化学键合聚乙烯亚胺涂层毛细管柱的快速制备及评价
毛细管电泳,涂层柱,聚乙烯亚胺,蛋白质,电渗流,,毛细管电泳，涂层柱，聚乙烯亚胺，蛋白质，电渗流,1引言,2实验部分,3结果与讨论,Referen
摘要 以γ缩水甘油醚丙基三甲氧基硅烷和聚乙烯亚胺,合成了具有三甲氧基硅烷活性基团的聚乙烯亚胺衍生物，并通过热处理使此高分子聚合物键合于石英毛细管内壁,成功制备了聚乙烯亚胺涂层毛细管柱。所制得的涂层柱能有效抑止电渗流和防止蛋白质在柱上的吸附。在pH 74的缓冲溶液中，碱性蛋白质的平均分离柱效为17×105理论塔板数/米，分析结果呈现出较好的重现性。该制柱方法快速简便，成功率高，涂层柱之间重现性良好。关键词 毛细管电泳，涂层柱，聚乙烯亚胺，蛋白质，电渗流
1 引言
蛋白质、核酸等生物大分子，尤其是带正电的碱性蛋白质，很容易在电泳过程中吸附于石英毛细管内壁，导致峰变形、柱效低、重现性差、甚至分离失败等一系列问题。在毛细管内壁吸附或键合亲水性涂层是防止吸附的好办法[1,2]。通常，物理吸附型的涂层柱制备方法简单，但不稳定，需要不断进行涂层更新或在缓冲溶液中加入少量涂层试剂以防止涂层脱落[3]。化学键合型的涂层柱稳定性较好，但是制备繁琐、影响因素多[4,5]，且柱内反应很容易造成毛细管堵塞，一定程度上增加了制备涂层柱的成本。本研究结合吸附型和键合型两种涂层柱制柱的方法，建立了一种快速简便的毛细管涂层柱制备方法。研究结果表明:用该方法制得的涂层毛细管柱性能稳定，能有效抑制电渗流，实现生理条件下对碱性蛋白质的分离，且重现性良好。
2 实验部分
2.1 仪器与试剂
P/ACE 2050型毛细管电泳仪，配备有紫外检测器和P/ACE 数据采集工作站(美国Beckman公司)。50 μm i.d.，375 μm o.d.未涂层石英毛细管(河北永年锐沣色谱器件有限公司) ......
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