内皮素在实验性高血压大鼠发病中的作用Δ
作者：蔡晖 林善锬 周江华 贡沁燕** 杨藻宸**
单位：(上海医科大学华山医院肾病研究室 200040)
关键词：内皮素；高血压；动物，实验
中华医学杂志900808
摘要 研究自发性高血压大鼠(SHR)，二肾-夹型高血压大鼠(2KlC)血浆内皮素(ET)水平以及它们肾、尾动脉对ET的收缩反应。结果血浆ET水平在SHR，2K1C和对照组(WKY、SD大鼠)差异无显著意义。但SHR对ET的血管收缩作用较：WKY明显为高。表现在ET对SHR肾、尾动脉作用的半数有效浓度值分别为(0.89±0.44)×10-8mol/L，(0.16±0.26)×10-8mol/L，较WKY(1.71±0.73)×10-8mol/L，(1.27±0.61)×10-8mol/L低(P<0.05)。但在2KlC及SD组中无差异。4组动物的肾、尾动脉对去甲肾上腺素的收缩反应无显著差异。因此，在SHR中血管对ET的反应过高可能是造成高血压的重要原因之一。
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内皮素(Endothelin，ET)是由21个氨基酸残基组成的，血管内皮细胞衍生的活性多肽 [1]。它具有强大的血管收缩作用，共强度比至今己知的其他血管活性物质均强。ET的缩血管作用依赖于钙的存在，钙通道拮抗剂戊脉安和硝苯唆等均可明显抑制其作用。静脉注射ET，使肾脏排钠减少[2] 中枢注射ET可明显兴奋交感神经[3]。此外， ET对心房肽、肾素和醛固酮等分泌均有影响[4，5]。因此， ET与高血压的发病有密切关系。为了探讨ET在实验性高血压动物发病中的作用，我们着重研究血浆ET浓度的情况，以及体外动物血管对ET的收缩反应。
材料与方法
一、实验动物
1.自发性高血压大鼠(SHR)10只，正常对照大鼠(WKY)14只，由上海市高血压研究所提供，鼠龄4个月左右，两者体重分别为205±55与234±50g，尾动脉收缩血压采取清醒状况下在测压器内(电脑大鼠血压、心律仪，型号MRB-3A)安静半小时后测得，两组大鼠收缩压分别为25.0±1.33kPa和13.3±2.66kPa(186±l0mmHg、100±20mmHg)。
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2.二肾-夹型高血压大鼠(2K1C)11只，选择SD大鼠体重150g，在水合氯醛(0.03/100g)麻醉后由腹腔按常规方法于腹主动脉与左肾动脉分叉处放置银夹，以后常规饮食4周后进行试验；对照大鼠(SD)14只，同法麻醉及暴露肾动脉，但不放置银夹，术后饲以同样饮食，4周后实验。实验时两组动物体重分别为262±49和286±65g，处死前股动脉插管直接测血压以后换算成平均动脉压(MAP)分别为16.0±0.36kPa和10.6±1.60kPa(120±3mmHg和79±12mmHg)。
3.ET放免测定，由美国Peninsula Lab提供药盒(N0.6911)，测定范围为1～500pg/m1，上述4组动物心腔抽血以后置于含EDTA试管内后，即刻在4°C下5000r/min进行离心，以后将血浆留置于-70°C保存，测试日在冰水浴中解冻后，按1：10稀释于0.1%三氟醋酸(TFA)中，以后缓慢通过Sep-PakC18层析柱，再用0.1%TFA在80%乙腈中洗脱[6]，氮气吹干，测试日用磷酸盐缓冲液(pH7.6)复溶至原来容量的1/10再进行测定。
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二、大鼠动脉离体实验
上述4组大鼠经乌拉坦(1.0g/kg)麻醉后，即分离出两侧肾动脉(2K1C组只分离右肾动脉)和尾动脉两段，以后迅速置于含95%O2和5%CO2混合气体的冰Krebs-Ringer溶液中，去除血管周围结缔组织，并剪成长约5mm的血管段，按Allen等[7]方法制成动脉环标本，再分别置于含有5ml Kerbs-Ringer液(37±0.5°C)的浴槽中，充以上述混合气体，通过张力换能器和记录仪描记各动脉环的张力变化。静止张力1.5g，每30分钟更换Krebs-Ringer液1次，平衡2小时后开始加药。以累积浓度给药法给于10-9～10-7mol/L的ET(以3倍递增)和5.9×10-9～5.9×10-5mol/L的去甲肾上腺素(NE)，以10倍递增。从而分别测得各组大鼠肾和(或)尾动脉对二药反应的累积浓度——反应曲线(CCRC)。应用计算机处理求得半数有效浓度(EC50)和最大收缩张力(Emax)，每个动脉环标本只做一次CCRC。
