三七巴布剂中透皮吸收促进剂的选择
作者：易军 邵思华
单位：易军(广东药学院药剂学教研室,广东广州 510224)；邵思华(江西中医学院药学系)
关键词：三七皂苷；巴布剂；氮酮；丙二醇；促透剂
广东药学院学报000202
摘要 用正交试验法,通过对三七皂苷透皮量的考察,发现以氮酮与丙二醇共同作为促透剂,且两者用量均为4%时，三七巴布剂表现出良好的透皮性能，24 h累计透皮率达到18.06%。
中图号 TQ 460.6 文献标识码:A
文章编号:1006-8783(2000)02-0091-03
Study on the Enhancer for Percutaneous Absorption
, 百拇医药
of Panax Notoginseng Cataplasma
YI Jun
(Guangdong College of Pharmacy, Guangzhou Guangdong 510224)
SHAO Si-Hua
(Department of Pharmacy,Jiang Xi College of Traditional Chinese Medicine)
Abstract The effects of enhancer on the percutaneous absorption of panax notoginseng cataplasma were investigated in an orthogonal design experiment. The result showed that a two-phase enhancer composed of 4% Azone and 4% propylene glycol resulted in good penetration of the drug tested. The cumulative permeation rate within twenty-four hours was 18.06%.
, 百拇医药
Key Words panax notoginseng; cataplasma; Azone; propylene glycol; enhancer
三七巴布剂是一个亲水凝胶型透皮系统，用于散瘀活血，治疗跌扑肿痛及急性软组织损伤。其有效成分的透皮量直接决定了药理作用。本文对三七巴布剂中促透剂的种类及比例进行了研究，以期提高该巴布剂中有效成分的透皮量，提高疗效。
1 材料
1.1 药品 三七提取物(自制)、氮酮(河南濮阳制药厂)、1，2-丙二醇(广东汕头新宁化工厂)、三七皂苷R1对照品(购自卫生部中国药品生物制品检定所)。
1.2 试剂 冰醋酸、高氯酸、香草醛。均为AR级。
1.3 动物 小白鼠体重22～25 g雌雄各半,皮毛生长正常。
, http://www.100md.com
1.4 仪器 721型分光光度计(上海第三分析仪器厂)、79HW-1型恒温磁力搅拌器(乐成电器厂)、自制改型Franz扩散池(南昌大学玻璃仪器厂)。
2 方法与结果
2.1 透皮试验
2.1.1 离体皮肤制备 采用化学脱毛法[1]，以ρ=8% Na2S水溶液将健康小白鼠脱毛，处死。立即取腹部皮肤，以无菌生理盐水洗净，再用φ=10%甘油溶液处理以防贮存时形成冰晶，置-20 ℃的低温冰箱中贮存备用[2]。
2.1.2 试验装置 参考有关文献[2]，采用自制改型Franz扩散池，有效扩散面积2.0 cm2，接受室体积2.5 cm3，自制搅拌子，长度0.8 cm，如图1所示。接受液为ρ＝0.9%NaCl溶液。
, 百拇医药
图1 自制扩散装置示意图
1 供给室 2 给药系统 3 皮肤
4 取样口 5 接受室 6 搅拌子
