1354例门诊腹泻病人人芽囊原虫感染情况调查
摘要:目的 了解消化门诊腹泻就诊者中人芽囊原虫感染情况及其特征。 方法 询问腹泻患者的病史、卫生习惯及生活环境等状况。收集患者当日新鲜大便，用生理盐水直接涂片和碘液染色镜检初筛后，将疑似阳性的标本制片及三色染色法染色，在油镜下观察形态并测量大小。 结果 共查粪便1354份，人芽囊原虫检出率为18.54%，男女腹泻者检出率分别为18.12%和19.18%，差异无显著性(P>0.05)。在人芽囊原虫混合其他寄生虫感染中，以肝吸虫占绝大多数(73.08%)。粪检所见的原虫以空泡型为主，感染高峰在夏秋季节，高发年龄是21～50岁。 结论 广西地区人芽囊原虫是引起腹泻的常见肠道寄生虫，其致病作用不容忽视。感染后可引发腹痛、腹泻等消化道症状。人芽囊原虫混合肝吸虫感染为广西地区人芽囊原虫感染的一个显著特点。
关键词:人芽囊原虫;寄生虫病;感染;腹泻
Investigation of infectious status of Blastocystis hominis in1354outpatients.
JINQun-xin，YUKai-min，TANG Lian-feng，et al.
(Petic Internal Department of the First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University，Nanning530021，Gaungxi，P.R.China)
Abstract:Objective To investigate infectious status of Blastocystis hominis in outpatients in the Peptic Internal Department of the First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University and its characteristics. Methods The diarrheic history，including pre-sent past of illness，individual hygienic habits，sanitary condition of living environment，et al.were surveyed.Fresh stools was col-lected from diarrhea patients with sanitary boxes and examined with direct wet-mount and iodine staining methods.The suspected specimens examined under oil-immersed microscope for observation of the morphology and size of t Blastocystis hominis after fixed and trichromatically stained. Results Totally1354fetal specimens were examined the positive rate of Blastocystis hominis was18.54%.The infection rates in female and males were18.12%and19.18%，respectively，showing no significant difference be-tween two sexes(P>0.05).mixed infection with other parasites were also observed and73.8%co-infected with liver fluke).Vacuolar forms were the most common in the fetal specimens.Infective peaks were in summer and autumn and high infection occurred to the age group of21～50years. Conclusion Blastocystis hominis is the principal intestinal parasite resulting in diarrhea in GuangXi and responsible for intermittent abdominal pain，diarrhea and other gastrointestinal symptoms in the patients.Mixed infection of Blastocystis hominiswith liver fluke is a marked characteristic in Guangxi Region.
Key words:Blastocystis hominis;Diarrhea;Survey
人芽囊原虫病是由人芽囊原虫(Blastocystis hominis)寄生于高等灵长类和人类肠道内所引起的一种人兽共患寄生虫病 [1，2] 。近年来广西地区不明原因腹泻不断增多，为查明引起不明原因腹泻的病原体，2004年2月～2005年2月我们对广西医科大学第一附属医院消化内科人芽囊原虫感染情况进行了初步调查，现报告如下。
1 对象和方法
1.1 对象 均为2004～2005年广西各地在广西医科大学第一附属医院消化内科门诊就诊患者因不明原因腹泻者1354人，年龄1.5～80岁。受检者中以慢性腹泻者为重点检查对象。