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三、数据处理
实验数据用
±s表示，组间差异用非配对t检验处理。药物作用强度用EC50表示。
结 果
一、SHR、WKY、2K1C和SD大鼠血浆ET含量
SHR组血浆ET为53.2±18.0pg/ml，WKY组47.2±16.2pg/ml，两组间差异无显著意义(P〉0.05)。2K1C组为42.4±13.1pg/ml，SD组43.5±11.6pg/ml(P〉0.05)。
二、不同大鼠动脉对ET收缩反应情况
4组大鼠肾和尾动脉环对ET作用的CCRC如图1～4所示，由图可见，SHR肾动脉和尾动脉，其CCRC均较WKY组的相应动脉左移，而2K1C与SD大鼠动脉的CCRC基本交叉。从上述CCRC上计算所得的EC50值在SHR肾动脉和尾动脉分别为(0.89±0.44)×10-8mol/L和(0.61±0.26)×10-8mol/L，该值明显低于WKY组大鼠相应动脉的EC50值分别为(1.7±0.73)×10-8mol/L和(1.27±0.61)×10-8mol/L(P〈0.05)；在2K1C大鼠肾、尾动脉上EC50值分别为(1.31±1.16)×10-8mol/L和(1.75±1.39)×10-8mol/L，在SD大鼠相应动脉上EC50值分别为(1.76±0.71)×10-8mol/L和(0.97±1.16)×10-8mol/L，二者差异均无显著意义(P〉0.05)。Emax在SHR肾、尾动脉分别为378.8±141.0mg和427.5±183.9mg，在WKY大鼠相应动脉上分别为442.8±105.8mg和560.2±279.2mg，两组大鼠差异也无显著意义(P〉0.05)；在2K1C大鼠肾、尾动脉上，Emax分别为357.7±270.1mg和709.9±282mg，SD相应动脉上分别为486.2±123.2mg和337.7±124.9mg，两组大鼠肾动脉Emax之间差异无显著意义(P〉0.05)，但2K1C大鼠尾动脉Emax却明显大于SD组大鼠尾动脉的Emax(P〈0.01)。上述结果提示SHR组大鼠肾、尾动脉对ET的缩血管反应较WKY组相应动脉明显增高，但在2K1C组却无此现象发现。
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浓度(-log mol)
WKY=6 SHR=7
图1 大鼠肾动脉环对ET积累浓度反应曲线
浓度(-log mol/L)
WKY=9 SHR=9
图2 大鼠尾动脉环对ET积累浓度反应曲线
浓度(-log mol/L)
2K1C=8 SD=7
, http://www.100md.com 图3 大鼠肾动脉环对ET积累浓度反应曲线
浓度(-log mol/L)
2K1C=8 SD=7
图4 大鼠尾动脉环对ET积累浓度反应曲线
三、不同大鼠动脉对NE收缩反应情况
SHR和WKY大鼠肾、尾动脉对NE作用的反应曲线基本重叠，2K1C和SD大鼠尾动脉对NE作用的反应曲线也基本重叠，从曲线上计算所得的EC50在SHR和WKY大鼠肾、尾动脉各为(7.46±6.61)×10-7mol/L、(4.02±2.74)×10-7mol/L和(4.89±1.72)×10-7mol/L、(5.35±2.21)×10-7mol/L，两组之间差异无显著意义(P〉0.05)；在2K1C和SD大鼠尾动脉上，NE的EC50分别为(3.41±2.29)×10-7mol/L和(4.41±1.27)×10-7mol/L，二者差异无统计学意义(P〉0.05)。Emax在SHR大鼠肾、尾动脉分别为263.7±122.1mg和536.4±316.2mg，与WKY组相应动脉的Emax(分别为380.4±114.9mg和516.1±175.4mg)差异无显著意义(P〉0.05)；2K1C大鼠尾动脉的Emax(1059.2±761.8mg)和SD大鼠尾动脉的Emax(1036.0±272.8mg)差异也无显著意义(P〉0.05)。上述结果说明高血压大鼠SHR和2K1C其动脉对NE的缩血管作用反应与其各自对照大鼠WKY和SD之间无明显差异。
