GMCSF；白细胞介素15；重组融合蛋白质类；质粒；基因表

GMCSF/IL15融合基因原核表达载体的构建及表达

http://www.100md.com 《福建医科大学学报》 2006年第2期

GMCSF；白细胞介素15；重组融合蛋白质类；质粒；基因表达,,GMCSF；白细胞介素15；重组融合蛋白质类；质粒；基因表达,1材料与方法,2结果,3讨论,参考文献：

     摘要: 目的构建原核表达质粒pPROEXTMHTbGMCSF/IL15并在大肠杆菌DH5α中表达，以期获得具有GMCSF/IL15双重活性的融合蛋白。方法利用分子生物工程技术，构建重组原核表达载体pPROEXTMHTbGM15，并转化进大肠杆菌DH5α IPTG诱导表达4 h后，经SDSPAGE、免疫印迹证实为GM15融合蛋白。结果重组载体经转化大肠杆菌DH5α后，诱导表达出相对分子质量约为33 kD左右的融合蛋白。结论构建了pPROEXTMHTbGMCSF/IL15融合基因表达系统，并诱导表达出GM15融合蛋白。

    关键词: GMCSF；白细胞介素15；重组融合蛋白质类；质粒；基因表达

    细胞因子因在机体的多种免疫反应中发挥着重要的作用而被广泛应用于临床。近年来，利用基因工程技术发展了某些新型的细胞因子融合蛋白，其不仅保留了融合前各因子的功能，而且还可能产生更强、更新的生物学效应。粒巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)和白细胞介素15(IL15)都是机体重要的细胞因子，且都在抗肿瘤方面发挥重大的作用。GMCSF相对分子质量为18～32 kD，作为多功能细胞因子，在机体造血调控及肿瘤免疫应答网络中起着重要的作用[1]。IL15相对分子质量约为15 kD，生物学功能与IL2相似，主要作用于T细胞，且其抗肿瘤功能更优于IL2[2]，同时IL15可诱导NK细胞产生GMCSF。笔者在真核表达系统中研究GM15融合蛋白生物学功能的基础上，为进一步获得大量的GM15融合蛋白，拟采用基因重组技术，将GM15融合基因克隆在pPROEXTMHTb原核表达载体上，并在大肠杆菌中表达了GM15融合蛋白 ......

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