临床检验析技术及其评价专题座谈会纪要
作者：中华医学杂志编辑委员会 临床检验杂志编辑委员会
单位：中华医学杂志编辑委员会 临床检验杂志编辑委员会
关键词：
中华医学杂志920101 中华医学杂志编辑委员会与临床检验杂志委员会于1991年6月2日至4日在南京联合召开了临床检验新技术及其评价专题座谈会，会议代表100人，收到稿件380余篇，其中大会发言29篇，小组交流62篇。会议还邀请8位专家作了各专题的中心发言，受到与会同志的欢迎。现将会议座谈讲座的内容整理如下。
免疫与微生物
一、自身抗体
协和医学董怡首先作了题为“自身抗体在风湿性疾病的临床应用及前景”的中心发言。自身抗体是自身免疫病的重要实验室标记。在风湿(RO)病中有一组因免疫失调而产生多种自身抗体的弥漫性结缔病(CTD)。近年来抗核抗体谱、抗磷脂抗体、类风湿因子(RF)和抗中性粒细胞胞浆抗体(ACPA)等自身抗体检验技术的发展，大大推动了CTD的临床诊治工作。
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以鼠肝为底物、用间接免疫荧光法测定抗核抗体(FANA)是筛选CTD的最好试验，如结果阳性(≥1：20)就很可能属此类疾病。FANA是指针对细胞核内不同成分(如RNA、DNA及各种蛋白)而产生的一组抗体，这一系列的抗体统称为抗核抗体谱。不同的CTD有不同的抗核抗体谱，因此开展抗核抗体谱的测定有助于CTD分类的诊断。抗核抗体谱大致分为5类：(1)抗双链DNA抗体。(2)抗组蛋白抗体。(3)抗可溶性核抗原(ENA)抗体，抗SSA(RO)抗体，抗SSB(La)抗体，抗类风湿关节炎抗原(RANA)抗体，抗Scl-70抗体，抗PM-1抗体，抗JO-1和抗Ku抗体。(4)抗着丝点抗体。(5)抗核仁抗体。
近年通过免疫印迹法将细胞核内不同抗原按其分子量不同电泳成不同区带，然后转移到硝酸纤维薄条上，以测定抗核抗体谱。此法不仅准确度高，并可同时测定多种自身抗体。如同一条带上SSA及其相应抗体反区带在60000和52000处，抗u1RNP和抗Sm抗体分别在68000和24000处。这是一种很有发展前途的方法。
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发言中指出，我国抗核抗体谱的检验尚有下列需要改进之处：(1)各实验室所用的抗原、标准血清、方法学应标准化，保证质量。各实验室的标准血清应定期交换检测。抗原宜商品化。(2)在检测FANA、抗核仁抗体尤其是抗着丝点抗体时宜应用体外培养的细胞株(如HEP-2)为底物。(3)应以人工合成的抗原多肽来代替从生物提取的核抗原，因为后者不易提纯而影响其特异性。
抗磷脂抗体包括抗心磷脂(ACL)抗体及狼疮抗凝物(LAC)。多见于系统性红斑狼疮(SLE)及其他CTD，也可出现在恶性肿瘤、传染病患者。此类抗体阳性者临床可出现血管栓塞、血小板减少、习惯性流产或胎死宫内等，统称为抗磷脂抗体综合征。80年代以RIA和ELIA法测定ACL抗体，明显提高了敏感性。测定LAC有部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间、蛇毒时间、白陶土凝时间等，但敏感性都不如测ACL抗体的RIA、ELISA法。ACL抗体与FANA、抗DNA抗体、类风湿因子和低补体血症均无相关性，与抗磷脂抗体综合征明显相关。对ACL抗体的研究不仅有助于阐明SLE的血管病变的发病机制和临床表现，也为探讨其它疾病的栓赛现象揭示了方向。
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RF测定临床沿用已久。RF大正常人群中阳性率2%～3%，年过70岁者男女阳性率分别为14%和9%，但滴度不高，故实验测定应作滴度测定以免出现假阳性。判断时要结合临床，避免简单地作出RF(+)的关节痛就是类风湿关节炎(RA)的诊断，因CTD也常出现阳性。协和医院的材料表明RF的阳性率在RA为70%，SLE25%，干燥综合征(SS)50%，系统性硬化症(PSS)70%，MCTD(45%)。
