外源性神经生长因子对神经移植的影响
摘 要
目的：探讨神经移植后在局部注入神经生长因子对神经再生的影响。方法：家兔30只，随机分为两组。A组：切除5mm面神经颊支，用等长的耳大神经移植。B组：神经移植同A组，并于术中、术后第1、2、3、4天分别在局部注入2 000U的神经生长因子(大连司威特制药有限公司制)。术后饲养12周，对移植体进行神经电生理、组织学检测。结果：实验结果证明，再生神经纤维都可以通过移植神经的吻合端，A组神经传导速度为20.42±2.12m/s，B组神经传导速度为23.71±2.24m/s，两组神经传导速度差异有显著性(P<0.01)。结论：神经移植后注入神经生长因子的效果明显优于单纯神经移植。
关键词 神经移植；神经生长因子
中图分类号 R322.8
Effect of Exogenous Nerve Growth Factor on Nerve Implantation
ZHENG Liansheng, CUI Chengli, WANG Li, ZHANG Wenlong
(Department of Human Anatomy of Baotou Medical College，Baotou 014010,China)
Abstract Objective: To explore the effect of locally injected nerve growth factors on nerve regeneration after the facial nerve implantation.Methods: Thirty rabbits were randomly divided into two groups.Group A:Grafting the same length great auricular nerve after cutting off buccal branch of facial nerve.Group B: On the base of group A, injecting 2000U nerve growth factor on the implantation during the operation and 1、2、3、4 days,respectively,after the operation.The animals were fed after grafting for 12 weeks. The graft was examined by electrophysiology, histology. Results: The rabbit facial nerve regenerated across the implantation in two experimental groups. There was significant difference between group A and group B in nerve conduction velociticy (20.42±2.12m/s in Group A,23.71±2.24m/s in Group B) Conclusion: The results of nerve implantation with injected nerve growth factor is better than the simple nerve implantation.
Key words Nerve implantation; Nerve growth factor
颌面部外伤及手术常造成面神经损伤，损伤缺损较小，可行神经外膜或束膜缝合术，缺损较大考虑用神经移植术\[1\]。耳大神经是来自第2、3颈神经的感觉神经，位置表浅，与面神经同居一术野，作为自体移植材料具有取材方便，有一定长度和较多神经束，切取后除了神经支配范围内的感觉暂时丧失外，不遗留严重后遗症等优点，是口腔颌面部神经缺损修复中较理想的材料\[2\]。但神经移植后仍存在修复时间长，功能恢复慢等缺点。本实验在神经移植后分别于术中、术后第1、2、3、4天在局部注入2 000U的神经生长因子。于术后12周进行神经电生理、组织学检测。神经移植成功标准为：(1)电刺激移植神经，可测量出神经传导速度；(2)病理切片上再生神经纤维通过吻合口。
1材料与方法
1.1实验动物及手术方法采用体重2.2～3.0kg家兔30只，雌雄不限，随机分组，每组15只，术区备皮后，3%戊巴比妥钠以1ml/kg经耳缘静脉全麻，局部碘酒、酒精消毒，铺无菌孔巾，于颧弓下做一长约4cm的横切口，逐层切开皮肤、皮下组织。A组：暴露面神经颊支后，在主干上切除5mm造成缺损性损伤;游离同侧耳大神经，在其主干切取约8mm作为神经移植供体。手术显微镜下修整两断端后，用11/0无损伤缝线将耳大神经供体与面神经颊支受区行端端吻合(图1,2)。B组：神经移植同A组，吻合后直视下局部滴注2 000U的神经生长因子，逐层缝合，在体表以7号线做注射标志。于术后第1、2、3、4天在局部注入2 000U的神经生长因子。两组动物术后均饲养12周。
