【摘要】 目的 用实时荧光定量RT-PCR的方法测定PBC患者外周血中GNLY的基因表达水平，探讨GNLY在原发性胆汁性肝硬化(PBC)的表达及意义。 方法 采用Taqman探针技术，以18sRNA为内对照，测定了60例PBC性心脏病患者外周血中GNLY mRNA的含量，以健康对照组为对照。结果 GNLY mRNA在60例PBC患者的表达范围为5.35×107～4.61×109拷贝/μg RNA，均值为(2.7±2.5)×108拷贝/μg RNA；100例健康对照者均值为(3.0±1.9)×107拷贝/μg RNA。PBC组GNLY mRNA的含量显著高于疾病对照乙型肝炎肝硬化组和健康对照组(P<0.01)。结论 通过FQ-PCR方法检测出PBC患者GNLY mRNA的含量显著高于健康对照组，GNLY表达与PBC的发生发展存在一定的关联性。

    【关键词】 PBC； GNLY；逆转录-聚合酶链反应

    原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis，PBC)是一种原因不明的自身免疫性肝病，胆小管出现进行性破坏性炎症反应，肝内出现慢性胆汁淤积，进一步发展成肝纤维化和肝硬化，最终患者只能依靠肝移植免于死亡[1]。PBC患者胆管破坏伴随着门脉淋巴细胞浸润，主要为活化的CD8+T和CD4+T细胞，CD8+T细胞介导的免疫反应参与PBC中胆管上皮细胞和肝细胞破坏的发病过程[2]。颗粒溶素(granulysin，GNLY)是NK(natural killer，NK)细胞和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表达的一种溶细胞分子，在机体免疫应答过程中，它先通过胞吐作用从胞浆颗粒中排出，然后在胞外发挥其细胞毒作用[3]。本研究主要是利用实时荧光定量RT-PCR的技术，建立一种灵敏快速地检测GNLY 基因表达的方法，并从分子水平探讨GNLY mRNA 在PBC患者外周血中的表达及临床意义。

     1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 研究对象 60例经临床确诊的PBC患者均为长征医院住院病人 ......