2.1.3 样品液制备 于冰箱中取出离体脱毛鼠皮，解冻，以生理盐水洗净，用滤纸吸干表面水分，将同等面积的三七巴布剂贴于皮肤角质层面，然后将其夹在接受室与供给室之间，贴药面朝向供给室，皮肤面朝向接受室。将此装置置恒温水浴中，恒温水面以不超过皮肤面为限。调整水浴温度为(37±0.5) ℃，搅拌速度100 r/min，在接受室中加入预温37 ℃的ρ＝0.9% NaCl溶液。为降低干扰，在不给药的情况下，先将皮肤内层面与接受液接触2 h，更换全部接受液，再如上所述，将巴布剂贴于皮肤上，以此时为0 h，正式开始试验。分别于第1、2、4、8、12、24 h用注射器吸取全部接受液，作为样品液，按下述方法进行三七皂苷透皮量的测定，同时将接受室补满等温新鲜ρ＝0.9%NaCl溶液，以保持漏槽状态。
, 百拇医药
2.2 透皮量测定
2.2.1 标准曲线绘制[3] 精密称取干燥恒重的三七皂苷R1对照品约5.0 mg，置10 mL容量瓶中，以甲醇溶解，并稀释至刻度，摇匀，精密吸取此溶液0、20、40、60、80、100、120、150 μL于具塞试管中，用热风吹去溶剂(勿使过热)，各加入5%香草醛-冰醋酸溶液(新配制)0.2 mL，高氯酸0.8 mL，于60 ℃恒温水浴加热15 min，即置冰浴内冷却，加冰醋酸5 mL，摇匀，在721分光光度计上，波长560 nm处测量吸收度。得到吸收度A与相应浓度(μg/mL)的线性方程为
A=0.0087+0.0294C，r=0.9987
线性范围1.73～13.00 μg/mL。
2.2.2 含量测定 将样品液置水浴上蒸除水分，残渣以2 mL甲醇溶解，转移至具塞试管中，用热风吹去溶剂(勿使过热)，以下操作同2.2.1，将所测得的吸收度值代入线性方程，得到透皮液浓度，换算成透皮量。将各时间的透皮量进行累加，得到24 h累计透皮量。将此累计透皮量除以原巴布剂含药量，得到透皮率。以此透皮率为指标进行促透剂的选择。
, 百拇医药
2.3 透皮促进剂的选择
2.3.1 初试 制备4批三七巴布剂样品：Ⅰ不含任何促透剂；Ⅱ含φ＝2%氮酮作为促透剂；Ⅲ含φ＝4%丙二醇作为促透剂；Ⅳ含φ=2%氮酮和φ=4%丙二醇作为促透剂。按以上方法分别进行透皮试验。结果表明：Ⅰ与Ⅲ，三七皂苷无法透过皮肤屏障；Ⅱ有一定的三七皂苷透过皮肤；Ⅳ透皮率显著改善。
2.3.2 正交试验设计 以巴布剂中主药三七提取物含量、透皮促进剂氮酮、丙二醇的用量分别为A、B、C三因素，进行正交试验，制备9批样品。因素水平安排见表1。
2.3.3 正交试验结果 以三七皂苷为目标成分，以透皮率为指标，对正交试验结果进行方差分析，结果见表2、表3。
表1 因素水平表 因素水平
A(mg)
, http://www.100md.com
B(%)
C(%)
1
2
2
4
2
3
4
6
3
4
8
8
, http://www.100md.com
表2 正交试验结果分析表 试验号
A
B
C
D(误差)
透皮率/%
1
1
1
1
1
17.32
2
, http://www.100md.com
1
2
2
2
13.24
3
1
3
3
3
9.41
4
2
1
, 百拇医药
2
3
8.49
5
2
2
3
1
14.19
6
2
3
1
2
, http://www.100md.com
10.19
7
3
1
3
2
9.51
8
3
2
1
3
18.06
9
, 百拇医药
3
3
2
1
10.19
Ⅰ
29.97
25.32
35.57
31.70
ΣX=100.6
Ⅱ
32.87
, 百拇医药
45.49
31.92
32.94
X2=1215.14
Ⅲ
37.76
29.79
33.11
35.96
表3 方差分析表 变异来源
l
γ
, http://www.100md.com MS
F
A
10.34
2
5.17
3.22
B
74.82
2
37.41
23.31
C
2.31
, 百拇医药
2
1.16
0.72
误差
3.21
2
1.61
总
90.66
8