图1 显露耳大神经与面神经颊支(略)
图2 耳大神经供体与面神经颊支受区行端端吻合(略)
1.2 检测项目 (1)肉眼观察：术后12周，术区备皮，3%戊巴比妥钠全身麻醉，沿原切口逐层切开各层，观察A、B组移植神经。(2)神经电生理检测移植段神经传导速度：切取包括移植段在内约8cm面神经颊支主干，用CZ-1000型诱发电位测定仪(江苏生物医学医电研究所)测定神经传导速度。(3)组织学观察：切取包括两吻合端的移植段，多聚甲醛固定，石蜡包埋，切4μm薄片，HE染色，光镜观察。
1.3 统计学处理所有数据输入SPSS11.0统计软件进行方差分析。
2 结果
2.1 肉眼观察 A、B组移植神经表面有光泽，与周围组织无明显瘢痕粘连。双侧吻合口均呈梭形，未见明显神经瘤形成。
2.2 神经电生理检测 术后12周，A组神经传导速度为20.42±2.12m/s,B组神经传导速度为23.71±2.24m/s，A组明显低于B组(P<0.01)，差异具有统计学意义。
2.3组织学检测HE染色，A组可见神经纤维通过移植体，神经纤维数量少，分布稀疏，形态不规则(图3)。B组神经纤维也可通过移植体，神经纤维数量多，分布较A组稠密、规则(图4)。
图3 单纯神经移植组，通过吻合口的神经纤维数量少(略)
图4 应用神经生长因子组，通过吻合口的神经纤维数量多，较A组稠密(略)
3讨论
3.1 各种原因造成的面神经损伤，缺损较小可直接吻合，如行端端、端侧、侧侧吻合。对于较大的神经缺损，各学者进行了多方的尝试，常用的几种方法包括：(1)自体神经移植术；(2)同种异体神经移植术；(3)异种神经移植术；(4)静脉套管桥接；(5)动脉套管桥接；(6)硅胶管套接；(7)神经生长因子的应用；(8)组织工程技术；(9)基因工程技术等。同种异体神经和异种神经来源容易，可根据需要选择不同直径和长度的移植材料，但常面临着免疫排斥问题。Jensen\[3\]等应用冷冻法降低免疫排斥反应，但效果仍不理想。硅胶管具有取材方便﹑不塌陷的优点，但术后会出现致命的神经卡压现象和炎性刺激，另外需要再次手术取出，所以并不适合临床应用。动脉静脉套管容易塌陷，而且其中的成纤维细胞易形成瘢痕，阻碍神经生长\[4\]。组织、基因工程技术是20世纪80年代末发展起来的一门新兴边缘科学，仍处于实验研究阶段，未应用于临床。所以目前常被采用的方法是自体神经移植术，耳大、腓肠神经常被用作供体，但由于神经生长、修复的速度慢，所以必然存在修复时间长、功能恢复慢等缺点。
3.2 外源性神经生长因子的作用：外源性神经生长因子促进周围神经再生的作用主要表现在以下几个方面\[5\]：(1)维持交感神经及感觉神经的功能；(2)促进神经细胞的分化及微丝微管的生长；(3)促进轴突的生长；(4)加快神经的创伤愈合；(5)保护神经元，减少神经损伤后神经元的死亡。孔吉明\[6\]等报道，切断成年大鼠坐骨神经后，局部给予神经生长因子, 30天后L4~6水平的脊神经节细胞存活率高达98%，远远高于手术后未用神经生长因子的对照组。说明周围神经损伤后局部应用神经生长因子可降低受损神经的溃变程度，提高受损神经的存活率。
3.3 外用神经生长因子的可能性：神经损伤后3天内自体产生的内源性神经生长因子明显减少，至术后1周开始逐步升高，到2周达高峰\[7\]。由于神经损伤后第1周自体产生的内源性神经生长因子不足以促进自体损伤神经的修复，在此时期给予外源性神经生长因子可以弥补自身不足，从而达到促进神经修复的目的。实验结果证实神经移植后加用外源性神经生长因子可行，且在形态和功能恢复上均优于单纯移植。
在神经移植后加用神经生长因子，不仅加快了神经损伤的修复速度，而且促进了神经传导功能的恢复，值得推广。
参考文献
[1] 赵建军，周桂芬，满景华，等.带血管蒂筋膜瓣管桥接家兔面神经缺损的实验研究\[J\].解剖学杂志, 2002，25 (1): 52
[2] 姚向阳，王林，冯梅，等.耳大神经移植修复面神经缺损\[J\].山西医科大学学报，1999，30(3): 275
[3] Jensen S, Wallace MN, Dahlerup B. Cryopreservation of rat peripheral nerve segments later used for transplantation\[J\]. Neuroreporrt, 1990,14(1):243.
[4] 张桂生，苗存良.周围神经损伤治疗的研究进展\[J\].河北医药，2003, 25(1): 14.
[5] 刘国军，王发平，王志信.周围神经损伤后纤维修复体会\[J\].临沂医学专科学校学报，2003，25(3): 197.
[6] 孔吉明，钟世镇，胡耀民，等.周围神经损伤所致感觉神经元胞体死亡的保护\[J\].中华显微外科杂志，1995,18(11):184.
