超声波法从黄苓中提取黄苓苷的正交试验设计
黄苓(Scutellaria baicalensis Georgi)为唇形科植物黄苓的干燥根，具有清热燥湿，泻火解毒的作用。其主要成份有黄苓苷、黄苓素、汉黄苓苷、汉黄苓素等，其中黄苓苷是主要有效成份[1]。传统的提取方法有温浸法、煎煮法、加热回流法、索氏法等。超声波提取法是一种新发展起来的技术，与传统方法相比较，具有设备简单、提取时间短、提取效率高等特点。本实验利用超声波法设置了L9(34)正交试验，以黄苓苷的含量为指标，寻求超声提取的最佳工艺条件。
1 仪器与试药
V530型紫外分光光度计，AS5150A型超声波振荡器，普利赛斯92SM202A型电子分析天平。黄苓苷对照品(批号：0715200111，中国药品生物制品检定所)。黄苓为市售药材，经本所中药室鉴定。乙醇、氢氧化钠均为分析纯，水为蒸馏水。
2 方法与结果
21 原料的预处理将黄苓净选，切制，按厚度分为：1~2mm、0.6~0.9mm、小于0.5mm，干燥后分装样品袋中，备用。
22 黄苓苷的含量测定方法
221 测定波长的选择 精密称取黄苓苷对照品适量，用50%的乙醇溶液配制成约15μg/ml的溶液，以50%的乙醇为空白，用V530型紫外分光光度计，在200~350nm的波长范围内扫描，在278nm波长处有最大吸收。
222 标准曲线的绘制 精密称取60℃减压干燥恒重的黄苓苷对照品18mg于50ml量瓶中，加50%乙醇溶解至刻度。精密量取上述标准液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml分别置50ml量瓶中，加50%乙醇稀释至刻度，摇匀，在278nm波长处测吸光度，由吸光度(A)对溶液浓度(C)作线性回归，回归方程(n=5)为：A=0.0294+0.0591C Γ=0.9999表明黄苓苷在7.2~36μg范围内线性关系良好。
223 黄苓苷样品溶液的制备和测定 精密称取黄苓样品1.0g，加50倍量的溶剂浸泡0.5小时后，放入振荡器中(频率40KHZ)。根据正交试验表选择一定的提取时间和温度进行超声处理后，过滤，补足滤液至50ml。精密量取上述滤液1ml至100ml量瓶中，加50%的乙醇稀释至刻度，摇匀。在278nm波长处测吸光度(A)，由回归方程计算出黄苓苷的对应浓度(C)。按X=0.5C对计算出黄苓苷的含量X%。
23 L9(34)正交试验取本品样品约1.0g，精密称定。采用正交试验法，以黄苓苷含量为参考指标，考察黄苓饮片厚度，提取时间和提取温度3个因素。试验的因素和水平见表1。正交试验结果及方差分析见表2和表3。
表1 正交试验的因素和水平表 略
表2 L9(34)正交试验结果表 略
表3 方差分析表 略
由表2，3可知，采用超声波方法提取，以黄苓苷含量为考察指标，各因素对黄苓苷提取工艺影响的大小为：C>A>B，其中提取温度对黄苓苷的提取影响最大，提取时间和饮片厚度对黄苓苷的提取也有一定的影响。在实验范围内，最佳提取条件为：A2B2C3，即用0.6~0.9mm厚度的黄苓饮片，在60℃振荡15分钟。
3 讨论
由本实验可以看出，黄苓饮片厚度、提取时间和提取温度对黄苓苷的提取量有一定的影响。按一般常规，片越薄，提取时间越长，提出的含量应越高。可是，在本次实验中，最薄片和最长提取时间却没有得到最高含量。这可能是由于超声波对提取物有一定的破坏作用，对于薄片，提取速率快，提取物在长时间的超声过程中受到破坏而导致含量的降低。一般来说，超声波提取不需要加热，可是在本次实验中，随着提取温度的升高，含量明显提高。因此，选择合适的饮片厚度、超声时间和提取温度对于超声波提取来说是必要的。