查F0.05(2,2)=19.0，故P>0.05。因此，从本项试验结果认为，B因子即氮酮对透皮率影响最为显著。由表中结果可以得到，氮酮用量φ=4%，丙二醇用量φ=4%时，透皮吸收率最高，促透效果最明显。
, 百拇医药
3 讨论
3.1 目前，国内外的经皮吸收制剂多选用氮酮为促透剂。氮酮是一种非极性促透剂，它的特点是无色无臭，对粘膜产生最低限度刺激，且作用广泛，对亲水亲油型药物均有促透效果，而且没有浓度依赖性[4]。丙二醇是一种广泛应用的助渗剂，单独使用时作用不明显。但丙二醇可以增加药物在角质层中的溶解度，提高药物对皮肤的渗透性。氮酮-丙二醇系统是一种常见的二组分系统，有时单独使用氮酮促透效果并不理想，丙二醇的加入，可以影响皮肤多层亲油层和连续性通道而增加药物的渗透性[5]。即两者合用，可产生明显的促透效果。
3.2 本试验表明，三七皂苷可以透过皮肤，但其透皮率仅为18.06%，分析原因可能是：①三七皂苷是大分子物质，不易透过角质层；②三七皂苷为水溶性物质，虽然可以在该巴布剂中保持高的浓度而与吸收组织存在较大的扩散差，但因其在矿物油中溶解度较低，难于透过类脂双分子层，对透皮吸收表现出相当的阻滞作用；③虽然在促透剂的作用下，三七皂苷的透皮率有所提高，但仍然提示，水溶性药物巴布剂的制备有相当难度。
, http://www.100md.com
参考文献
[1]冀学芳.促进剂对马来酸噻吗洛尔经皮渗透的影响[J].中国药科大学学报,1996,27(1):6.
[2]梁秉文.经皮给药制剂[M].北京:中国医药科技出版社,1992.252.
[3]魏璐雪.中药制剂分析[M].上海:上海科学技术出版社,1997.186.
[4]罗明生,高天惠.药剂辅料大全[M].成都:四川科学技术出版社,1995.286.
[5]胡晋红,陈岚,朱宇.药物透皮吸收促进剂及其联合应用[J].国外医学药学分册,1996,23(2):105.
(收稿日期 2000-03-28), 百拇医药
单位：易军(广东药学院药剂学教研室,广东广州 510224)；邵思华(江西中医学院药学系)
关键词：三七皂苷；巴布剂；氮酮；丙二醇；促透剂
广东药学院学报000202
摘要 用正交试验法,通过对三七皂苷透皮量的考察,发现以氮酮与丙二醇共同作为促透剂,且两者用量均为4%时，三七巴布剂表现出良好的透皮性能，24 h累计透皮率达到18.06%。
中图号 TQ 460.6 文献标识码:A
文章编号:1006-8783(2000)02-0091-03
Study on the Enhancer for Percutaneous Absorption
, 百拇医药
of Panax Notoginseng Cataplasma
YI Jun
(Guangdong College of Pharmacy, Guangzhou Guangdong 510224)
SHAO Si-Hua
(Department of Pharmacy,Jiang Xi College of Traditional Chinese Medicine)
Abstract The effects of enhancer on the percutaneous absorption of panax notoginseng cataplasma were investigated in an orthogonal design experiment. The result showed that a two-phase enhancer composed of 4% Azone and 4% propylene glycol resulted in good penetration of the drug tested. The cumulative permeation rate within twenty-four hours was 18.06%.