[7] Terria DJ , Fee WE. Current issues in nerve repair\[J\]. Arch Otolaryngol Head Neck Surgery, 1993, 197(7): 725.
收稿日期：20051114
(包头医学院人体解剖学教研室，内蒙古 包头 014010)
摘 要
目的：探讨神经移植后在局部注入神经生长因子对神经再生的影响。方法：家兔30只，随机分为两组。A组：切除5mm面神经颊支，用等长的耳大神经移植。B组：神经移植同A组，并于术中、术后第1、2、3、4天分别在局部注入2 000U的神经生长因子(大连司威特制药有限公司制)。术后饲养12周，对移植体进行神经电生理、组织学检测。结果：实验结果证明，再生神经纤维都可以通过移植神经的吻合端，A组神经传导速度为20.42±2.12m/s，B组神经传导速度为23.71±2.24m/s，两组神经传导速度差异有显著性(P<0.01)。结论：神经移植后注入神经生长因子的效果明显优于单纯神经移植。
关键词 神经移植；神经生长因子
中图分类号 R322.8
Effect of Exogenous Nerve Growth Factor on Nerve Implantation
ZHENG Liansheng, CUI Chengli, WANG Li, ZHANG Wenlong
(Department of Human Anatomy of Baotou Medical College，Baotou 014010,China)
Abstract Objective: To explore the effect of locally injected nerve growth factors on nerve regeneration after the facial nerve implantation.Methods: Thirty rabbits were randomly divided into two groups.Group A:Grafting the same length great auricular nerve after cutting off buccal branch of facial nerve.Group B: On the base of group A, injecting 2000U nerve growth factor on the implantation during the operation and 1、2、3、4 days,respectively,after the operation.The animals were fed after grafting for 12 weeks. The graft was examined by electrophysiology, histology. Results: The rabbit facial nerve regenerated across the implantation in two experimental groups. There was significant difference between group A and group B in nerve conduction velociticy (20.42±2.12m/s in Group A,23.71±2.24m/s in Group B) Conclusion: The results of nerve implantation with injected nerve growth factor is better than the simple nerve implantation.
Key words Nerve implantation; Nerve growth factor
颌面部外伤及手术常造成面神经损伤，损伤缺损较小，可行神经外膜或束膜缝合术，缺损较大考虑用神经移植术\[1\]。耳大神经是来自第2、3颈神经的感觉神经，位置表浅，与面神经同居一术野，作为自体移植材料具有取材方便，有一定长度和较多神经束，切取后除了神经支配范围内的感觉暂时丧失外，不遗留严重后遗症等优点，是口腔颌面部神经缺损修复中较理想的材料\[2\]。但神经移植后仍存在修复时间长，功能恢复慢等缺点。本实验在神经移植后分别于术中、术后第1、2、3、4天在局部注入2 000U的神经生长因子。于术后12周进行神经电生理、组织学检测。神经移植成功标准为：(1)电刺激移植神经，可测量出神经传导速度；(2)病理切片上再生神经纤维通过吻合口。
1材料与方法