1.2 方法 询问腹泻病史包括现病史、既往病史、个人卫生习惯及生活环境卫生状况等。用一次性粪盒 收集患者新鲜腹泻粪便(稀便、粘液脓血便及水样便)2～3g，取少量在洁净玻片上涂制成直径为1.5cm×1.5cm半透明膜，先直接镜检生理盐水涂片中人芽囊原虫，疑似阳性的标本再分别采用碘液染色法、三色染色法染色。先在低倍镜下观察，发现可疑虫体后转高倍镜下辨认，在油镜下测量大小并观察形态特征。同时观察其他肠道寄生虫混合感染情况。
2 结果
2.1 粪检结果 在1354份粪便中，查见人芽囊原虫251份，感染率为18.54%。单纯人芽囊原虫感染者171/251例(68.13%);合并其它寄生虫感染者80/251例(31.87%)见表1。
2.2 人芽囊原虫形态特点 生理盐水涂片法和碘液染色法在油镜下观察时，以空泡型和颗粒型多见，有时可见包囊，但以空泡型最多。测量120个虫体直径为4.5～29.10μm，平均13.2μm。碘液染色中空泡型呈球型，单独或成堆出现，虫体内的中心体染成棕色。细胞质淡棕褐色，呈环状或月牙状，围绕中心体。颗粒型呈球型或卵圆形，着色较空泡型稍深，可见具有折光性的细颗粒。包囊型呈球形，黄色或棕黄色。三色染色法时，可见虫体体壁厚，具折光性，以空泡型为多，可见颗粒性，偶见阿米巴型。空泡型虫体中央有一着色浅淡的泡状结构，即空泡。胞浆浓染呈绿色新月状于虫体细胞膜和空泡膜之间。细胞核与核外染色棒呈红色。颗粒型可见其内部有数目不等、大小不均、具较强折光性呈亮绿色和玫瑰红色的颗粒。偶见阿米巴形，虫体表现为伸出似伪足的形态。
表1 广西地区人芽囊原虫合并其它原虫和蠕虫感染情况(略)
2.3 人芽囊原虫感染者的临床症状 251例人芽囊原虫感染者的临床症状主要表现:长期或短期的间歇性腹痛和腹泻，病史最长达十余年，最短有数天。绝大多数患者的粪便均有白色粘液。在173例单纯人芽囊原虫感染者中，18例有腹痛，大便硬结带白色粘液。
16例仅表现为腹痛、腹胀，大便无明显改变。其余139例均有不同程度的腹泻、腹痛，大便2次/d以上，102例为稀软便，糊状变，绝大数带有白色粘液，15例为水样便，12例为粘液脓血便，有其他寄生虫合并感染的78例，均有间歇性的腹痛、腹泻，稀软便、水样便和粘液脓血便。少数患者伴有乏力、消瘦、发热、恶心等症状。1例合并过敏性紫癜，主要表现为腹痛、关节疼痛和皮肤紫癜。
2.4 流行情况调查 此次调查1354人，男、女感染率分别为18.12%(148/817)和19.18%(103/537)，两者间差异无显著性(χ 2 =0.24，P>0.05)。感染者的年龄、发病季节的特点如下(见表2，3)。在感染者中以青壮年居多，发病率最高的是21～50岁(181/251例，72.11%)，而10岁以下儿童和60以上人群发病较少(24/251例，9.56%)。人芽囊原虫病在夏秋季发病率高(165/251例，65.74%)。感染者中有农民、干部、工人和学生，其中大部分有饮生水史或者长期在外面进食史，部分感染者曾经或正在饲养牛、猪、狗和猫等。混合肝吸虫感染的患者均有进食生鱼片史。
表2 251例门诊人芽囊原虫感染者的年龄分布(略)
表3 251例门诊人芽囊原虫感染者的季节分布(略)
3 讨论
近年研究表明人芽囊原虫是一种广泛寄生于人体和灵长类动物肠道内的致病性寄生虫，是引起腹泻等消化道症状的病原之一。国内外学者对人芽囊原虫感染的流行情况进行调查，发现西安、广州、福州、江西(崇义县)、尼泊尔、温哥华、纽约检出率分别为11.25%、16.02%、8.50%、2.39%、17.02%、3.20%和11.05%，人芽囊原虫呈全球性分布，各地感染率随受检人群的年龄、职业构成、当地气候、地理环境和卫生条件、饮食习惯、营养状况以及检验季节、方法的不同而有所差异 [3] 。美国2000年在48个州和地区对腹泻患者寄生虫感染情况显示人芽囊原虫感染率为23%，占所有肠道寄生虫感染的首位，高达72% [4] 。本结果显示，广西地区腹泻患者人芽囊原虫阳性率达18.54%，说明本地腹泻患者中人芽囊原虫的感染并非罕见，只是由于其感染早期无症状或症状轻微，患者疏于就诊，同时由于人芽囊原虫感染后缺乏特异的临床症状，易与肠道一般感染相混淆，导致漏诊或误诊。本组对不同性别检出率进行比较，发现男、女腹泻患者人芽囊原虫的检出率相近，差别无显著性意义。可能与本地人群饮食习惯相同有关。从年龄分布来看，本病好发年龄在21～50岁，而幼儿和老年人发病较少。在广西地区一年中均有病例出现，但高峰集中在夏秋季节的8月～10月份，同期亦为消化道感染性疾病的高发季节，这与空气的温湿度及人消化道的抵抗力等有关。结果与国内外的报道相一致 [4，5] 。人芽囊原虫混合其他寄生虫感染常见，占所有感染者的31.87%，其中最常见的为合并肝吸虫的感染，这与本地区喜欢进食生鱼片的饮食习惯密切相关。当进食人芽囊原虫感染的食物后，易致人芽囊原虫病的发生。这是本地区人芽囊原虫感染的特点之一，也是与其他地区的不同之处。。本次实验室检查取粪便标本用生理盐水涂片和碘液染色观察活虫体。固定标本用美国疾病控制中心近年来推荐使用的肠道原虫三色染色法进行鉴定。发现腹泻粪便中的人芽囊原虫大部分为空泡型，颗粒型多见，而阿米巴型偶见。与国内外其它调查者的观察结果相一致 [6，8] 。空泡型是人芽囊原虫最常见、最典型的形态，常作为人芽囊原虫感染的经典标准形态。在成形粪便中检出的人芽囊原虫多为空泡型和颗粒型，而在稀便中可见阿米巴型虫体 [9] 。生理盐水涂片法观察活虫体方便、快捷。碘液染色后，使虫体显现较清晰而便于识别，但两种方法均可能出现假阳性。对疑似病例行固定标本三色染色法进一步鉴定，可避免假阳性及减少假阴性的出现。为提高临床检出率，上述几种方法可酌情配合选用。
调查结果表明在广西地区人芽囊原虫是引起腹泻的常见肠道寄生虫，其致病作用不容忽视。
参考文献:
[1] Vdovenko AA，Williams JE.Blastocystis hominis:neutral red supravital staining and its application to in vitro drug sensitivity testing[J].Parasitol Res，2000，86(79):573～581.