, 百拇医药
Key Words panax notoginseng; cataplasma; Azone; propylene glycol; enhancer
三七巴布剂是一个亲水凝胶型透皮系统，用于散瘀活血，治疗跌扑肿痛及急性软组织损伤。其有效成分的透皮量直接决定了药理作用。本文对三七巴布剂中促透剂的种类及比例进行了研究，以期提高该巴布剂中有效成分的透皮量，提高疗效。
1 材料
1.1 药品 三七提取物(自制)、氮酮(河南濮阳制药厂)、1，2-丙二醇(广东汕头新宁化工厂)、三七皂苷R1对照品(购自卫生部中国药品生物制品检定所)。
1.2 试剂 冰醋酸、高氯酸、香草醛。均为AR级。
1.3 动物 小白鼠体重22～25 g雌雄各半,皮毛生长正常。
, http://www.100md.com
1.4 仪器 721型分光光度计(上海第三分析仪器厂)、79HW-1型恒温磁力搅拌器(乐成电器厂)、自制改型Franz扩散池(南昌大学玻璃仪器厂)。
2 方法与结果
2.1 透皮试验
2.1.1 离体皮肤制备 采用化学脱毛法[1]，以ρ=8% Na2S水溶液将健康小白鼠脱毛，处死。立即取腹部皮肤，以无菌生理盐水洗净，再用φ=10%甘油溶液处理以防贮存时形成冰晶，置-20 ℃的低温冰箱中贮存备用[2]。
2.1.2 试验装置 参考有关文献[2]，采用自制改型Franz扩散池，有效扩散面积2.0 cm2，接受室体积2.5 cm3，自制搅拌子，长度0.8 cm，如图1所示。接受液为ρ＝0.9%NaCl溶液。
, 百拇医药
图1 自制扩散装置示意图
1 供给室 2 给药系统 3 皮肤
4 取样口 5 接受室 6 搅拌子
2.1.3 样品液制备 于冰箱中取出离体脱毛鼠皮，解冻，以生理盐水洗净，用滤纸吸干表面水分，将同等面积的三七巴布剂贴于皮肤角质层面，然后将其夹在接受室与供给室之间，贴药面朝向供给室，皮肤面朝向接受室。将此装置置恒温水浴中，恒温水面以不超过皮肤面为限。调整水浴温度为(37±0.5) ℃，搅拌速度100 r/min，在接受室中加入预温37 ℃的ρ＝0.9% NaCl溶液。为降低干扰，在不给药的情况下，先将皮肤内层面与接受液接触2 h，更换全部接受液，再如上所述，将巴布剂贴于皮肤上，以此时为0 h，正式开始试验。分别于第1、2、4、8、12、24 h用注射器吸取全部接受液，作为样品液，按下述方法进行三七皂苷透皮量的测定，同时将接受室补满等温新鲜ρ＝0.9%NaCl溶液，以保持漏槽状态。
, 百拇医药
2.2 透皮量测定
2.2.1 标准曲线绘制[3] 精密称取干燥恒重的三七皂苷R1对照品约5.0 mg，置10 mL容量瓶中，以甲醇溶解，并稀释至刻度，摇匀，精密吸取此溶液0、20、40、60、80、100、120、150 μL于具塞试管中，用热风吹去溶剂(勿使过热)，各加入5%香草醛-冰醋酸溶液(新配制)0.2 mL，高氯酸0.8 mL，于60 ℃恒温水浴加热15 min，即置冰浴内冷却，加冰醋酸5 mL，摇匀，在721分光光度计上，波长560 nm处测量吸收度。得到吸收度A与相应浓度(μg/mL)的线性方程为
A=0.0087+0.0294C，r=0.9987
线性范围1.73～13.00 μg/mL。
2.2.2 含量测定 将样品液置水浴上蒸除水分，残渣以2 mL甲醇溶解，转移至具塞试管中，用热风吹去溶剂(勿使过热)，以下操作同2.2.1，将所测得的吸收度值代入线性方程，得到透皮液浓度，换算成透皮量。将各时间的透皮量进行累加，得到24 h累计透皮量。将此累计透皮量除以原巴布剂含药量，得到透皮率。以此透皮率为指标进行促透剂的选择。
, 百拇医药
2.3 透皮促进剂的选择
2.3.1 初试 制备4批三七巴布剂样品：Ⅰ不含任何促透剂；Ⅱ含φ＝2%氮酮作为促透剂；Ⅲ含φ＝4%丙二醇作为促透剂；Ⅳ含φ=2%氮酮和φ=4%丙二醇作为促透剂。按以上方法分别进行透皮试验。结果表明：Ⅰ与Ⅲ，三七皂苷无法透过皮肤屏障；Ⅱ有一定的三七皂苷透过皮肤；Ⅳ透皮率显著改善。