1.1实验动物及手术方法采用体重2.2～3.0kg家兔30只，雌雄不限，随机分组，每组15只，术区备皮后，3%戊巴比妥钠以1ml/kg经耳缘静脉全麻，局部碘酒、酒精消毒，铺无菌孔巾，于颧弓下做一长约4cm的横切口，逐层切开皮肤、皮下组织。A组：暴露面神经颊支后，在主干上切除5mm造成缺损性损伤;游离同侧耳大神经，在其主干切取约8mm作为神经移植供体。手术显微镜下修整两断端后，用11/0无损伤缝线将耳大神经供体与面神经颊支受区行端端吻合(图1,2)。B组：神经移植同A组，吻合后直视下局部滴注2 000U的神经生长因子，逐层缝合，在体表以7号线做注射标志。于术后第1、2、3、4天在局部注入2 000U的神经生长因子。两组动物术后均饲养12周。
图1 显露耳大神经与面神经颊支(略)
图2 耳大神经供体与面神经颊支受区行端端吻合(略)
1.2 检测项目 (1)肉眼观察：术后12周，术区备皮，3%戊巴比妥钠全身麻醉，沿原切口逐层切开各层，观察A、B组移植神经。(2)神经电生理检测移植段神经传导速度：切取包括移植段在内约8cm面神经颊支主干，用CZ-1000型诱发电位测定仪(江苏生物医学医电研究所)测定神经传导速度。(3)组织学观察：切取包括两吻合端的移植段，多聚甲醛固定，石蜡包埋，切4μm薄片，HE染色，光镜观察。
1.3 统计学处理所有数据输入SPSS11.0统计软件进行方差分析。
2 结果
2.1 肉眼观察 A、B组移植神经表面有光泽，与周围组织无明显瘢痕粘连。双侧吻合口均呈梭形，未见明显神经瘤形成。
2.2 神经电生理检测 术后12周，A组神经传导速度为20.42±2.12m/s,B组神经传导速度为23.71±2.24m/s，A组明显低于B组(P<0.01)，差异具有统计学意义。
2.3组织学检测HE染色，A组可见神经纤维通过移植体，神经纤维数量少，分布稀疏，形态不规则(图3)。B组神经纤维也可通过移植体，神经纤维数量多，分布较A组稠密、规则(图4)。
图3 单纯神经移植组，通过吻合口的神经纤维数量少(略)
图4 应用神经生长因子组，通过吻合口的神经纤维数量多，较A组稠密(略)
3讨论
3.1 各种原因造成的面神经损伤，缺损较小可直接吻合，如行端端、端侧、侧侧吻合。对于较大的神经缺损，各学者进行了多方的尝试，常用的几种方法包括：(1)自体神经移植术；(2)同种异体神经移植术；(3)异种神经移植术；(4)静脉套管桥接；(5)动脉套管桥接；(6)硅胶管套接；(7)神经生长因子的应用；(8)组织工程技术；(9)基因工程技术等。同种异体神经和异种神经来源容易，可根据需要选择不同直径和长度的移植材料，但常面临着免疫排斥问题。Jensen\[3\]等应用冷冻法降低免疫排斥反应，但效果仍不理想。硅胶管具有取材方便﹑不塌陷的优点，但术后会出现致命的神经卡压现象和炎性刺激，另外需要再次手术取出，所以并不适合临床应用。动脉静脉套管容易塌陷，而且其中的成纤维细胞易形成瘢痕，阻碍神经生长\[4\]。组织、基因工程技术是20世纪80年代末发展起来的一门新兴边缘科学，仍处于实验研究阶段，未应用于临床。所以目前常被采用的方法是自体神经移植术，耳大、腓肠神经常被用作供体，但由于神经生长、修复的速度慢，所以必然存在修复时间长、功能恢复慢等缺点。
3.2 外源性神经生长因子的作用：外源性神经生长因子促进周围神经再生的作用主要表现在以下几个方面\[5\]：(1)维持交感神经及感觉神经的功能；(2)促进神经细胞的分化及微丝微管的生长；(3)促进轴突的生长；(4)加快神经的创伤愈合；(5)保护神经元，减少神经损伤后神经元的死亡。孔吉明\[6\]等报道，切断成年大鼠坐骨神经后，局部给予神经生长因子, 30天后L4~6水平的脊神经节细胞存活率高达98%，远远高于手术后未用神经生长因子的对照组。说明周围神经损伤后局部应用神经生长因子可降低受损神经的溃变程度，提高受损神经的存活率。
3.3 外用神经生长因子的可能性：神经损伤后3天内自体产生的内源性神经生长因子明显减少，至术后1周开始逐步升高，到2周达高峰\[7\]。由于神经损伤后第1周自体产生的内源性神经生长因子不足以促进自体损伤神经的修复，在此时期给予外源性神经生长因子可以弥补自身不足，从而达到促进神经修复的目的。实验结果证实神经移植后加用外源性神经生长因子可行，且在形态和功能恢复上均优于单纯移植。
在神经移植后加用神经生长因子，不仅加快了神经损伤的修复速度，而且促进了神经传导功能的恢复，值得推广。
参考文献
[1] 赵建军，周桂芬，满景华，等.带血管蒂筋膜瓣管桥接家兔面神经缺损的实验研究\[J\].解剖学杂志, 2002，25 (1): 52
[2] 姚向阳，王林，冯梅，等.耳大神经移植修复面神经缺损\[J\].山西医科大学学报，1999，30(3): 275
[3] Jensen S, Wallace MN, Dahlerup B. Cryopreservation of rat peripheral nerve segments later used for transplantation\[J\]. Neuroreporrt, 1990,14(1):243.
[4] 张桂生，苗存良.周围神经损伤治疗的研究进展\[J\].河北医药，2003, 25(1): 14.
[5] 刘国军，王发平，王志信.周围神经损伤后纤维修复体会\[J\].临沂医学专科学校学报，2003，25(3): 197.