ACPA是1985年由丹麦学者首先报道的自身抗体。它出现在27例Wenger肉芽肿(WG)患者中25例的血清中，并与此病的活动性相关，抗体滴度的升降较其它指标和血沉、C反应蛋白更为敏感。本抗体检出改变了以往血管炎无特异性自身抗体的观点，并为今后血管炎分类提供了免疫学基础。国内已在多个单位建立了此抗体的测定方法，有待于积累更多临床资料和经验。
北京协和医院介绍积10年的临床资料证明FANA测定是筛选CTD最有效的试验。FANA阳性率在SLE、SS、PSS、DN/PM、MCTD及RA分别为90%～100%、40%～50%、50%～70%、40%～50%、90%～100%和20%～25%。抗双链DNA抗体和抗Sm抗体是SLE的标志抗体，其阳性率分别为65%和25%。抗SSB为SS的椟志抗体，阳性率为80%，抗Scl-70、抗着丝点抗体和抗核仁抗体为PSS的标志抗体、阳性率分别为60%、20%和38%，抗JO-1及抗PM-1抗体则为肌炎的标志抗体，阳性率各为25%左右。因此抗核体谱检测对诊断CTD有特异性。此外，抗双链DNA抗体为疾病活动性的指标；抗组蛋白抗体见于50%服用异烟肼的患者，揭示某些药物可导致自身免疫性。上海仁济医院应用免疫印迹法从分子水平检测抗核抗体谱，用一条宽2mm的硝酸纤维薄膜可同时检出6种抗体(抗RNP、Sm、SSA、SSB、Scl-70和JO-1抗体)，并发现新抗体——抗核糖体抗体。认为本法除敏感性与免疫扩散法相似外，还具有快速、简便的优点。他们还介绍了在免疫印迹法减少非特异性多肽带的经验，包括改用pH8、0.3%Tween，0.6%NaCl的洗涤液等。首都儿科研究所提出用滤纸夹芯技术技术检测硝酸纤维素膜上的抗原，可大大节省试剂的用量及时间。北京协和医院用免疫双扩散法对楷了人脾、小牛胸腺、猪脾中ENA抗原性，结果人脾中Sm、RNP、SSA及SSB的含量均很丰富，基次为小牛胸腺，而在猪脾中SSA和SSB含量几乎为0，表明ENA的抗原性在不同的组织不完全相同。上海仁济医院资料表明女性SLE患者活动期外周血白细胞雌激素受体含量明显高于静止期及正常人，揭示SLE的活动性可能与该受体的增高密切相关。北京铁路总医院进行了外周血免疫抑制细胞活性测定，资料表明在SLE(6例)、RA(2例)和再生障碍性贫血(6例)的抑制率均低于正常人。上海医科大学肿瘤研究所报告了大肠癌患者外周血T淋巴细胞亚群的变化，认为随癌的病期和病理而变化，病情加重下T4细胞下降、T5细胞增多、T4/T5比值明显下降而倒置。免疫球蛋白同属于非特异性免疫指标，只在少数特定的情况下方有其诊断意义，只能作为同一患者不同阶段的自身比较，此外，病变局部组织淋巴细胞亚型的变化较外周血中的变化可能更有意义。ACPA是WG的特异性抗体，北京协和医院对4例WG患者进行检测，3例阳阳，其滴度随病情升降，25名正常人和81例其他疾病患者均为阴性。本抗体阳性与抗核抗体阳性两者无交叉反应。他们用ELISA法测ACL抗体，在SLE中的阳性率为30%，凡抗体阳性者其中枢神经系统病弯、血小板较少、血管栓塞及自然流产的发生均较抗体阴性者高，并提出抗体与SEL的血管炎病变密切相关。吉林医学院72例SLE患者血清抗F(ab)'2片段抗体测定的资料表明，在SLE缓解基不论用正常人IgG和F(ab)'2或纯化的抗DNA-F(ab)'2片段包被，其抗体滴度都高于活动期及正常人，提出此结果可用独特型与其抗体网络的免疫调节学说解释。北京协和医院还用点-免疫结合技术检测RF，提高了阳性率(由乳胶凝集法的36%提高到59%)，并可检测IgM、IgG及IgA RF，其敏感性与ELISA法基本相同。
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二、聚合酶链反应(PCR)