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讨 论
从本实验结果可见，SHR组大鼠无论肾或尾动脉，对ET均有过高的收缩反应。我们的结果与Tomobe等[8]的结果一致。因此，这种对ET的反应过高可能普通存在于SHR的全身血管床。诚然，上述实验是在离体进行，不能完全推论在体情况，但由于这种情况仅在SHR中出现，并不在WKY大鼠出现，特别是2K1C大鼠中也无此现象，似乎高血压本身也不是造成这种情况的关键原因。本组2K1C大鼠的血压不高于SHR，但显著高于SD大鼠，可以认为高血压已存在；Emax值与许多因素有关，其中血管平滑肌厚度与其甚为密切，本组2K1C大鼠该值较SD大鼠为高，其绝对值也较SHR增高，也说明2K1C大鼠高血压的存在。综上结果，可以认为SHR血管对ET收缩过高反应可能是一种原发的障碍。在本实验中，这种障碍仅表现为在对ET的反应上，因为两种高血压大鼠血管对NE反应均无特殊，这种过高反应很可能与SHR的高血压发生有关。
SHR大鼠动脉对ET高敏性的机制，本组实验难以下结论。许多作者发现SHR有遗传基因的异常，其中Hyp-Ⅱ基因可决定平滑肌对Ca2+的反应性[9]，由于ET能使细胞内Ca2+增加，推想同样浓度的ET因上述基因关系可能使血平滑肌内Ca2+明显增加，从而使收缩反应增高，但由于NE的作用也与细胞内Ca2+浓度改变有关，本组中也未见到SHR与WKY大鼠之间对NE反应的不同，因此，似乎难以完全解释。Miasiro等[10]研究ET的作用并不完全依赖于细胞外Ca2+的内流，而可以通过细胞器内Ca2+转移到胞浆发挥作用；另外，发现SHR还有另一些基因异常，使血管平滑肌细胞对Ca2+处理改变，从而使用权细胞膜和肌浆膜对Ca2+结合和摄取减弱，结果造成细胞膜的稳定性下降，使其对ET的敏感性增高。当然，ET对肾脏血管收缩后所致的血流动力学改变，或者对中枢神经系统作用敏感性过高，从而使全身交感神经兴奋性过高，都可能参与SHR的发病。
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本组实验发现血浆ET样物质在四组动物并无差异；虽然未对RIA系统所测出的物质进行深入分析，同时也未证实ET是否在循环中存在，但是根据我们实验室工作，证明血浆ET在许多与水钠代谢异常及血管内皮代谢异常有关的临床疾病(包括原发性高血压、慢性肾炎性高血压、系统性红斑狼疮等)中有改变，控制细胞外液容量也可以影响血浆ET水平。这些可能部分反映血浆ET的水平，即也说明血浆中确有ET存在。从本文结果来看似乎血浆ET水平与高血压发生无直接关系，但是，由于血浆ET浓度并不能反映出体内ET产生和清除等的代谢情况，因此，在SHR大鼠体内是否存在对ET摄取、释放、产生或分解等的异常尚不能定论。
ET对血管收缩作用的EC50值比Tomobe等[8]报道的要大10倍以上，这可能与两者的实验室条件略有不同有关。另外，ET是一种粘性很强的多肽物质，很容易吸附于玻璃器皿等容器上，尽管在实验中我们都事先将玻璃容器硅化，但仍难免部分被吸附，从而使加入ET的理论浓度与实际浓度之间出现差异，造成EC50值偏大。至于2K1C大鼠中ET作用的Emax为何较SD明显为大，而此差异在SHR组大鼠与WKY组大鼠之间却观察不到，目前尚难解释，有待进一步实验予以澄清。
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参考文献
1. Yanagisawa M, et al. A novel potent vasoconstrictor peptide produced by vascular endothelial cells. Nature 1988；332：411.
