脐血；_抗原_CD34；_巨核细胞____

TPO、PDGF、IL11在脐血巨核细胞生长和分化中的作用

http://www.100md.com 《福建医科大学学报》 2006年第4期

脐血；,抗原,CD34；,巨核细胞,,脐血；,抗原，CD34；,巨核细胞,1材料和方法,2结果,3讨论,参考文献：

     摘要:目的比较血小板生成素(TPO)、血小板源性生长因子(PDGF)、白细胞介素11(IL11)在促进巨核系增殖、分化及成熟过程中的不同效果，初步探讨巨核细胞分化过程中相关信号通路蛋白的表达。方法用免疫磁珠法分离纯化脐血CD34+细胞，在液体培养体系中经TPO、PDGFBB、干细胞因子(SCF)、IL1β、IL3、IL6及IL11等细胞因子组合的诱导，检测有核细胞(NC)总数和CD41+、CD61+表达，蛋白印迹实验(Western blot)分析巨核细胞分化过程中相关信号通路蛋白的表达。结果TPO对巨核系的扩增效果明显强于PDGF和IL11，而PDGF、IL11的扩增效果差别不大；含IL11的因子组，NC及CD41+、CD61+细胞的总数都有明显增加，但CD41+、CD61+细胞比例不高；脐血CD34+细胞在TPO、SCF、IL1β、IL3、IL6及IL11等因子作用下，随着培养时间的延长，促分裂原活化蛋白激酶42/激酶44(MAPK p42/p44)蛋白表达并无明显改变，蛋白激酶B蛋白亦未见明显变化，但磷酸化的p42和p44的表达却明显增加。结论在体外诱导脐血CD34+细胞向巨核系定向分化过程中，TPO起着最重要的作用；TPO联合其他造血生长因子刺激脐血CD34+细胞向巨核细胞分化和增殖过程中，刺激了MAPK p42/p44分子的磷酸化，从而激活和维持巨核细胞的增殖。

    关键词:脐血；抗原，CD34；巨核细胞

    造血干细胞(HSC)向巨核细胞和血小板分化的过程中，有二种造血细胞生长因子起主要作用：血小板源性生长因子(PDGF)作用于巨核系增殖和分化的早期；而血小板生成素(TPO)是目前研究最多，作用较广泛的因子，可作用于巨核系增殖、分化和成熟的各个阶段。白细胞介素11(IL11)等细胞因子则可协同这种作用。笔者比较TPO、PDGF、IL11等细胞因子在促进巨核系增殖、分化及成熟过程中的不同效果。

    1材料和方法

    1.1试剂VarioMACS免疫磁性吸附柱分离装置和CD34+ Isolation Kit(德国Miltenyi Biotec公司)，SCGM无血清培养基(德国Cell Genix公司)，CD单抗(美国BD公司)，细胞因子(美国Pepro Tech公司) ......

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