北京医科大学肝病研究所陈伟然作了题为“PCR技术临床应用的评价”的中心发言。PCR是一种体外扩增DNA的方法，它可能测出标本中非常微量的核酸。其基本过程是，先人工合成2个ssDNA分别与和其有互补序列的正负链结合，在4种三磷酸脱氧核苷酸和1种耐热的多聚酶存在下，结合于DNA链上的引物后DNA变性，引物再次结合及增长，形成新的同种DNA。不断重复此循环，DNA也不断增殖。PCR产物可能用向种方法检测，最简便的方法是直接进行剂胶电泳，经EB染以后在紫外光下观察，但如起始剂量非常小，就必须采用更敏感的Southern blot或bot blot法。用特异的序列进行分子杂交，或用标记的寡聚核苷酸与PCR产物进行液相杂交，然后进行凝胶电泳和放射自显影。PCR最初用于诊断镰刀状红细胞贫血症，继之用于人类遗传学的各个领域。PCR检测的第一种病毒为HIV，然后是HBV。此法还被大量用于扩增HCV RNA的逆转录产物，可用于临床检测丙型病毒性肝炎。高度灵敏性是本法的最大优点，检测HBV DNA时，检出水平可达130基因组/ml血清。通过这种新技术，现在我们知道，原认为外周血中病毒颗粒已清除的患者，实际上还是HBV DNA阳性；HBsAg阳性的患者，几乎全为HBV DNA阳性。Sumagaki等曾在抗HBc阳性的血也会感染HBV。PCR方法还证实了抗HBs抗体的出现标志着感染的终结，因为这时PCR已检测不到HBV DNA的存在。HCV病毒颗粒很难用免疫学方法检出，目前应用第二次PCR法，即第一次PCR产物的一部分用来作第二次PCR，由于二次引物不同，可以有效地降低本底和提高特民性。由于PCR扩增效率非常高，操作时混入任一个外源模板都可能使结果出现阳性，因此所用度剂必须是高纯度的，所用材料应是一次性的，需带手套工作，并一定要设合适的阴性和阳性对照。对防止污染的要求高可能是PCR方法用作临床检验的最大障碍。
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302医院介绍了PCR技术在肝炎患者HBV DNA检测中的应用，对32例急慢性肝炎患者应用PCR法检测HBV DNA，并与ELISA法检“二对半”的结果进行对比，在8例“二对半”全阴性患者中，5例PCR结果为阴性，还发现有一些病例HBV DNA和抗体并存。提出应对“抗HBV尤其是抗HBs出现即意味着传染必消失”的认识进行修正或补充。北京医科大学肝病研究所陈伟然发言不同意这一论断，他们对100余例抗HBs阳性患者用PCR法无一例查出HBV DNA，并指出所用引物可能不太合适。讲座中认为PCR在技术上是一个很大进展，为病因学、遗传学等研究提供了一个有力的手段，但由于技术要求高，就用天临床常规实验室还有待进一步完善与提高。
三、细菌学
北京协和医院陈民钧作了题为“细菌室工作在医院感染控制中的作用”的中心发言。首先概述了医院细室室的几个方面工作：(1)监视标本质量，因为不正确的采样、输送和保存标本，将导致培养分离结果的错误。(2)准确地鉴定微生物及其药敏试验。(3)及时报告结果，密切临床联系。(4)保留记录，定期总结。(5)建立各自医院的菌谱及药敏谱。(6)帮助医院感染控制(HIC)委员会研究医院感染的各种特殊问题。重点介绍了WHO推荐的常规药敏试rby Bauer纸片扩散法，特点为用M-H低胸腺嘧啶培养基，琼脂厚度为4mm，每小纸片应含规定浓度抗生素，合理保存，用纯的1.5亿/ml的菌液涂布，用卡尺测量在纸片周围形成的抑菌圈，按WHO规定的S-R范围判定耐药与敏感性。为了保证结果可靠，用ATCC(美国菌种收集中心)提供的大肠杆菌，每周对上述试验条件进行质控监测。在紧急情况时对无数据的新药可用(标准株对比法)得出可靠结果。为了指导合理用药，建议定期(每半年或1年)总结及公布常见菌株的药敏谱。
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关于菌种鉴定，革兰(+)及革兰(-)化脓性球菌可用双歧鉴定法，肠矸菌科宜用多种系列化反应组合的数码分析法，国内市场的商品质量不一，要慎重选用。不发酵糖类细菌，数码分析的商品质量不稳定，需用双歧鉴定法。