[6] 孔吉明，钟世镇，胡耀民，等.周围神经损伤所致感觉神经元胞体死亡的保护\[J\].中华显微外科杂志，1995,18(11):184.
[7] Terria DJ , Fee WE. Current issues in nerve repair\[J\]. Arch Otolaryngol Head Neck Surgery, 1993, 197(7): 725.
(包头医学院人体解剖学教研室，内蒙古 包头 014010), 百拇医药(郑连生 崔成立 王力 张文龙)
目的：探讨神经移植后在局部注入神经生长因子对神经再生的影响。方法：家兔30只，随机分为两组。A组：切除5mm面神经颊支，用等长的耳大神经移植。B组：神经移植同A组，并于术中、术后第1、2、3、4天分别在局部注入2 000U的神经生长因子(大连司威特制药有限公司制)。术后饲养12周，对移植体进行神经电生理、组织学检测。结果：实验结果证明，再生神经纤维都可以通过移植神经的吻合端，A组神经传导速度为20.42±2.12m/s，B组神经传导速度为23.71±2.24m/s，两组神经传导速度差异有显著性(P<0.01)。结论：神经移植后注入神经生长因子的效果明显优于单纯神经移植。
关键词 神经移植；神经生长因子
中图分类号 R322.8
Effect of Exogenous Nerve Growth Factor on Nerve Implantation
ZHENG Liansheng, CUI Chengli, WANG Li, ZHANG Wenlong
(Department of Human Anatomy of Baotou Medical College，Baotou 014010,China)
Abstract Objective: To explore the effect of locally injected nerve growth factors on nerve regeneration after the facial nerve implantation.Methods: Thirty rabbits were randomly divided into two groups.Group A:Grafting the same length great auricular nerve after cutting off buccal branch of facial nerve.Group B: On the base of group A, injecting 2000U nerve growth factor on the implantation during the operation and 1、2、3、4 days,respectively,after the operation.The animals were fed after grafting for 12 weeks. The graft was examined by electrophysiology, histology. Results: The rabbit facial nerve regenerated across the implantation in two experimental groups. There was significant difference between group A and group B in nerve conduction velociticy (20.42±2.12m/s in Group A,23.71±2.24m/s in Group B) Conclusion: The results of nerve implantation with injected nerve growth factor is better than the simple nerve implantation.
Key words Nerve implantation; Nerve growth factor
颌面部外伤及手术常造成面神经损伤，损伤缺损较小，可行神经外膜或束膜缝合术，缺损较大考虑用神经移植术\[1\]。耳大神经是来自第2、3颈神经的感觉神经，位置表浅，与面神经同居一术野，作为自体移植材料具有取材方便，有一定长度和较多神经束，切取后除了神经支配范围内的感觉暂时丧失外，不遗留严重后遗症等优点，是口腔颌面部神经缺损修复中较理想的材料\[2\]。但神经移植后仍存在修复时间长，功能恢复慢等缺点。本实验在神经移植后分别于术中、术后第1、2、3、4天在局部注入2 000U的神经生长因子。于术后12周进行神经电生理、组织学检测。神经移植成功标准为：(1)电刺激移植神经，可测量出神经传导速度；(2)病理切片上再生神经纤维通过吻合口。
1材料与方法
