性贫血、慢性肾病、动脉硬化患者的血中，也能检出。
2型糖尿病的发病原因至今还未研究清楚，裂殖念珠菌的发现，也只能是一个初步的认识，有待进一步更加深入地探讨。关于裂殖念珠菌引发糖尿病的机制，与下列因素有关：(1)裂殖念珠菌在红细胞中大量寄生，以红细胞浆为营养来源，会减弱红细胞对葡萄糖的酵解功能；(2)裂殖念珠菌的代谢产物在血液中蓄积，改变了机体的内环境，使胰岛素功能的发挥受到限制，与糖代谢有关的酶的活性受到抑制，因而葡萄糖代谢速度减慢，造成葡萄糖在血液中的慢性蓄积。使用对裂殖念珠菌敏感药物治疗，可以使患者血糖逐渐下降，直至恢复正常水平，有力证明了裂殖念珠菌感染与2型糖尿病的关系。
作者单位： 723000 陕西汉中，汉中市友好医院
(编辑：丁剑辉), 百拇医药(任万明)