对疑有污染的物品，诸如输血、输液及其装置，透析液，呼吸机近端及湿化瓶，器械皿内消毒液，婴儿浴液及高压锅等进行细菌学监测，应用国际承认的标准方法，不应对标本行增菌后鉴定菌种及计数。
会上对标准敏感株如何在实验室中保存，防止变民以及条件致病菌中哪些菌具有传染性等问题进行了讨论。
肿瘤标志物与生化酶学
一、肿瘤标志物
江苏省临床检验中心王毓三作了题为“肿瘤生化标志物的研究进展”的中心发言，较全面论述了肿瘤标志物的概念以及在筛选患者，诊断和治疗的用途，指出诮用杂交瘤技术和酶免疫测定方法检测和鉴定肿瘤标志物，表明肿瘤标志物的研究已进入第三时期。
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甲胎蛋白(AFP)是国内外研究较多的肿瘤标志物，如AFP〉400μg/异时，极可能是原发性肝癌(PHC)，但约有30%PHC患者的AFP不升高，是目前临床诊断上一大难题。用植物凝集素可分出9种AFP异质体，用ConA测定的AFP异南体有助于区分PHC、胚胎性肿瘤及转移性肝癌，但无法鉴别良性肝脏疾病。上海长海医院肝病研究所屠振兴报告用豌豆凝素测定AFP异质体，并对28例AFP〉20但〈400μg/L的患者进行前瞻性研究的结果。以AFP异质体超体总AFP的25%为阳性，18例阳性者中17例在首次测定后3～28个月经手术病理检查或临床确诊为PHC，AFP异质体诊断的正确率为94.4%；但在10例阴性者中，也有9例经手术或临床诊断为PHC。因此，AFP异质体测试阴性并不能除外PHC。讨论中提出以单克隆血清的免疫化学测定法替代双向免疫电泳测定法的问题。长海医院目前已制备出此种单克隆抗血清，但测定方法有待完善，并正在进行临床观察。上海医科大学首次报道用M(2)型丙酮酸激酶诊断PHC，阳性率为95.2%，可望成为一个有价值的肿瘤标志物。江苏省肿瘤研究后王毓三观察了α-L岩藻糖芏酶的变化，132例PHC患者活性为305(±)151U/L。如以AFP〉200μg/L为阳性，PHC患者阳性率为64.4%，若辅以本酶测试，则阳性率为90.5%。有讨论发言中都强调了多种标志物的联合应用，以提高诊断阳性率。
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中心发言还介绍了神经元特烯醇化酶在诊断神经平细胞瘤和肺小细胞癌中的价值。前者阳性率为90%～100%，后者为65%～85%，目前国内已在研制此项测试试剂盒，有可能近期推广使用。卵巢肿瘤相关抗原CA125诊断符合率达90%，是另一个目前受重视的肿瘤标志物。
对南通市肿瘤医院用超薄PAGE垂直平板电泳测定金属离子结合蛋白诊断恶性肿瘤，以及湖北仙桃市胡场卫生院用尿液碘化钾试验筛选肿瘤患者，讨论中认为对这些试验还有待于进一步临床观察方能作出正确评价。
二、生化酶学
北京医院杨振华作了题为“无Q波急性心肌梗塞和溶栓治疗时的酶学变化”的中心发言。由于部分急性心肌梗塞(AMI)患者的心电图不出现特异Q波，此型AMI诊断常需进行一些酶学检查。总酶活性检查特异性不高，尤其乳酶脱氢酶(LD)和谷草转氨酶(AST)价值不大，因为红细胞内富含这些酶，溶血标本易出现假阳性。不少学者认为对怀疑AMI患者只测肌酸激酶(CK)总活性即可，但部分AMI患者CK变化不大，其最高值可能不超过参考值上限。Vladutm经1214例AMI患者加顾性研究，建议，可疑AMI在首次查CK后8和16小时抽血复查，如上升〉10%，就应严密加以观察。CK-MB是诊断AMI的“金标准”，常用测定方法除经典的电泳法外，还有免疫抑制法和单克隆抗体免疫化学测定法。免疫抑制法正在我国一些地区开始使用，由于受CM-BB以及其它不典型CK同工酶的干扰，测定结果易出现假阳性，故仅作筛选试验，最终以电泳法证实。近年发现CK-MM可分为不同的亚型：MM1，MM2和MM3。AMI时，心肌细胞释放出大最的MM3，血中亚型分布由原来的MM1为主改为MM3为主，常以MM3/MM1比值〉1.0诊断AMI，为早期使用溶栓疗法创造了条件。溶栓治疗后的再灌注，也可根据酶峰是否提前判断。再灌注组达到MM3/MM1峰值时间为4.2(±)1.8小时，明显早于对照组(11.8±3.2)，可能8小时为决定值。