1.1实验动物及手术方法采用体重2.2～3.0kg家兔30只，雌雄不限，随机分组，每组15只，术区备皮后，3%戊巴比妥钠以1ml/kg经耳缘静脉全麻，局部碘酒、酒精消毒，铺无菌孔巾，于颧弓下做一长约4cm的横切口，逐层切开皮肤、皮下组织。A组：暴露面神经颊支后，在主干上切除5mm造成缺损性损伤;游离同侧耳大神经，在其主干切取约8mm作为神经移植供体。手术显微镜下修整两断端后，用11/0无损伤缝线将耳大神经供体与面神经颊支受区行端端吻合(图1,2)。B组：神经移植同A组，吻合后直视下局部滴注2 000U的神经生长因子，逐层缝合，在体表以7号线做注射标志。于术后第1、2、3、4天在局部注入2 000U的神经生长因子。两组动物术后均饲养12周。
图1 显露耳大神经与面神经颊支(略)
图2 耳大神经供体与面神经颊支受区行端端吻合(略)
1.2 检测项目 (1)肉眼观察：术后12周，术区备皮，3%戊巴比妥钠全身麻醉，沿原切口逐层切开各层，观察A、B组移植神经。(2)神经电生理检测移植段神经传导速度：切取包括移植段在内约8cm面神经颊支主干，用CZ-1000型诱发电位测定仪(江苏生物医学医电研究所)测定神经传导速度。(3)组织学观察：切取包括两吻合端的移植段，多聚甲醛固定，石蜡包埋，切4μm薄片，HE染色，光镜观察。
1.3 统计学处理所有数据输入SPSS11.0统计软件进行方差分析。
2 结果
2.1 肉眼观察 A、B组移植神经表面有光泽，与周围组织无明显瘢痕粘连。双侧吻合口均呈梭形，未见明显神经瘤形成。
2.2 神经电生理检测 术后12周，A组神经传导速度为20.42±2.12m/s,B组神经传导速度为23.71±2.24m/s，A组明显低于B组(P<0.01)，差异具有统计学意义。
2.3组织学检测HE染色，A组可见神经纤维通过移植体，神经纤维数量少，分布稀疏，形态不规则(图3)。B组神经纤维也可通过移植体，神经纤维数量多，分布较A组稠密、规则(图4)。
图3 单纯神经移植组，通过吻合口的神经纤维数量少(略)
图4 应用神经生长因子组，通过吻合口的神经纤维数量多，较A组稠密(略)
3讨论
3.1 各种原因造成的面神经损伤，缺损较小可直接吻合，如行端端、端侧、侧侧吻合。对于较大的神经缺损，各学者进行了多方的尝试，常用的几种方法包括：(1)自体神经移植术；(2)同种异体神经移植术；(3)异种神经移植术；(4)静脉套管桥接；(5)动脉套管桥接；(6)硅胶管套接；(7)神经生长因子的应用；(8)组织工程技术；(9)基因工程技术等。同种异体神经和异种神经来源容易，可根据需要选择不同直径和长度的移植材料，但常面临着免疫排斥问题。Jensen\[3\]等应用冷冻法降低免疫排斥反应，但效果仍不理想。硅胶管具有取材方便﹑不塌陷的优点，但术后会出现致命的神经卡压现象和炎性刺激，另外需要再次手术取出，所以并不适合临床应用。动脉静脉套管容易塌陷，而且其中的成纤维细胞易形成瘢痕，阻碍神经生长\[4\]。组织、基因工程技术是20世纪80年代末发展起来的一门新兴边缘科学，仍处于实验研究阶段，未应用于临床。所以目前常被采用的方法是自体神经移植术，耳大、腓肠神经常被用作供体，但由于神经生长、修复的速度慢，所以必然存在修复时间长、功能恢复慢等缺点。
3.2 外源性神经生长因子的作用：外源性神经生长因子促进周围神经再生的作用主要表现在以下几个方面\[5\]：(1)维持交感神经及感觉神经的功能；(2)促进神经细胞的分化及微丝微管的生长；(3)促进轴突的生长；(4)加快神经的创伤愈合；(5)保护神经元，减少神经损伤后神经元的死亡。孔吉明\[6\]等报道，切断成年大鼠坐骨神经后，局部给予神经生长因子, 30天后L4~6水平的脊神经节细胞存活率高达98%，远远高于手术后未用神经生长因子的对照组。说明周围神经损伤后局部应用神经生长因子可降低受损神经的溃变程度，提高受损神经的存活率。
3.3 外用神经生长因子的可能性：神经损伤后3天内自体产生的内源性神经生长因子明显减少，至术后1周开始逐步升高，到2周达高峰\[7\]。由于神经损伤后第1周自体产生的内源性神经生长因子不足以促进自体损伤神经的修复，在此时期给予外源性神经生长因子可以弥补自身不足，从而达到促进神经修复的目的。实验结果证实神经移植后加用外源性神经生长因子可行，且在形态和功能恢复上均优于单纯移植。
在神经移植后加用神经生长因子，不仅加快了神经损伤的修复速度，而且促进了神经传导功能的恢复，值得推广。
参考文献
[1] 赵建军，周桂芬，满景华，等.带血管蒂筋膜瓣管桥接家兔面神经缺损的实验研究\[J\].解剖学杂志, 2002，25 (1): 52
[2] 姚向阳，王林，冯梅，等.耳大神经移植修复面神经缺损\[J\].山西医科大学学报，1999，30(3): 275
[3] Jensen S, Wallace MN, Dahlerup B. Cryopreservation of rat peripheral nerve segments later used for transplantation\[J\]. Neuroreporrt, 1990,14(1):243.
[4] 张桂生，苗存良.周围神经损伤治疗的研究进展\[J\].河北医药，2003, 25(1): 14.