2. Goetz KL. et al. Cardiovascular, renal, and endocrine responses to intravenous endothelin in conscious dogs. Am J Physiol 1988；255：R1064.
3. Ouchi Y, et al. Central effect of endothelin on blood pressure in conscious rats.(abstract)Circulation 1988；78：[Suppl Ⅱ]266.
, 百拇医药
4. Fukuda Y, et al. Endothelin is a petent secretagogue for atrial natriuretic peptide in cultured rat atrial myocytes. Biochem Biophys Res Commun 1988；155：167.
5. Rakugi H, et al. Endothelin inhibits renin release from isolated rat glomeruli. Biochem Biophys Res Commun 1988；155：1244.
6. Bennett HPJ, et al. Purification of the two major forms of rat pituitary corticotropin using only reversed-phase liquid chromatography Biochemistry 1981；20：4530.
, 百拇医药
7. Allen CS, et al. Cerebral arterial spasm. part 1: In vitro contractile activity of vasoactive agents on canine basilar and middle cerebral arteries. J Neurosurg 1974；40：433.
8. Tomobe Y, et al. Effects of endothelin on the renal artery from spontaneously hypertensive and Wistar Kyoto rats. Eur J Pharmacol 1988；152：373.
9. Rapp JP. A genetic locus(Hyp-2)controlling vascular smooth muscle response in spontaneously hypertensive rats. Hypertension 1982；4：459.
10. Miasiro N, et al. Does endothelin mobilize calcium from intracellular stores in rat aortic vascular smooth muscle cells in primary culture? Biochem Biophys Res Commun 1988；156：312.