[2]Kaneda Y，Horiki N，Cheng XJ，Fajita Y，Maruyamam，Tachibana H.Ri-bodemes of Blastocystis hominis isolated in Japan[J].Am J Trop Med Hyg，2001，65(4):393～396.
[3]李朝品，王健.淮南地区人芽囊原虫感染的流行病学调查[J].第四军医大学学报，2002，23(16):1480～1482.
[4]Amin OM.Seasonal prevalence of intestinal parasites in the United States during2000[J].Am J Trop Med Hyg，2002，66(6):799～803.
[5]答嵘，乔继英，等.人芽囊原虫在腹泻患者中的感染状况及繁殖方式[J].中国寄生虫病防治杂志，2004，17(1):9～12.
[6]吴国宏，熊以树，曹高禄，等.一起人芽囊原虫病暴发流行的调查研究[J].中国寄生虫病防治杂志，2000，13(1):25～27.
[7]旭，乔继英，等.人芽囊原虫的形态观察及与腹泻的关系[J].西安医科大学学报，2001，22(6):6.
[8]何妮，张月清，等.人芽囊原虫的形态与超微结构[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志，2001，19(3):169～172.
[9]田春林，刘登宇，卢作超，等.人芽囊原虫粪便检查与形态观察[J].中国热带医学，2005，5(2):221～222., 百拇医药(金群馨，俞开敏，唐连凤，田春林，卢作超)
关键词:人芽囊原虫;寄生虫病;感染;腹泻
Investigation of infectious status of Blastocystis hominis in1354outpatients.
JINQun-xin，YUKai-min，TANG Lian-feng，et al.
(Petic Internal Department of the First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University，Nanning530021，Gaungxi，P.R.China)
Abstract:Objective To investigate infectious status of Blastocystis hominis in outpatients in the Peptic Internal Department of the First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University and its characteristics. Methods The diarrheic history，including pre-sent past of illness，individual hygienic habits，sanitary condition of living environment，et al.were surveyed.Fresh stools was col-lected from diarrhea patients with sanitary boxes and examined with direct wet-mount and iodine staining methods.The suspected specimens examined under oil-immersed microscope for observation of the morphology and size of t Blastocystis hominis after fixed and trichromatically stained. Results Totally1354fetal specimens were examined the positive rate of Blastocystis hominis was18.54%.The infection rates in female and males were18.12%and19.18%，respectively，showing no significant difference be-tween two sexes(P>0.05).mixed infection with other parasites were also observed and73.8%co-infected with liver fluke).Vacuolar forms were the most common in the fetal specimens.Infective peaks were in summer and autumn and high infection occurred to the age group of21～50years. Conclusion Blastocystis hominis is the principal intestinal parasite resulting in diarrhea in GuangXi and responsible for intermittent abdominal pain，diarrhea and other gastrointestinal symptoms in the patients.Mixed infection of Blastocystis hominiswith liver fluke is a marked characteristic in Guangxi Region.
