辨析遗传性疾病动物模型的中医证候属性——建立病证结合理想模型的新思路
合适的动物模型是中医药研究获得突破性进展的关键。经过长期的探索，目前普遍认为病证结合动物模型是适合中医药研究的模型。理想的病证结合动物模型的病理生理特征和证候属性都应是稳定的、均一的，并且可以明确辨析其所表现的证候属性，同蹦P捅旧碛Ω镁哂泄使闲浴；诖死嗄P屠刺剿鞅嬷ぢ?br>治、方证相应等中医理论的科学内涵，进行临床有效方剂的疗效评价及作用机理的研究，所得研究结果能够真正反映中医药的特色，也会得到国际认可，从而推动中医药的现代化和国际化。
目前建立“病证结合动物模型”的主要方法是通过施加不同的证候因素，在疾病模型基础上叠加证候。采用这种方法已研制了多种病证结合动物模型，如溃疡病脾虚证模型、肾阴虚型高血压模型、脾阳虚型腹水型肝癌模型等。但是，由于不同致病因素所导致的同一疾病可能出现不同的中医证候；同种致病因素所致疾病，在不同阶段，也可表现出不同的证候；同时，由于证候造模因素本身可控性差，使得这些病证结合动物模型不稳定、不均一，使之难以推广应用，更谈不上得到国际认可。因此，目前按此思路获得符合要求的病证结合动物模型，仍然是困难的，需要探讨建立病证结合动物模型的新思路和新方法。
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■动物模型同样具有证候属性
从临床上来看，不同致病因素所导致的同种疾病，可能会出现不同的中医证候；同种致病因素所致疾病，在不同的阶段，也可表现出不同的证候属性。由此进行推论：与临床患者一样，现代医学所建立的疾病动物模型也应该具有相应的中医证候属性，而且在疾病的进展过程中，中医证候属性是有变化的，根据动物所表现出的宏观表征，以及与临床上有关联的客观检测指标，可以对疾病动物模型的中医证候进行辨析。而实践中也发现了某些现代医学疾病模型本身确实表现出相应的证候属性，比如用弗氏佐剂所建立的风湿性关节炎模型，本身所表现出的红、肿、热、痛等症状特点，按照中医辨证当属于“热痹证”。
现代医学研究中已经成⒘硕嘀旨膊《锬P停床蚍掷啵煞?br>为自发性动物模型和诱发性或实验性动物模型。自发性动物模型是指实验动物未经任何有意识的人工处置，在自然情况下所发生的疾病。如高血压大鼠、无胸腺裸鼠、肌肉萎缩症小鼠、肥胖症小鼠、癫痫大鼠、无脾小鼠和青光眼兔等。很多自发性动物模型在研究人类疾病时具有重要的价值，如自发性高血压大鼠、中国地鼠的自发性真性糖尿病、小鼠的各种自发性肿瘤、山羊的家族性甲状腺肿等。诱发性或实验性动物模型是指研究者通过使用物理的、化学的和生物的致病因素作用于动物，造成动物组织、器官或全身一定的损害，出现某些类似人类疾病时的功能、代谢障碍使动物患相应的疾病，如用化学致癌剂、放射线、致癌病毒诱发动物的肿瘤等。
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相对于诱发模型，自发性遗传性疾病模型与人类疾病具有更好的相似性，因其制备或复制方法主要通过自然繁殖，不需人为附加的外界致病因素，所以其模型重复性、可靠性更强，此类模型的复制过程具有很好的可控性和简单易行性，是国际上公认的最理想的动物模型。如自发性高血压大鼠的血压是通过生物遗传和变异特性自然发展而成的，无需人为诱发因素，所获得模型成功率高，病理生理学特征稳定、均一。而作为诱发模型的肾性高血压大鼠，需通过手术减少肾脏血流来制备。由于术中操作过程复杂，术后动物需特殊护理，造模成本高，成功率低，且血压升高的均一性差，相应病理生理学特征的稳定性、均一性也难以控制。因此，自发性动物模型更为适合证候属性研究。而且，目前对自发性动物模型病理生理的研究较为深入，为动物模型的证候属性辨析奠定了基础。