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讨论指出，以酶学变化诊断AMI应进行态观察，单次测定不一定可靠。也提到CK-MM亚型变化并不特异，肌肉病弯时也可能有类似变化，如有可能应测定CK-MB亚型变化。
北京医院报告用Pharmacia的Phast System自动电泳仪作薄层凝胶等电点聚焦分离测定CK MM亚型，测定时间缩短为1小时。用此法对12例疑诊AMI患者进行测试，其中8例确诊为AMI，MM3/MM1，比值为9.0±5.0；另4例除外AMI诊断，其比值为0.2±0.1。两组间比较P〈0.01。江西宜春医学专科学校第二附属医院报告了“腺芏脱氨酶测定诊断伤寒的临床评价”，30例确诊伤寒患者腺芏脱氨酶都〉30U，最高为127U明显高于正常人(〈20U)。讨论认为伤寒时此酶升高和淋巴结病变有关，如传染性单核细胞增多症此酶活性也可增高，因此可作为辅助诊断。第三军医大学西南医院资料认为测定血浆中脯氨酸肽酶对诊断肝损伤具有较好的特异性和灵敏性，对慢性肝病的灵敏性明显优于谷丙转氨酶，是一项较理想的慢性肝损伤指标。
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内分泌测定与临床检验
一、内分泌测定
协和医院周学瀛作了“关于激素的测定”的中心发言。重点介绍了激素的放谢免疫测定(RIA)方法。RIA方法问世以来，由于其高灵敏度和高特异性，在内分泌学领域发挥了巨大的作用。用RIA方法能直接测定体液中各种激素水平，大大提高了临床内分泌的诊治水平，如通过测定生长激素、泌乳素、甲状腺素、甲状旁腺素、肾上腺皮质激素及胰岛素等水平，动态观察治疗效果；证实了女性激素、生长激素及皮质类固醇等的月节律及昼夜节律；发现了内分泌激素受体病(睾丸女性化、抗Vit DII 型佝偻病等)及依赖ACTH醛固酮增多症等。
根据RIA原理发展的方法有竞争性蛋白结合法(CPBA)、放射受体法(RRA)、免疫放射测定(IRMA)等。CPBA是利用体液中的激素蛋白代替抗体，RRA是利用激素靶细胞中的激素受体蛋白代替抗体，标记的都是抗原，RRA是直接测定激素的生物活性。为了避免使用γ放射性同位素所致的环境污染及对操作人员健康的影响，近年开发了用酶及荧光物质代替同位素标记的时间分辨免疫荧光方法，其灵敏度达到甚至超过RIA，而无放射性污染。浙江医科大学使用该法测定胰岛素，效果良好。
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RIA结果与临床不符的有前因素：(1)激素的免疫活性正常但生物性下降，或生物活性正常而免疫活性下降；(2)一些免疫活性相同的激素，其生物学功能不同(如FSH、LH、hCG及TSH)；(3)激素降解的分子片段有免疫活性而无生物活性；(4)药物及其他物质本身对激素的干扰；(5)疾病或某些异常情况对激素的产物或清除的影响。
讨论提出在甲状腺素放射免疫测定时应考虑甲状腺素结合蛋白可能带来的影响，肝脏疾病时可引起激素结合蛋白在肝内代谢的变化，从而影响对结果的评价。
二、临床检验
上海医科大学华山医院林果为作了题为“缺铁性贫血诊断指标及其评价”的中心发言，指出缺铁性贫血(IDA)系一症候，是内缺换的发展结果，最早是体内贮存铁耗尽(ID)，断之发生缺铁性红细胞生成(IDE)，最后才发IDA，以上三阶段总称为铁缺行之有效症。该症至今仍是世界各国普遍而重要的保健问题，高铖人群为妇女、婴幼儿和儿童。据上海医科大这各医院浒病学调查，IDA患病率6个月至2岁婴幼儿达33.8%～45.7，育龄妇女为11.4%，妊娠3个月以上妇女为19.3%，10～17岁青少年为9.8%。早期确诊并进行合理治疗将有铲地预防缺铁性贫血的发生。目前用于诊断铁缺乏症的参数有血清铁蛋白(SF)、红细胞碱性蛋白(EF)、血清铁(SI)、总铁结合力(TIBC)、运铁蛋白饱和度(TS)、红细胞游离原卟啉(EFP)、血液锌原卟啉(ZPP)及骨髓铁染色等。这些参数在反映缺铁的准确性及灵敏性等方面都有不同程度的局限性。