2.3.2 正交试验设计 以巴布剂中主药三七提取物含量、透皮促进剂氮酮、丙二醇的用量分别为A、B、C三因素，进行正交试验，制备9批样品。因素水平安排见表1。
2.3.3 正交试验结果 以三七皂苷为目标成分，以透皮率为指标，对正交试验结果进行方差分析，结果见表2、表3。
表1 因素水平表 因素水平
A(mg)
, http://www.100md.com
B(%)
C(%)
1
2
2
4
2
3
4
6
3
4
8
8
, http://www.100md.com
表2 正交试验结果分析表 试验号
A
B
C
D(误差)
透皮率/%
1
1
1
1
1
17.32
2
, http://www.100md.com
1
2
2
2
13.24
3
1
3
3
3
9.41
4
2
1
, 百拇医药
2
3
8.49
5
2
2
3
1
14.19
6
2
3
1
2
, http://www.100md.com
10.19
7
3
1
3
2
9.51
8
3
2
1
3
18.06
9
, 百拇医药
3
3
2
1
10.19
Ⅰ
29.97
25.32
35.57
31.70
ΣX=100.6
Ⅱ
32.87
, 百拇医药
45.49
31.92
32.94
X2=1215.14
Ⅲ
37.76
29.79
33.11
35.96
表3 方差分析表 变异来源
l
γ
, http://www.100md.com MS
F
A
10.34
2
5.17
3.22
B
74.82
2
37.41
23.31
C
2.31
, 百拇医药
2
1.16
0.72
误差
3.21
2
1.61
总
90.66
8
查F0.05(2,2)=19.0，故P>0.05。因此，从本项试验结果认为，B因子即氮酮对透皮率影响最为显著。由表中结果可以得到，氮酮用量φ=4%，丙二醇用量φ=4%时，透皮吸收率最高，促透效果最明显。
, 百拇医药
3 讨论
3.1 目前，国内外的经皮吸收制剂多选用氮酮为促透剂。氮酮是一种非极性促透剂，它的特点是无色无臭，对粘膜产生最低限度刺激，且作用广泛，对亲水亲油型药物均有促透效果，而且没有浓度依赖性[4]。丙二醇是一种广泛应用的助渗剂，单独使用时作用不明显。但丙二醇可以增加药物在角质层中的溶解度，提高药物对皮肤的渗透性。氮酮-丙二醇系统是一种常见的二组分系统，有时单独使用氮酮促透效果并不理想，丙二醇的加入，可以影响皮肤多层亲油层和连续性通道而增加药物的渗透性[5]。即两者合用，可产生明显的促透效果。
3.2 本试验表明，三七皂苷可以透过皮肤，但其透皮率仅为18.06%，分析原因可能是：①三七皂苷是大分子物质，不易透过角质层；②三七皂苷为水溶性物质，虽然可以在该巴布剂中保持高的浓度而与吸收组织存在较大的扩散差，但因其在矿物油中溶解度较低，难于透过类脂双分子层，对透皮吸收表现出相当的阻滞作用；③虽然在促透剂的作用下，三七皂苷的透皮率有所提高，但仍然提示，水溶性药物巴布剂的制备有相当难度。
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参考文献
[1]冀学芳.促进剂对马来酸噻吗洛尔经皮渗透的影响[J].中国药科大学学报,1996,27(1):6.
[2]梁秉文.经皮给药制剂[M].北京:中国医药科技出版社,1992.252.
[3]魏璐雪.中药制剂分析[M].上海:上海科学技术出版社,1997.186.
[4]罗明生,高天惠.药剂辅料大全[M].成都:四川科学技术出版社,1995.286.
[5]胡晋红,陈岚,朱宇.药物透皮吸收促进剂及其联合应用[J].国外医学药学分册,1996,23(2):105.
(收稿日期 2000-03-28), 百拇医药