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编号:11024998
荧光光谱法研究培氟沙星与牛血清白蛋白结合反应特征
http://www.100md.com 《分析化学》 2006年第6期
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     摘要 在不同温度下,扫描了培氟沙星(PEFL)与牛血清白蛋白(BSA)作用的荧光猝灭光谱、同步荧光光谱、三维荧光光谱和紫外可见吸收光谱,分别用Stern-Volmer方程、LineweaverBurk方程和热力学方程等处理实验数据,得到了结合反应的相关参数KLB、ΔH θ、ΔGθ和ΔSθ等的平均值分别为8.419×103 L·mol-1、150.7 kJ·mol-1、-22.88 kJ·mol-1和561.9 J·K-1,结合位点数为1.081;证实了在实验浓度和温度范围内,PEFL与BSA可结合形成具有一定结构的复合物,荧光猝灭作用符合静态猝灭作用特征,作用力主要是疏水作用力和静电作用力;为研究PEFL的药理作用和生物学效应,以及PEFL对蛋白质构像的影响等提供了重要信息。

     关键词 培氟沙星,牛血清白蛋白,荧光猝灭光谱,三维荧光光谱,紫外吸收光谱,热力学参数

     1 引言

    研究蛋白质等生物大分子与小分子相互作用特征,探讨它们之间相互作用的热力学性质、结合力的性质和相互作用的机理等,对于促进蛋白质组学的研究有重要的意义。培氟沙星(PEFL,摩尔质量为333.36)是第三代喹诺酮类抗菌药物,其抗菌谱与氟哌酸相似,对大肠杆菌属等众多细菌均具有良好的抗菌活性,对金黄色葡萄球菌的抗菌活性约是诺氟沙星的2~4倍。主要用于治疗革兰阴性菌和金黄色球菌引起的中度感染或者重度感染[1]。本研究在不同温度下,扫描培氟沙星(PEFL)与牛血清白蛋白(BSA)作用的荧光猝灭光谱、同步荧光光谱、三维荧光光谱和紫外可见吸收光谱,分别用SternVolmer方程、LineweaverBurk方程和热力学方程等处理实验数据,得到了结合反应的相关参数,证实了在实验浓度和温度范围内,PEFL与BSA可结合形成具有一定结构的复合物,荧光猝灭作用更符合静态猝灭作用特征,作用力主要是疏水作用力和静电作用力。为研究PEFL的药理作用和生物学效应,以及PEFL对蛋白质构像的影响等提供了重要信息。

     2 实验部分

    2.1 仪器与试剂

    LS55型荧光分光光度计(美国PE公司),UV1100型可见分光光度计(北京瑞利分析仪器公司);AY120电子分析天平(日本岛津公司);SYC15超级恒温水浴(南京桑力电子设备厂)。

    PEFL(又名培氟哌酸、甲氟哌酸、哌氟喹酸,中国生物药品检定所提供)储备液:浓度为200 mg/L;PEFL工作液:20 mg/L ......

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