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骨髓可染铁的检查可反映网状内皮细胞中的贮铁情况，被认为是反映贮存铁的“金标准”。但由于骨髓检查是一种创伤性检查，早期诊断依从性不高。
从等级相关分析中发现SF和骨髓细胞内铁有很好相关性。通过ROC曲线分析表明采用TS、SF、EF和ZPP诊断缺铁，以SF准确度最高，同办如用以筛选铁缺乏症，以SF〈12～20μg/L。SF测定的最大问题是有些试剂盒质量不稳定，其次是结果易受其他病理状态干扰。EF由于较少受这些因素影响，故对非单纯性缺铁的诊断优于SF，但ROC曲线分析表明它对单纯性缺铁的诊断不及SF灵敏，故不适用于早期诊断。
SI作为缺铁指标有许多缺点，一天内不同时间测定有较大差异，且囫受外源失的污染。但TIBC则较稳定，经ROC曲线分析，SI对缺铁诊断准确度仅次于SF和EF，TS和骨髓细胞内铁的相关性和SF相似，只要操作时注意器皿的去铁处理，SI、TIBC和TS对临床鉴别缺铁、慢性病贫血和其它贮铁增多的贫血仍有实用价值。TS作为缺铁诊断的监界值是15%。
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正常情况下红细胞内非血红蛋白卟啉含量极微，其中10%为FEP，90%为ZPP。缺铁可造成非血红蛋白原卟啉在红细胞内大量积聚，因此FEP和ZPP升高可作为缺铁性红细胞生成(IDE)指标之一。因FEP和ZPP值可受多种因素影响，如铅接触、慢性病贫血等，故对缺铁诊断准确度比SF、EF和TS都要差。另外FEP和ZPP反映缺铁常较缓慢，缺铁数周后才增高，铁剂治疗血红蛋白恢复正常数周后才恢复正常。
对于诊断贫血的血红蛋白浓度，WHO制订的标准为男性〈130g/L，女性〈120g/L。上海对部分正常人群(排除了SF和ZPP异常者)用氰化高铁血红蛋白法测定血红蛋白值，95%范围下限，男性在116.2～122.4g/L，女性在109.7～111.4g/L，因此提出宜采用男性〈120g/L、女性〈110g/L作为国内贫血依断标准，并建议临床诊断贫血以打用国内标准为宜，而普查时可采用WHO和内内标准双重参数，以便国际学术交流。
讨论提出，一些较先进的血细胞计数仪能测出一种新的指标，即红细胞分布宽度(RDW)。国外认为这是一项很敏感的诊断缺铁性贫血指标，如RDW≤0.14，MCV≤80fl，可诊断为缺铁性贫血。我国由于仪器限制，使用不多。
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出凝血检查是临床血液学中很重要的一个方面。近年来使用了大量新技术和新方法。上海瑞金医院王鸿利对这些方法作了简要评价和展望。自1975年以来，杂交瘤工作取得了长足的进展，迄今国内外已有几百种单克隆抗体(McAb)应用于出凝血的研究和检测，大大推动了出凝血研究工作的发展。抗人血小板McAb已用于研究血小板膜糖蛋白的结构、功能以及有关受体位点、血小板的激活机制，并用于先天性血小板功能缺陷性疾病的诊断、血小板无力症的产前诊断和分型，以及巨核细胞异常性疾病的研究。在原发性血小板减省性紫癜(ITP)患者血清中发现抗血小板抗体的存在，从而证实ITP是一种自身免疫性疾病。单纯抗人血小板McAb的种类繁多，技术也较为复杂，但由于McAb灵敏度高、特异性强、精确度好，而且许多McAb已有试剂盒供应，使用也较方便，国内不少实验室已开始此项检查。
另一重要进展是发色底物法。本法优点是标本用量少，操作简便，测定迅速，且应用范围广，可测定酶原、酶、激活物、抑制特、辅因子和凝血酶原、ATIII、肝素、凝血因子VⅢ 、Ⅸ、X、Xa、激肽释放酶原、激肽释放酶、α2巨球收白和α1-抗胰蛋白酶等。测定由自动化仪器进行，适合大量标本的测定。但是，由于底物系人工合成，故其价格较贵。
