HBV cccDNA检测方法及其研究意义
http://www.100md.com
杨 培, 秦 波
聚腺苷二磷酸核糖聚合酶;原发性肝细胞癌;生物学特征;免疫组化;免疫印迹王志强,黄志勇,陈孝平,张志发.人肝癌组织中PARP-1的表达与生物学特征的关系. 世界华人消化杂志2006;14(2
 |
| 第1页 |
参见附件(779KB，4页)。
杨培, 秦波, 重庆医科大学附属第二医院感染病科 重庆市 400010重庆市卫生局重点科研课题资助项目, No. 渝卫科教(2005) 31号(05-1-001)
通讯作者: 秦波, 400010, 重庆市, 重庆医科大学附属第二医院感染病科. cqqinbo@126.com
电话: 023-63717934
收稿日期: 2006-01-27 接受日期: 2006-02-13
摘要目的:研究聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly adenosine diphosphate (ADP) -ribose polymerase-1, PARP-1)在肝癌及癌周肝组织中的表达, 以及其表达水平与肝癌生物学特征的关系.
方法: 采用免疫组织化学技术及Western blot技术, 检测40例手术切除的人肝癌组织及癌旁组织中PARP-1的表达, 结合肝癌的临床生物学特征分析PARP-1表达与肝癌分化、转移及复发的关系.
结果:PARP-1主要表达于细胞核, 肝癌组织中PARP-1的表达明显高于癌旁肝组织, 分别为61.44%和40.20%, 差异有显著性(t = 6.49, P<0.01); 低分化肝癌组织中PARP-1的表达明显高于中高分化肝癌组织, 分别为70.8%和45.6%, 差异有显著性(t = 4.57,P<0.01); 伴有转移或复发的肝癌组织中PARP-1的表达明显高于不伴有转移或复发的肝癌组织, 分别为73.0%和43.4%, 差异有显著性(t = 3.33, P<0.01).
结论: PARP-1基因在肝癌组织中表达显著上调, 且PARP-1表达上调与肝癌的恶性分化及转移复发有密切关系.
关键词: 聚腺苷二磷酸核糖聚合酶; 原发性肝细胞癌; 生物学特征; 免疫组化; 免疫印迹
王志强, 黄志勇, 陈孝平, 张志发. 人肝癌组织中PARP-1的表达与生物学特征的关系. 世界华人消化杂志 2006;14(20):1995-1998
0 引言
乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA(hepatitis B virus covalently closed circular DNA, HBV cccDNA)是乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)复制的中间体, 是HBV mRNA和前基因组RNA的合成模板, 同时也是HBV持续感染的关键因素[1-2]. Southern blot是检测HBV cccDNA的¾典方法, 其过程较复杂, 操作可控性差, 且灵敏度不高. 随着聚合酶链反应(PCR)技术不断发展和完善, 检测HBV cccDNA已成为可能, 并已取得了许多重要进展.
1 检测cccDNA的意义
1.1 认识和掌握HBV生活周期 在HBV生活周期中, HBV cccDNA的形成是关键一步. 以HBV cccDNA为模板合成的前基因组RNA在核内转录后转运至胞质,¾组装进入由病毒核心蛋白及P蛋白组成的复合体内, 逆转录合成HBV DNA负链. 前基因组RNA继而被降解, 剩下负链作为模板合成正链DNA, 新合成的HBV rcDNA中正链大多不完整. 含有此种HBV rcDNA的核衣壳可以包装进病毒包膜, 转运出细胞成为成熟的病毒颗粒; 也可在胞质内脱壳, 转运至核内, 补充HBV cccDNA的量. 通过包膜蛋白的反馈抑制作用及肝细胞周期的循环等机制, 使HBV cccDNA在被感染的肝细胞内保持一定水平, 形成一个HBV cccDNA池[3-4].
1.2 指导乙型肝炎抗病毒治疗 最近研究表明[5], HBV cccDNA与细胞核内的核蛋白结合形成微染色体, 嗜肝病毒的不对称复制可保护HBV cccDNA不被链终止多聚酶抑制物直接清除, 并且病毒处于低复制状态时成熟的病毒体优先用于补充HBV cccDNA池, 如此多种因素的共同作用可使抗病毒药物对HBV cccDNA无直接抑制作用. HBV cccDNA持续存在于肝细胞内, 从而造成HBV的持续感染和抗病毒药物治疗后的HBV再复制. Sung et al[6]在用拉米夫定单一治疗或联合长效干扰素治疗中发现, 持续应答患者肝细胞内HBV cccDNA明显较无应答患者低, 在预测治疗后持续病原学应答方面优于血清HBV DNA ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(779KB，4页)。