Key words:Blastocystis hominis;Diarrhea;Survey
人芽囊原虫病是由人芽囊原虫(Blastocystis hominis)寄生于高等灵长类和人类肠道内所引起的一种人兽共患寄生虫病 [1，2] 。近年来广西地区不明原因腹泻不断增多，为查明引起不明原因腹泻的病原体，2004年2月～2005年2月我们对广西医科大学第一附属医院消化内科人芽囊原虫感染情况进行了初步调查，现报告如下。
1 对象和方法
1.1 对象 均为2004～2005年广西各地在广西医科大学第一附属医院消化内科门诊就诊患者因不明原因腹泻者1354人，年龄1.5～80岁。受检者中以慢性腹泻者为重点检查对象。
1.2 方法 询问腹泻病史包括现病史、既往病史、个人卫生习惯及生活环境卫生状况等。用一次性粪盒 收集患者新鲜腹泻粪便(稀便、粘液脓血便及水样便)2～3g，取少量在洁净玻片上涂制成直径为1.5cm×1.5cm半透明膜，先直接镜检生理盐水涂片中人芽囊原虫，疑似阳性的标本再分别采用碘液染色法、三色染色法染色。先在低倍镜下观察，发现可疑虫体后转高倍镜下辨认，在油镜下测量大小并观察形态特征。同时观察其他肠道寄生虫混合感染情况。
2 结果
2.1 粪检结果 在1354份粪便中，查见人芽囊原虫251份，感染率为18.54%。单纯人芽囊原虫感染者171/251例(68.13%);合并其它寄生虫感染者80/251例(31.87%)见表1。
2.2 人芽囊原虫形态特点 生理盐水涂片法和碘液染色法在油镜下观察时，以空泡型和颗粒型多见，有时可见包囊，但以空泡型最多。测量120个虫体直径为4.5～29.10μm，平均13.2μm。碘液染色中空泡型呈球型，单独或成堆出现，虫体内的中心体染成棕色。细胞质淡棕褐色，呈环状或月牙状，围绕中心体。颗粒型呈球型或卵圆形，着色较空泡型稍深，可见具有折光性的细颗粒。包囊型呈球形，黄色或棕黄色。三色染色法时，可见虫体体壁厚，具折光性，以空泡型为多，可见颗粒性，偶见阿米巴型。空泡型虫体中央有一着色浅淡的泡状结构，即空泡。胞浆浓染呈绿色新月状于虫体细胞膜和空泡膜之间。细胞核与核外染色棒呈红色。颗粒型可见其内部有数目不等、大小不均、具较强折光性呈亮绿色和玫瑰红色的颗粒。偶见阿米巴形，虫体表现为伸出似伪足的形态。
表1 广西地区人芽囊原虫合并其它原虫和蠕虫感染情况(略)
2.3 人芽囊原虫感染者的临床症状 251例人芽囊原虫感染者的临床症状主要表现:长期或短期的间歇性腹痛和腹泻，病史最长达十余年，最短有数天。绝大多数患者的粪便均有白色粘液。在173例单纯人芽囊原虫感染者中，18例有腹痛，大便硬结带白色粘液。
16例仅表现为腹痛、腹胀，大便无明显改变。其余139例均有不同程度的腹泻、腹痛，大便2次/d以上，102例为稀软便，糊状变，绝大数带有白色粘液，15例为水样便，12例为粘液脓血便，有其他寄生虫合并感染的78例，均有间歇性的腹痛、腹泻，稀软便、水样便和粘液脓血便。少数患者伴有乏力、消瘦、发热、恶心等症状。1例合并过敏性紫癜，主要表现为腹痛、关节疼痛和皮肤紫癜。
2.4 流行情况调查 此次调查1354人，男、女感染率分别为18.12%(148/817)和19.18%(103/537)，两者间差异无显著性(χ 2 =0.24，P>0.05)。感染者的年龄、发病季节的特点如下(见表2，3)。在感染者中以青壮年居多，发病率最高的是21～50岁(181/251例，72.11%)，而10岁以下儿童和60以上人群发病较少(24/251例，9.56%)。人芽囊原虫病在夏秋季发病率高(165/251例，65.74%)。感染者中有农民、干部、工人和学生，其中大部分有饮生水史或者长期在外面进食史，部分感染者曾经或正在饲养牛、猪、狗和猫等。混合肝吸虫感染的患者均有进食生鱼片史。
表2 251例门诊人芽囊原虫感染者的年龄分布(略)
表3 251例门诊人芽囊原虫感染者的季节分布(略)
3 讨论