参 考 文 献
1 肖崇厚，主编. 中药化学第1版. 上海:科学技术出版社，1987，245
河南省周口市药品检验所 周口466000, http://www.100md.com(袁梦哲 袁文静)
1 仪器与试药
V530型紫外分光光度计，AS5150A型超声波振荡器，普利赛斯92SM202A型电子分析天平。黄苓苷对照品(批号：0715200111，中国药品生物制品检定所)。黄苓为市售药材，经本所中药室鉴定。乙醇、氢氧化钠均为分析纯，水为蒸馏水。
2 方法与结果
21 原料的预处理将黄苓净选，切制，按厚度分为：1~2mm、0.6~0.9mm、小于0.5mm，干燥后分装样品袋中，备用。
22 黄苓苷的含量测定方法
221 测定波长的选择 精密称取黄苓苷对照品适量，用50%的乙醇溶液配制成约15μg/ml的溶液，以50%的乙醇为空白，用V530型紫外分光光度计，在200~350nm的波长范围内扫描，在278nm波长处有最大吸收。
222 标准曲线的绘制 精密称取60℃减压干燥恒重的黄苓苷对照品18mg于50ml量瓶中，加50%乙醇溶解至刻度。精密量取上述标准液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml分别置50ml量瓶中，加50%乙醇稀释至刻度，摇匀，在278nm波长处测吸光度，由吸光度(A)对溶液浓度(C)作线性回归，回归方程(n=5)为：A=0.0294+0.0591C Γ=0.9999表明黄苓苷在7.2~36μg范围内线性关系良好。
223 黄苓苷样品溶液的制备和测定 精密称取黄苓样品1.0g，加50倍量的溶剂浸泡0.5小时后，放入振荡器中(频率40KHZ)。根据正交试验表选择一定的提取时间和温度进行超声处理后，过滤，补足滤液至50ml。精密量取上述滤液1ml至100ml量瓶中，加50%的乙醇稀释至刻度，摇匀。在278nm波长处测吸光度(A)，由回归方程计算出黄苓苷的对应浓度(C)。按X=0.5C对计算出黄苓苷的含量X%。
23 L9(34)正交试验取本品样品约1.0g，精密称定。采用正交试验法，以黄苓苷含量为参考指标，考察黄苓饮片厚度，提取时间和提取温度3个因素。试验的因素和水平见表1。正交试验结果及方差分析见表2和表3。
表1 正交试验的因素和水平表 略
表2 L9(34)正交试验结果表 略
表3 方差分析表 略
由表2，3可知，采用超声波方法提取，以黄苓苷含量为考察指标，各因素对黄苓苷提取工艺影响的大小为：C>A>B，其中提取温度对黄苓苷的提取影响最大，提取时间和饮片厚度对黄苓苷的提取也有一定的影响。在实验范围内，最佳提取条件为：A2B2C3，即用0.6~0.9mm厚度的黄苓饮片，在60℃振荡15分钟。
3 讨论
由本实验可以看出，黄苓饮片厚度、提取时间和提取温度对黄苓苷的提取量有一定的影响。按一般常规，片越薄，提取时间越长，提出的含量应越高。可是，在本次实验中，最薄片和最长提取时间却没有得到最高含量。这可能是由于超声波对提取物有一定的破坏作用，对于薄片，提取速率快，提取物在长时间的超声过程中受到破坏而导致含量的降低。一般来说，超声波提取不需要加热，可是在本次实验中，随着提取温度的升高，含量明显提高。因此，选择合适的饮片厚度、超声时间和提取温度对于超声波提取来说是必要的。
参 考 文 献
1 肖崇厚，主编. 中药化学第1版. 上海:科学技术出版社，1987，245
河南省周口市药品检验所 周口466000, http://www.100md.com(袁梦哲 袁文静)