Δ国家自然科学基金资助项目
** 上海医科大学药理学教研室
(1989年8月2日收稿 1990年2月13日修回), 百拇医药
单位：(上海医科大学华山医院肾病研究室 200040)
关键词：内皮素；高血压；动物，实验
中华医学杂志900808
摘要 研究自发性高血压大鼠(SHR)，二肾-夹型高血压大鼠(2KlC)血浆内皮素(ET)水平以及它们肾、尾动脉对ET的收缩反应。结果血浆ET水平在SHR，2K1C和对照组(WKY、SD大鼠)差异无显著意义。但SHR对ET的血管收缩作用较：WKY明显为高。表现在ET对SHR肾、尾动脉作用的半数有效浓度值分别为(0.89±0.44)×10-8mol/L，(0.16±0.26)×10-8mol/L，较WKY(1.71±0.73)×10-8mol/L，(1.27±0.61)×10-8mol/L低(P<0.05)。但在2KlC及SD组中无差异。4组动物的肾、尾动脉对去甲肾上腺素的收缩反应无显著差异。因此，在SHR中血管对ET的反应过高可能是造成高血压的重要原因之一。
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内皮素(Endothelin，ET)是由21个氨基酸残基组成的，血管内皮细胞衍生的活性多肽 [1]。它具有强大的血管收缩作用，共强度比至今己知的其他血管活性物质均强。ET的缩血管作用依赖于钙的存在，钙通道拮抗剂戊脉安和硝苯唆等均可明显抑制其作用。静脉注射ET，使肾脏排钠减少[2] 中枢注射ET可明显兴奋交感神经[3]。此外， ET对心房肽、肾素和醛固酮等分泌均有影响[4，5]。因此， ET与高血压的发病有密切关系。为了探讨ET在实验性高血压动物发病中的作用，我们着重研究血浆ET浓度的情况，以及体外动物血管对ET的收缩反应。
材料与方法
一、实验动物
1.自发性高血压大鼠(SHR)10只，正常对照大鼠(WKY)14只，由上海市高血压研究所提供，鼠龄4个月左右，两者体重分别为205±55与234±50g，尾动脉收缩血压采取清醒状况下在测压器内(电脑大鼠血压、心律仪，型号MRB-3A)安静半小时后测得，两组大鼠收缩压分别为25.0±1.33kPa和13.3±2.66kPa(186±l0mmHg、100±20mmHg)。
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2.二肾-夹型高血压大鼠(2K1C)11只，选择SD大鼠体重150g，在水合氯醛(0.03/100g)麻醉后由腹腔按常规方法于腹主动脉与左肾动脉分叉处放置银夹，以后常规饮食4周后进行试验；对照大鼠(SD)14只，同法麻醉及暴露肾动脉，但不放置银夹，术后饲以同样饮食，4周后实验。实验时两组动物体重分别为262±49和286±65g，处死前股动脉插管直接测血压以后换算成平均动脉压(MAP)分别为16.0±0.36kPa和10.6±1.60kPa(120±3mmHg和79±12mmHg)。
3.ET放免测定，由美国Peninsula Lab提供药盒(N0.6911)，测定范围为1～500pg/m1，上述4组动物心腔抽血以后置于含EDTA试管内后，即刻在4°C下5000r/min进行离心，以后将血浆留置于-70°C保存，测试日在冰水浴中解冻后，按1：10稀释于0.1%三氟醋酸(TFA)中，以后缓慢通过Sep-PakC18层析柱，再用0.1%TFA在80%乙腈中洗脱[6]，氮气吹干，测试日用磷酸盐缓冲液(pH7.6)复溶至原来容量的1/10再进行测定。
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二、大鼠动脉离体实验
上述4组大鼠经乌拉坦(1.0g/kg)麻醉后，即分离出两侧肾动脉(2K1C组只分离右肾动脉)和尾动脉两段，以后迅速置于含95%O2和5%CO2混合气体的冰Krebs-Ringer溶液中，去除血管周围结缔组织，并剪成长约5mm的血管段，按Allen等[7]方法制成动脉环标本，再分别置于含有5ml Kerbs-Ringer液(37±0.5°C)的浴槽中，充以上述混合气体，通过张力换能器和记录仪描记各动脉环的张力变化。静止张力1.5g，每30分钟更换Krebs-Ringer液1次，平衡2小时后开始加药。以累积浓度给药法给于10-9～10-7mol/L的ET(以3倍递增)和5.9×10-9～5.9×10-5mol/L的去甲肾上腺素(NE)，以10倍递增。从而分别测得各组大鼠肾和(或)尾动脉对二药反应的累积浓度——反应曲线(CCRC)。应用计算机处理求得半数有效浓度(EC50)和最大收缩张力(Emax)，每个动脉环标本只做一次CCRC。