■动物模型的证候属性可辨析
研究证明，将临床定性乃恼锬谌荩】赡艿卮远炕虬攵康耐纫庖?br>的观察和测试指标，采用相应的物理、化学的手段，完全可以辨析动物模型的证候属性。如临床肝火亢盛型高血压，其诊断标准为“眩晕，头痛，面红目赤，口苦，烦躁，便秘，尿赤，舌红，苔黄，脉弦等”，在观察动物模型时我们可代以观察宏观表征与行为学指标，如一般行为、饮水量、饮食、大便状况、毛发色泽、生长速度、体温、体重、舌象、眼球突出度、眼睛色度、唾液pH值、尿量及pH值、血压、大鼠的易激惹程度、痛阈、旋转时间等，并建立相应的观察和测定方法。如易激惹程度：Ⅰ级:捉持颈部时尖叫、惊跳；Ⅱ级:捉持颈部时激怒欲咬人；Ⅲ级:提尾部时即尖叫、惊跳，甚至欲咬人或同笼大鼠频繁打斗，频咬铁笼；上述情况不明显者为0级，每周观察1次。唾液及尿液pH值：以pH精密试纸测量大鼠唾液及尿液pH值，每周观察1次。痛阈：将大鼠用合适的网笼固定，露出尾部，将尾部末端5厘米放入49℃恒温水浴因疼痛而抬起的时间，每周1次。眩晕：将大鼠置于直径25厘米的旋转平台上，以35转/秒的速度旋转，记录大鼠跌下时间，并观察跌落后状态。如果转动2分钟后仍不跌下，则停止实验，每周观察1次。
另外，在采用上述评价手段的同时还可与实验室检测指标相结合，如靶器官损伤程度、血液流变学指标(包括全血比黏度之低切浓度、红细胞聚集指数、红细胞压积等)、生化指标(如氧化酶法测定血液中的甘油三酯、总胆固醇，直接测定法测定高密度脂蛋白等)，最终辨析不同的进展阶段自发性高血压大鼠的证候属性。
综上所述，通过辨析遗传性疾病动物模型的中医证候属性，建立“病”与“证”皆稳定、均一、可复制的病证结合动物模型，将开拓中医药动物模型研究的新思路、新方法。
□赵琰 屈会化 王庆国, http://www.100md.com(赵琰；屈会化；王庆国)
目前建立“病证结合动物模型”的主要方法是通过施加不同的证候因素，在疾病模型基础上叠加证候。采用这种方法已研制了多种病证结合动物模型，如溃疡病脾虚证模型、肾阴虚型高血压模型、脾阳虚型腹水型肝癌模型等。但是，由于不同致病因素所导致的同一疾病可能出现不同的中医证候；同种致病因素所致疾病，在不同阶段，也可表现出不同的证候；同时，由于证候造模因素本身可控性差，使得这些病证结合动物模型不稳定、不均一，使之难以推广应用，更谈不上得到国际认可。因此，目前按此思路获得符合要求的病证结合动物模型，仍然是困难的，需要探讨建立病证结合动物模型的新思路和新方法。
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■动物模型同样具有证候属性
从临床上来看，不同致病因素所导致的同种疾病，可能会出现不同的中医证候；同种致病因素所致疾病，在不同的阶段，也可表现出不同的证候属性。由此进行推论：与临床患者一样，现代医学所建立的疾病动物模型也应该具有相应的中医证候属性，而且在疾病的进展过程中，中医证候属性是有变化的，根据动物所表现出的宏观表征，以及与临床上有关联的客观检测指标，可以对疾病动物模型的中医证候进行辨析。而实践中也发现了某些现代医学疾病模型本身确实表现出相应的证候属性，比如用弗氏佐剂所建立的风湿性关节炎模型，本身所表现出的红、肿、热、痛等症状特点，按照中医辨证当属于“热痹证”。
