激光显微切割联合功能分类表达谱芯片技术在脑缺血研究中的应用
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田英芳; 魏朝明; 张蓬勃; 邱芬; 陈新林; 刘勇;
激光捕获显微切割;微血管;神经元;线性扩增;芯片
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田英芳; 魏朝明; 张蓬勃; 邱芬; 陈新林; 刘勇;
西安交通大学医学院环境与疾病相关基因教育部重点实验室; 神经科学研究中心; 陕西西安; 陕西师范大学生命科学学院;
【关键词】
激光捕获显微切割; 微血管; 神经元; 线性扩增; 芯片
【发表年期页】
2005,4; 395-398
【摘要】
目的探讨激光捕获显微切割分离大鼠脑微血管和神经元联合功能分类表达谱cDNA芯片技术在脑缺血研究的应用。方法激光捕获显微切割获取脑切片微血管和神经元,微量RNA提取试剂盒提取总RNA,线性扩增mRNA,紫外分光光度计定量所得aRNA(antisense RNA)扩增效率,基因特异性引物进行cDNA探针合成,进行芯片杂交反应。结果微血管和神经元各自捕获的总点数大约为8000~10000,T7线性扩增所得aRNA的量约为500~1000ng,探针合成效率高,杂交反应格局清晰良好。结论激光捕获显微切割,结合T7RNA线性扩增及基因特异性引物线性扩增技术,可成功的应用于功能分类表达谱cDNA芯片的分析研究。
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