化学发光酶免疫分析_17β雌二醇_水体_尿液_

水体及人体液中的雌二醇的高灵敏度化学发光酶免疫分析

http://www.100md.com 《分析化学》医学期刊 2007年第3期

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     摘要采用高灵敏度的化学发光酶免疫分析方法(CLEIA)研究测定了环境水体及人体尿液中17β雌二醇(17βestradiol)的含量。以FITCantiFITC体系为固相，生物素亲和素体系作为信号放大体系，高灵敏度的3(2′螺旋金刚烷)4甲氧基4(3″羟基)苯1，2二氧杂环丁烷磷酸钠(AMPPD)碱性磷酸酶(ALP)化学发光反应作为信号检测体系。优化分析条件后，测量的线性范围为2.5~2000 ng/L;检出限为1.1 ng/L;批内、批间分析误差均在10%以内，稀释回收率和加标回收率均在92%~112%之间。测得环境水样中雌二醇的含量在015~057 ng/L范围内，而人体尿液中雌二醇含量在075 ~135 μg/L范围内。

    关键词化学发光酶免疫分析，17β雌二醇，水体，尿液

     1 引言

    环境雌激素是模拟雌激素作用的一类外源性化合物,在结构或功能上与内源性雌激素相似。进入机体后不仅能干扰体内正常分泌物质的合成、释放、运转、代谢、结合等过程, 而且可以激活或抑制内分泌系统的功能, 从而破坏其维持机体稳定性和调控的作用。雌二醇(estradiol，E2)属环境内源性雌激素，主要来自于人及家禽、家畜的排泄物，由卵巢内优势卵泡产生，能促进女性生殖器官的生长和发育。雌二醇有α和β两种构型，其中17β雌二醇(17βestradiol)为生物学效应最强的内源性雌激素。根据每天人体分泌的17β雌二醇的量及其在水体中的大致稀释倍数，有报道指出约有 ng/L数量级的环境雌激素存在于环境水体中[1, 2]。当雌激素从周围生态环境进入到动物体内后，会干扰正常的生物物理代谢过程，并且产生诸多负面效应，对水体有机物和水体动物影响更大[3]。环境雌性激素通过食物链进入动物体内后起到类似于雌激素的功能，会极大地影响人体和动物的生殖健康[4]，尤其对男性生殖系统会造成发育和功能异常、肿瘤发病率上升及男性出生比例下降等危害。据报道，在10-12水平浓度的17β雌二醇就会导致动物体内卵黄蛋白原的产生[5, 6]。因此，研究高灵敏度检测水体中17β雌二醇的方法对于环境风险评价是非常重要的。目前对环境雌激素的检测有化学分析方法、生物学方法、细胞学方法、生化学方法和分子生物学方法等，对雌二醇的检测则常用色谱或色谱质谱联用技术[7, 8]。但这些方法不仅费力、耗时，仪器昂贵，样品预处理复杂，而且需要专门技术人员操作，自动化受到限制。Halman发展的化学发光免疫分析(CLIA)方法将化学发光法和免疫分析法结合起来 ......

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