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三、数据处理
实验数据用
±s表示，组间差异用非配对t检验处理。药物作用强度用EC50表示。结 果
一、SHR、WKY、2K1C和SD大鼠血浆ET含量
SHR组血浆ET为53.2±18.0pg/ml，WKY组47.2±16.2pg/ml，两组间差异无显著意义(P〉0.05)。2K1C组为42.4±13.1pg/ml，SD组43.5±11.6pg/ml(P〉0.05)。
二、不同大鼠动脉对ET收缩反应情况
4组大鼠肾和尾动脉环对ET作用的CCRC如图1～4所示，由图可见，SHR肾动脉和尾动脉，其CCRC均较WKY组的相应动脉左移，而2K1C与SD大鼠动脉的CCRC基本交叉。从上述CCRC上计算所得的EC50值在SHR肾动脉和尾动脉分别为(0.89±0.44)×10-8mol/L和(0.61±0.26)×10-8mol/L，该值明显低于WKY组大鼠相应动脉的EC50值分别为(1.7±0.73)×10-8mol/L和(1.27±0.61)×10-8mol/L(P〈0.05)；在2K1C大鼠肾、尾动脉上EC50值分别为(1.31±1.16)×10-8mol/L和(1.75±1.39)×10-8mol/L，在SD大鼠相应动脉上EC50值分别为(1.76±0.71)×10-8mol/L和(0.97±1.16)×10-8mol/L，二者差异均无显著意义(P〉0.05)。Emax在SHR肾、尾动脉分别为378.8±141.0mg和427.5±183.9mg，在WKY大鼠相应动脉上分别为442.8±105.8mg和560.2±279.2mg，两组大鼠差异也无显著意义(P〉0.05)；在2K1C大鼠肾、尾动脉上，Emax分别为357.7±270.1mg和709.9±282mg，SD相应动脉上分别为486.2±123.2mg和337.7±124.9mg，两组大鼠肾动脉Emax之间差异无显著意义(P〉0.05)，但2K1C大鼠尾动脉Emax却明显大于SD组大鼠尾动脉的Emax(P〈0.01)。上述结果提示SHR组大鼠肾、尾动脉对ET的缩血管反应较WKY组相应动脉明显增高，但在2K1C组却无此现象发现。
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浓度(-log mol)
WKY=6 SHR=7
图1 大鼠肾动脉环对ET积累浓度反应曲线
浓度(-log mol/L)
WKY=9 SHR=9
图2 大鼠尾动脉环对ET积累浓度反应曲线
浓度(-log mol/L)
2K1C=8 SD=7
, http://www.100md.com 图3 大鼠肾动脉环对ET积累浓度反应曲线
浓度(-log mol/L)
2K1C=8 SD=7
图4 大鼠尾动脉环对ET积累浓度反应曲线
三、不同大鼠动脉对NE收缩反应情况
SHR和WKY大鼠肾、尾动脉对NE作用的反应曲线基本重叠，2K1C和SD大鼠尾动脉对NE作用的反应曲线也基本重叠，从曲线上计算所得的EC50在SHR和WKY大鼠肾、尾动脉各为(7.46±6.61)×10-7mol/L、(4.02±2.74)×10-7mol/L和(4.89±1.72)×10-7mol/L、(5.35±2.21)×10-7mol/L，两组之间差异无显著意义(P〉0.05)；在2K1C和SD大鼠尾动脉上，NE的EC50分别为(3.41±2.29)×10-7mol/L和(4.41±1.27)×10-7mol/L，二者差异无统计学意义(P〉0.05)。Emax在SHR大鼠肾、尾动脉分别为263.7±122.1mg和536.4±316.2mg，与WKY组相应动脉的Emax(分别为380.4±114.9mg和516.1±175.4mg)差异无显著意义(P〉0.05)；2K1C大鼠尾动脉的Emax(1059.2±761.8mg)和SD大鼠尾动脉的Emax(1036.0±272.8mg)差异也无显著意义(P〉0.05)。上述结果说明高血压大鼠SHR和2K1C其动脉对NE的缩血管作用反应与其各自对照大鼠WKY和SD之间无明显差异。
