摘要:目的 建立亚马逊利什曼原虫无鞭毛体体外培养方法，并用间接免疫荧光法分析其抗原特异性。 方法 小鼠皮损组织处获得的无鞭毛体(Al)、由前鞭毛体转化来的无鞭毛体(Ap)、J774.G8巨噬细胞来源的无鞭毛体(Aj)置于改良后的Schneider's Drosophila培养基，pH4.6、33℃条件下培养，取培养物光镜下观察并用间接免疫荧光法分析。 结果 三种不同来源无鞭毛体体外培养物光镜检查形态相似，均与纯培养获得的无鞭毛体一样。与无鞭毛体特异性蛋白P-8和P-4特异性单克隆抗体进行间接免疫荧光分析显示，三种不同来源的无鞭毛体均出现阳性，且浓度与部位相似。而前鞭毛体与抗P-8单克隆抗体(mAb)染色呈弱阳性反应，与抗P-4单克隆抗体呈阴性反应。相反，GP-46/M-2McAb与前鞭毛体染色呈强阳性反应，与无鞭毛体仅呈弱阳性反应。 结论 在33℃条件下，用改良的Schneider's Drosophila培养基进行无鞭毛体体外培养获得成功。用阶段特异性单克隆抗体，进行间接免疫荧光分析法可鉴定亚马逊利什曼原虫的无鞭毛体。

    

    关键词:亚马逊利什曼原虫;无鞭毛体;体外培养;间接免疫荧光

    Axenic cultivation and indirect immunofluorescent analyasis of Leishmania anazonesis amastigotes.

    WANG Hua-min，Soong Lynn.

    (Division of Microbiology and Immunology of Hainan Medical College，Haikou571101，Hainan，P.R.China;Department of Microbiology and Immunology，University of Texas Medical Branch，Galveston，TX，USA)

    Abstract:Objective To establish a method for culture of Leishmania amazonensis amastigotes in vitro and identify the anti-genic specificity of amastigotes with indirect immunofluorescent assay. Methods Amastigotes derived from mouse lesions ......