[5] 刘国军，王发平，王志信.周围神经损伤后纤维修复体会\[J\].临沂医学专科学校学报，2003，25(3): 197.
[6] 孔吉明，钟世镇，胡耀民，等.周围神经损伤所致感觉神经元胞体死亡的保护\[J\].中华显微外科杂志，1995,18(11):184.
[7] Terria DJ , Fee WE. Current issues in nerve repair\[J\]. Arch Otolaryngol Head Neck Surgery, 1993, 197(7): 725.
收稿日期：20051114
(包头医学院人体解剖学教研室，内蒙古 包头 014010)
摘 要
目的：探讨神经移植后在局部注入神经生长因子对神经再生的影响。方法：家兔30只，随机分为两组。A组：切除5mm面神经颊支，用等长的耳大神经移植。B组：神经移植同A组，并于术中、术后第1、2、3、4天分别在局部注入2 000U的神经生长因子(大连司威特制药有限公司制)。术后饲养12周，对移植体进行神经电生理、组织学检测。结果：实验结果证明，再生神经纤维都可以通过移植神经的吻合端，A组神经传导速度为20.42±2.12m/s，B组神经传导速度为23.71±2.24m/s，两组神经传导速度差异有显著性(P<0.01)。结论：神经移植后注入神经生长因子的效果明显优于单纯神经移植。
关键词 神经移植；神经生长因子
中图分类号 R322.8
Effect of Exogenous Nerve Growth Factor on Nerve Implantation
ZHENG Liansheng, CUI Chengli, WANG Li, ZHANG Wenlong
(Department of Human Anatomy of Baotou Medical College，Baotou 014010,China)
Abstract Objective: To explore the effect of locally injected nerve growth factors on nerve regeneration after the facial nerve implantation.Methods: Thirty rabbits were randomly divided into two groups.Group A:Grafting the same length great auricular nerve after cutting off buccal branch of facial nerve.Group B: On the base of group A, injecting 2000U nerve growth factor on the implantation during the operation and 1、2、3、4 days,respectively,after the operation.The animals were fed after grafting for 12 weeks. The graft was examined by electrophysiology, histology. Results: The rabbit facial nerve regenerated across the implantation in two experimental groups. There was significant difference between group A and group B in nerve conduction velociticy (20.42±2.12m/s in Group A,23.71±2.24m/s in Group B) Conclusion: The results of nerve implantation with injected nerve growth factor is better than the simple nerve implantation.
Key words Nerve implantation; Nerve growth factor
颌面部外伤及手术常造成面神经损伤，损伤缺损较小，可行神经外膜或束膜缝合术，缺损较大考虑用神经移植术\[1\]。耳大神经是来自第2、3颈神经的感觉神经，位置表浅，与面神经同居一术野，作为自体移植材料具有取材方便，有一定长度和较多神经束，切取后除了神经支配范围内的感觉暂时丧失外，不遗留严重后遗症等优点，是口腔颌面部神经缺损修复中较理想的材料\[2\]。但神经移植后仍存在修复时间长，功能恢复慢等缺点。本实验在神经移植后分别于术中、术后第1、2、3、4天在局部注入2 000U的神经生长因子。于术后12周进行神经电生理、组织学检测。神经移植成功标准为：(1)电刺激移植神经，可测量出神经传导速度；(2)病理切片上再生神经纤维通过吻合口。
1材料与方法