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分子标志物是指体内各种凝血和纤溶因子从无活性的酶原向有活性的酶转变过程所释放的活性肽，血浆活性肽水平升高反映凝血或纤溶的变化。一般用放射免疫或酶标免疫法进行测定。这些检测法灵敏度高，特异性强，精确度好，但方法较为复杂，要求较高。若有试剂盒提供，可满足临床和科研的需要。
使用基因探针直接检测突变基因已用于抗凝血酶缺陷，α1-抗胰蛋白酶缺陷、Ehlers-Danlos综合征、因子X缺陷、血友病A和B等遗传性出凝血疾病的诊断和产前诊断。限制性片段长度多态性分析(RFLP)可用于基因的染色体定位、绘制染色体基因图、产前诊断和遗传病的诊断等。
由于应用了分子生物学技术，尤其是PCR技术的引入，使人们对血友病以及其他出凝血疾病的发病机理有了进一步的了解和认识，但有许多问题有待进一步解决，尚难以普及和应用。
讨论中河南焦作矿务局医院介绍自行研制的SL…体液镜检装置自动取粪标本涂片，取尿标本镜检，引起了与会者的兴趣。宁波市妇女儿童医院应用普通的CASIOfx-4000P计算器以四格表为基础设计了应用价值自动评价系统和χ(2)检验快速计算程序，应用比较方便。
(1991年7月27日收稿), http://www.100md.com
单位：中华医学杂志编辑委员会 临床检验杂志编辑委员会
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中华医学杂志920101 中华医学杂志编辑委员会与临床检验杂志委员会于1991年6月2日至4日在南京联合召开了临床检验新技术及其评价专题座谈会，会议代表100人，收到稿件380余篇，其中大会发言29篇，小组交流62篇。会议还邀请8位专家作了各专题的中心发言，受到与会同志的欢迎。现将会议座谈讲座的内容整理如下。
免疫与微生物
一、自身抗体
协和医学董怡首先作了题为“自身抗体在风湿性疾病的临床应用及前景”的中心发言。自身抗体是自身免疫病的重要实验室标记。在风湿(RO)病中有一组因免疫失调而产生多种自身抗体的弥漫性结缔病(CTD)。近年来抗核抗体谱、抗磷脂抗体、类风湿因子(RF)和抗中性粒细胞胞浆抗体(ACPA)等自身抗体检验技术的发展，大大推动了CTD的临床诊治工作。
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以鼠肝为底物、用间接免疫荧光法测定抗核抗体(FANA)是筛选CTD的最好试验，如结果阳性(≥1：20)就很可能属此类疾病。FANA是指针对细胞核内不同成分(如RNA、DNA及各种蛋白)而产生的一组抗体，这一系列的抗体统称为抗核抗体谱。不同的CTD有不同的抗核抗体谱，因此开展抗核抗体谱的测定有助于CTD分类的诊断。抗核抗体谱大致分为5类：(1)抗双链DNA抗体。(2)抗组蛋白抗体。(3)抗可溶性核抗原(ENA)抗体，抗SSA(RO)抗体，抗SSB(La)抗体，抗类风湿关节炎抗原(RANA)抗体，抗Scl-70抗体，抗PM-1抗体，抗JO-1和抗Ku抗体。(4)抗着丝点抗体。(5)抗核仁抗体。
近年通过免疫印迹法将细胞核内不同抗原按其分子量不同电泳成不同区带，然后转移到硝酸纤维薄条上，以测定抗核抗体谱。此法不仅准确度高，并可同时测定多种自身抗体。如同一条带上SSA及其相应抗体反区带在60000和52000处，抗u1RNP和抗Sm抗体分别在68000和24000处。这是一种很有发展前途的方法。
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发言中指出，我国抗核抗体谱的检验尚有下列需要改进之处：(1)各实验室所用的抗原、标准血清、方法学应标准化，保证质量。各实验室的标准血清应定期交换检测。抗原宜商品化。(2)在检测FANA、抗核仁抗体尤其是抗着丝点抗体时宜应用体外培养的细胞株(如HEP-2)为底物。(3)应以人工合成的抗原多肽来代替从生物提取的核抗原，因为后者不易提纯而影响其特异性。