近年研究表明人芽囊原虫是一种广泛寄生于人体和灵长类动物肠道内的致病性寄生虫，是引起腹泻等消化道症状的病原之一。国内外学者对人芽囊原虫感染的流行情况进行调查，发现西安、广州、福州、江西(崇义县)、尼泊尔、温哥华、纽约检出率分别为11.25%、16.02%、8.50%、2.39%、17.02%、3.20%和11.05%，人芽囊原虫呈全球性分布，各地感染率随受检人群的年龄、职业构成、当地气候、地理环境和卫生条件、饮食习惯、营养状况以及检验季节、方法的不同而有所差异 [3] 。美国2000年在48个州和地区对腹泻患者寄生虫感染情况显示人芽囊原虫感染率为23%，占所有肠道寄生虫感染的首位，高达72% [4] 。本结果显示，广西地区腹泻患者人芽囊原虫阳性率达18.54%，说明本地腹泻患者中人芽囊原虫的感染并非罕见，只是由于其感染早期无症状或症状轻微，患者疏于就诊，同时由于人芽囊原虫感染后缺乏特异的临床症状，易与肠道一般感染相混淆，导致漏诊或误诊。本组对不同性别检出率进行比较，发现男、女腹泻患者人芽囊原虫的检出率相近，差别无显著性意义。可能与本地人群饮食习惯相同有关。从年龄分布来看，本病好发年龄在21～50岁，而幼儿和老年人发病较少。在广西地区一年中均有病例出现，但高峰集中在夏秋季节的8月～10月份，同期亦为消化道感染性疾病的高发季节，这与空气的温湿度及人消化道的抵抗力等有关。结果与国内外的报道相一致 [4，5] 。人芽囊原虫混合其他寄生虫感染常见，占所有感染者的31.87%，其中最常见的为合并肝吸虫的感染，这与本地区喜欢进食生鱼片的饮食习惯密切相关。当进食人芽囊原虫感染的食物后，易致人芽囊原虫病的发生。这是本地区人芽囊原虫感染的特点之一，也是与其他地区的不同之处。。本次实验室检查取粪便标本用生理盐水涂片和碘液染色观察活虫体。固定标本用美国疾病控制中心近年来推荐使用的肠道原虫三色染色法进行鉴定。发现腹泻粪便中的人芽囊原虫大部分为空泡型，颗粒型多见，而阿米巴型偶见。与国内外其它调查者的观察结果相一致 [6，8] 。空泡型是人芽囊原虫最常见、最典型的形态，常作为人芽囊原虫感染的经典标准形态。在成形粪便中检出的人芽囊原虫多为空泡型和颗粒型，而在稀便中可见阿米巴型虫体 [9] 。生理盐水涂片法观察活虫体方便、快捷。碘液染色后，使虫体显现较清晰而便于识别，但两种方法均可能出现假阳性。对疑似病例行固定标本三色染色法进一步鉴定，可避免假阳性及减少假阴性的出现。为提高临床检出率，上述几种方法可酌情配合选用。
调查结果表明在广西地区人芽囊原虫是引起腹泻的常见肠道寄生虫，其致病作用不容忽视。
参考文献:
[1] Vdovenko AA，Williams JE.Blastocystis hominis:neutral red supravital staining and its application to in vitro drug sensitivity testing[J].Parasitol Res，2000，86(79):573～581.
[2]Kaneda Y，Horiki N，Cheng XJ，Fajita Y，Maruyamam，Tachibana H.Ri-bodemes of Blastocystis hominis isolated in Japan[J].Am J Trop Med Hyg，2001，65(4):393～396.
[3]李朝品，王健.淮南地区人芽囊原虫感染的流行病学调查[J].第四军医大学学报，2002，23(16):1480～1482.
[4]Amin OM.Seasonal prevalence of intestinal parasites in the United States during2000[J].Am J Trop Med Hyg，2002，66(6):799～803.
[5]答嵘，乔继英，等.人芽囊原虫在腹泻患者中的感染状况及繁殖方式[J].中国寄生虫病防治杂志，2004，17(1):9～12.
[6]吴国宏，熊以树，曹高禄，等.一起人芽囊原虫病暴发流行的调查研究[J].中国寄生虫病防治杂志，2000，13(1):25～27.
[7]旭，乔继英，等.人芽囊原虫的形态观察及与腹泻的关系[J].西安医科大学学报，2001，22(6):6.
[8]何妮，张月清，等.人芽囊原虫的形态与超微结构[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志，2001，19(3):169～172.
[9]田春林，刘登宇，卢作超，等.人芽囊原虫粪便检查与形态观察[J].中国热带医学，2005，5(2):221～222., 百拇医药(金群馨，俞开敏，唐连凤，田春林，卢作超)