[摘要]目的 优化获取兔骨髓间充质干细胞并对其进行纯化、鉴定，同时对其生物学性状进行研究。方法取新生新西兰大耳白兔骨髓5.0 mL，采用密度梯度离心法、贴壁筛选法并结合传代对其进行纯化，观察细胞形态、超微结构和表面标志物的表达，从而对其进行鉴定。观察第1、3、5、8、10代细胞的增殖情况，并绘制出生长曲线。结果 经密度梯度离心、贴壁筛选并结合传代所得到的间充质干细胞很纯，第3代和第5代细胞形态单一，细胞排列具有典型的漩涡状结构。第1、3、5代细胞增殖能力强，生长旺盛;而第8、10代细胞增殖明显减弱。所分离培养的细胞表达CD44、CD90，不表达CD34，电镜观察为低分化细胞。结论 分离培养的细胞为间充质干细胞且成分单一，具有干细胞特性，第3、5代细胞很纯且其增殖能力强，适用于做以后的研究。

    [关键词] 骨髓间充质干细胞;兔;离心法，梯密度; 细胞培养技术

    APPROACHES TO ISOLATE， CULTURE AND IDENTIFY THE BONE MARROW-DERIVED MESENCHYMAL STEM CELLS OF RABBITS

    YE FA-GANG， XIA CHANG-SUO， ZHANG WEI-BING， et al

    (Department of Orthopaedics， Tongji Hospital， Tongji Medical College， Huazhong University of Science and Technology， Wuhan 430030， China)

    [ABSTRACT]ObjectiveTo explore the approaches to isolate，culture and identify the bone marrow-derived mesenchymal stem cells (BM-MSCs) of rabbits. MethodsBM-MSCs were isolated from the bone marrow (5.0 mL) of the newborn rabbit via density gradient centrifugation. Light and electron microscopy were used to study the morphologic features and immunocytochemis-try to examine the expression of cell surface antigens. The growth curve of cell proliferation was obtained based on the observation of the proliferation status of 1st ......