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讨 论
从本实验结果可见，SHR组大鼠无论肾或尾动脉，对ET均有过高的收缩反应。我们的结果与Tomobe等[8]的结果一致。因此，这种对ET的反应过高可能普通存在于SHR的全身血管床。诚然，上述实验是在离体进行，不能完全推论在体情况，但由于这种情况仅在SHR中出现，并不在WKY大鼠出现，特别是2K1C大鼠中也无此现象，似乎高血压本身也不是造成这种情况的关键原因。本组2K1C大鼠的血压不高于SHR，但显著高于SD大鼠，可以认为高血压已存在；Emax值与许多因素有关，其中血管平滑肌厚度与其甚为密切，本组2K1C大鼠该值较SD大鼠为高，其绝对值也较SHR增高，也说明2K1C大鼠高血压的存在。综上结果，可以认为SHR血管对ET收缩过高反应可能是一种原发的障碍。在本实验中，这种障碍仅表现为在对ET的反应上，因为两种高血压大鼠血管对NE反应均无特殊，这种过高反应很可能与SHR的高血压发生有关。
SHR大鼠动脉对ET高敏性的机制，本组实验难以下结论。许多作者发现SHR有遗传基因的异常，其中Hyp-Ⅱ基因可决定平滑肌对Ca2+的反应性[9]，由于ET能使细胞内Ca2+增加，推想同样浓度的ET因上述基因关系可能使血平滑肌内Ca2+明显增加，从而使收缩反应增高，但由于NE的作用也与细胞内Ca2+浓度改变有关，本组中也未见到SHR与WKY大鼠之间对NE反应的不同，因此，似乎难以完全解释。Miasiro等[10]研究ET的作用并不完全依赖于细胞外Ca2+的内流，而可以通过细胞器内Ca2+转移到胞浆发挥作用；另外，发现SHR还有另一些基因异常，使血管平滑肌细胞对Ca2+处理改变，从而使用权细胞膜和肌浆膜对Ca2+结合和摄取减弱，结果造成细胞膜的稳定性下降，使其对ET的敏感性增高。当然，ET对肾脏血管收缩后所致的血流动力学改变，或者对中枢神经系统作用敏感性过高，从而使全身交感神经兴奋性过高，都可能参与SHR的发病。
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本组实验发现血浆ET样物质在四组动物并无差异；虽然未对RIA系统所测出的物质进行深入分析，同时也未证实ET是否在循环中存在，但是根据我们实验室工作，证明血浆ET在许多与水钠代谢异常及血管内皮代谢异常有关的临床疾病(包括原发性高血压、慢性肾炎性高血压、系统性红斑狼疮等)中有改变，控制细胞外液容量也可以影响血浆ET水平。这些可能部分反映血浆ET的水平，即也说明血浆中确有ET存在。从本文结果来看似乎血浆ET水平与高血压发生无直接关系，但是，由于血浆ET浓度并不能反映出体内ET产生和清除等的代谢情况，因此，在SHR大鼠体内是否存在对ET摄取、释放、产生或分解等的异常尚不能定论。
ET对血管收缩作用的EC50值比Tomobe等[8]报道的要大10倍以上，这可能与两者的实验室条件略有不同有关。另外，ET是一种粘性很强的多肽物质，很容易吸附于玻璃器皿等容器上，尽管在实验中我们都事先将玻璃容器硅化，但仍难免部分被吸附，从而使加入ET的理论浓度与实际浓度之间出现差异，造成EC50值偏大。至于2K1C大鼠中ET作用的Emax为何较SD明显为大，而此差异在SHR组大鼠与WKY组大鼠之间却观察不到，目前尚难解释，有待进一步实验予以澄清。
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参考文献
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Δ国家自然科学基金资助项目
** 上海医科大学药理学教研室
(1989年8月2日收稿 1990年2月13日修回), 百拇医药