现代医学研究中已经成⒘硕嘀旨膊《锬P停床蚍掷啵煞?br>为自发性动物模型和诱发性或实验性动物模型。自发性动物模型是指实验动物未经任何有意识的人工处置，在自然情况下所发生的疾病。如高血压大鼠、无胸腺裸鼠、肌肉萎缩症小鼠、肥胖症小鼠、癫痫大鼠、无脾小鼠和青光眼兔等。很多自发性动物模型在研究人类疾病时具有重要的价值，如自发性高血压大鼠、中国地鼠的自发性真性糖尿病、小鼠的各种自发性肿瘤、山羊的家族性甲状腺肿等。诱发性或实验性动物模型是指研究者通过使用物理的、化学的和生物的致病因素作用于动物，造成动物组织、器官或全身一定的损害，出现某些类似人类疾病时的功能、代谢障碍使动物患相应的疾病，如用化学致癌剂、放射线、致癌病毒诱发动物的肿瘤等。
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相对于诱发模型，自发性遗传性疾病模型与人类疾病具有更好的相似性，因其制备或复制方法主要通过自然繁殖，不需人为附加的外界致病因素，所以其模型重复性、可靠性更强，此类模型的复制过程具有很好的可控性和简单易行性，是国际上公认的最理想的动物模型。如自发性高血压大鼠的血压是通过生物遗传和变异特性自然发展而成的，无需人为诱发因素，所获得模型成功率高，病理生理学特征稳定、均一。而作为诱发模型的肾性高血压大鼠，需通过手术减少肾脏血流来制备。由于术中操作过程复杂，术后动物需特殊护理，造模成本高，成功率低，且血压升高的均一性差，相应病理生理学特征的稳定性、均一性也难以控制。因此，自发性动物模型更为适合证候属性研究。而且，目前对自发性动物模型病理生理的研究较为深入，为动物模型的证候属性辨析奠定了基础。
■动物模型的证候属性可辨析
研究证明，将临床定性乃恼锬谌荩】赡艿卮远炕虬攵康耐纫庖?br>的观察和测试指标，采用相应的物理、化学的手段，完全可以辨析动物模型的证候属性。如临床肝火亢盛型高血压，其诊断标准为“眩晕，头痛，面红目赤，口苦，烦躁，便秘，尿赤，舌红，苔黄，脉弦等”，在观察动物模型时我们可代以观察宏观表征与行为学指标，如一般行为、饮水量、饮食、大便状况、毛发色泽、生长速度、体温、体重、舌象、眼球突出度、眼睛色度、唾液pH值、尿量及pH值、血压、大鼠的易激惹程度、痛阈、旋转时间等，并建立相应的观察和测定方法。如易激惹程度：Ⅰ级:捉持颈部时尖叫、惊跳；Ⅱ级:捉持颈部时激怒欲咬人；Ⅲ级:提尾部时即尖叫、惊跳，甚至欲咬人或同笼大鼠频繁打斗，频咬铁笼；上述情况不明显者为0级，每周观察1次。唾液及尿液pH值：以pH精密试纸测量大鼠唾液及尿液pH值，每周观察1次。痛阈：将大鼠用合适的网笼固定，露出尾部，将尾部末端5厘米放入49℃恒温水浴因疼痛而抬起的时间，每周1次。眩晕：将大鼠置于直径25厘米的旋转平台上，以35转/秒的速度旋转，记录大鼠跌下时间，并观察跌落后状态。如果转动2分钟后仍不跌下，则停止实验，每周观察1次。
另外，在采用上述评价手段的同时还可与实验室检测指标相结合，如靶器官损伤程度、血液流变学指标(包括全血比黏度之低切浓度、红细胞聚集指数、红细胞压积等)、生化指标(如氧化酶法测定血液中的甘油三酯、总胆固醇，直接测定法测定高密度脂蛋白等)，最终辨析不同的进展阶段自发性高血压大鼠的证候属性。
综上所述，通过辨析遗传性疾病动物模型的中医证候属性，建立“病”与“证”皆稳定、均一、可复制的病证结合动物模型，将开拓中医药动物模型研究的新思路、新方法。
□赵琰 屈会化 王庆国, http://www.100md.com(赵琰；屈会化；王庆国)