1.1实验动物及手术方法采用体重2.2～3.0kg家兔30只，雌雄不限，随机分组，每组15只，术区备皮后，3%戊巴比妥钠以1ml/kg经耳缘静脉全麻，局部碘酒、酒精消毒，铺无菌孔巾，于颧弓下做一长约4cm的横切口，逐层切开皮肤、皮下组织。A组：暴露面神经颊支后，在主干上切除5mm造成缺损性损伤;游离同侧耳大神经，在其主干切取约8mm作为神经移植供体。手术显微镜下修整两断端后，用11/0无损伤缝线将耳大神经供体与面神经颊支受区行端端吻合(图1,2)。B组：神经移植同A组，吻合后直视下局部滴注2 000U的神经生长因子，逐层缝合，在体表以7号线做注射标志。于术后第1、2、3、4天在局部注入2 000U的神经生长因子。两组动物术后均饲养12周。
图1 显露耳大神经与面神经颊支(略)
图2 耳大神经供体与面神经颊支受区行端端吻合(略)
1.2 检测项目 (1)肉眼观察：术后12周，术区备皮，3%戊巴比妥钠全身麻醉，沿原切口逐层切开各层，观察A、B组移植神经。(2)神经电生理检测移植段神经传导速度：切取包括移植段在内约8cm面神经颊支主干，用CZ-1000型诱发电位测定仪(江苏生物医学医电研究所)测定神经传导速度。(3)组织学观察：切取包括两吻合端的移植段，多聚甲醛固定，石蜡包埋，切4μm薄片，HE染色，光镜观察。
1.3 统计学处理所有数据输入SPSS11.0统计软件进行方差分析。
2 结果
2.1 肉眼观察 A、B组移植神经表面有光泽，与周围组织无明显瘢痕粘连。双侧吻合口均呈梭形，未见明显神经瘤形成。
2.2 神经电生理检测 术后12周，A组神经传导速度为20.42±2.12m/s,B组神经传导速度为23.71±2.24m/s，A组明显低于B组(P<0.01)，差异具有统计学意义。
2.3组织学检测HE染色，A组可见神经纤维通过移植体，神经纤维数量少，分布稀疏，形态不规则(图3)。B组神经纤维也可通过移植体，神经纤维数量多，分布较A组稠密、规则(图4)。
图3 单纯神经移植组，通过吻合口的神经纤维数量少(略)
图4 应用神经生长因子组，通过吻合口的神经纤维数量多，较A组稠密(略)
3讨论
3.1 各种原因造成的面神经损伤，缺损较小可直接吻合，如行端端、端侧、侧侧吻合。对于较大的神经缺损，各学者进行了多方的尝试，常用的几种方法包括：(1)自体神经移植术；(2)同种异体神经移植术；(3)异种神经移植术；(4)静脉套管桥接；(5)动脉套管桥接；(6)硅胶管套接；(7)神经生长因子的应用；(8)组织工程技术；(9)基因工程技术等。同种异体神经和异种神经来源容易，可根据需要选择不同直径和长度的移植材料，但常面临着免疫排斥问题。Jensen\[3\]等应用冷冻法降低免疫排斥反应，但效果仍不理想。硅胶管具有取材方便﹑不塌陷的优点，但术后会出现致命的神经卡压现象和炎性刺激，另外需要再次手术取出，所以并不适合临床应用。动脉静脉套管容易塌陷，而且其中的成纤维细胞易形成瘢痕，阻碍神经生长\[4\]。组织、基因工程技术是20世纪80年代末发展起来的一门新兴边缘科学，仍处于实验研究阶段，未应用于临床。所以目前常被采用的方法是自体神经移植术，耳大、腓肠神经常被用作供体，但由于神经生长、修复的速度慢，所以必然存在修复时间长、功能恢复慢等缺点。
3.2 外源性神经生长因子的作用：外源性神经生长因子促进周围神经再生的作用主要表现在以下几个方面\[5\]：(1)维持交感神经及感觉神经的功能；(2)促进神经细胞的分化及微丝微管的生长；(3)促进轴突的生长；(4)加快神经的创伤愈合；(5)保护神经元，减少神经损伤后神经元的死亡。孔吉明\[6\]等报道，切断成年大鼠坐骨神经后，局部给予神经生长因子, 30天后L4~6水平的脊神经节细胞存活率高达98%，远远高于手术后未用神经生长因子的对照组。说明周围神经损伤后局部应用神经生长因子可降低受损神经的溃变程度，提高受损神经的存活率。
3.3 外用神经生长因子的可能性：神经损伤后3天内自体产生的内源性神经生长因子明显减少，至术后1周开始逐步升高，到2周达高峰\[7\]。由于神经损伤后第1周自体产生的内源性神经生长因子不足以促进自体损伤神经的修复，在此时期给予外源性神经生长因子可以弥补自身不足，从而达到促进神经修复的目的。实验结果证实神经移植后加用外源性神经生长因子可行，且在形态和功能恢复上均优于单纯移植。
在神经移植后加用神经生长因子，不仅加快了神经损伤的修复速度，而且促进了神经传导功能的恢复，值得推广。
参考文献
[1] 赵建军，周桂芬，满景华，等.带血管蒂筋膜瓣管桥接家兔面神经缺损的实验研究\[J\].解剖学杂志, 2002，25 (1): 52
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[3] Jensen S, Wallace MN, Dahlerup B. Cryopreservation of rat peripheral nerve segments later used for transplantation\[J\]. Neuroreporrt, 1990,14(1):243.
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(包头医学院人体解剖学教研室，内蒙古 包头 014010), 百拇医药(郑连生 崔成立 王力 张文龙)