抗磷脂抗体包括抗心磷脂(ACL)抗体及狼疮抗凝物(LAC)。多见于系统性红斑狼疮(SLE)及其他CTD，也可出现在恶性肿瘤、传染病患者。此类抗体阳性者临床可出现血管栓塞、血小板减少、习惯性流产或胎死宫内等，统称为抗磷脂抗体综合征。80年代以RIA和ELIA法测定ACL抗体，明显提高了敏感性。测定LAC有部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间、蛇毒时间、白陶土凝时间等，但敏感性都不如测ACL抗体的RIA、ELISA法。ACL抗体与FANA、抗DNA抗体、类风湿因子和低补体血症均无相关性，与抗磷脂抗体综合征明显相关。对ACL抗体的研究不仅有助于阐明SLE的血管病变的发病机制和临床表现，也为探讨其它疾病的栓赛现象揭示了方向。
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RF测定临床沿用已久。RF大正常人群中阳性率2%～3%，年过70岁者男女阳性率分别为14%和9%，但滴度不高，故实验测定应作滴度测定以免出现假阳性。判断时要结合临床，避免简单地作出RF(+)的关节痛就是类风湿关节炎(RA)的诊断，因CTD也常出现阳性。协和医院的材料表明RF的阳性率在RA为70%，SLE25%，干燥综合征(SS)50%，系统性硬化症(PSS)70%，MCTD(45%)。
ACPA是1985年由丹麦学者首先报道的自身抗体。它出现在27例Wenger肉芽肿(WG)患者中25例的血清中，并与此病的活动性相关，抗体滴度的升降较其它指标和血沉、C反应蛋白更为敏感。本抗体检出改变了以往血管炎无特异性自身抗体的观点，并为今后血管炎分类提供了免疫学基础。国内已在多个单位建立了此抗体的测定方法，有待于积累更多临床资料和经验。
北京协和医院介绍积10年的临床资料证明FANA测定是筛选CTD最有效的试验。FANA阳性率在SLE、SS、PSS、DN/PM、MCTD及RA分别为90%～100%、40%～50%、50%～70%、40%～50%、90%～100%和20%～25%。抗双链DNA抗体和抗Sm抗体是SLE的标志抗体，其阳性率分别为65%和25%。抗SSB为SS的椟志抗体，阳性率为80%，抗Scl-70、抗着丝点抗体和抗核仁抗体为PSS的标志抗体、阳性率分别为60%、20%和38%，抗JO-1及抗PM-1抗体则为肌炎的标志抗体，阳性率各为25%左右。因此抗核体谱检测对诊断CTD有特异性。此外，抗双链DNA抗体为疾病活动性的指标；抗组蛋白抗体见于50%服用异烟肼的患者，揭示某些药物可导致自身免疫性。上海仁济医院应用免疫印迹法从分子水平检测抗核抗体谱，用一条宽2mm的硝酸纤维薄膜可同时检出6种抗体(抗RNP、Sm、SSA、SSB、Scl-70和JO-1抗体)，并发现新抗体——抗核糖体抗体。认为本法除敏感性与免疫扩散法相似外，还具有快速、简便的优点。他们还介绍了在免疫印迹法减少非特异性多肽带的经验，包括改用pH8、0.3%Tween，0.6%NaCl的洗涤液等。首都儿科研究所提出用滤纸夹芯技术技术检测硝酸纤维素膜上的抗原，可大大节省试剂的用量及时间。北京协和医院用免疫双扩散法对楷了人脾、小牛胸腺、猪脾中ENA抗原性，结果人脾中Sm、RNP、SSA及SSB的含量均很丰富，基次为小牛胸腺，而在猪脾中SSA和SSB含量几乎为0，表明ENA的抗原性在不同的组织不完全相同。上海仁济医院资料表明女性SLE患者活动期外周血白细胞雌激素受体含量明显高于静止期及正常人，揭示SLE的活动性可能与该受体的增高密切相关。北京铁路总医院进行了外周血免疫抑制细胞活性测定，资料表明在SLE(6例)、RA(2例)和再生障碍性贫血(6例)的抑制率均低于正常人。上海医科大学肿瘤研究所报告了大肠癌患者外周血T淋巴细胞亚群的变化，认为随癌的病期和病理而变化，病情加重下T4细胞下降、T5细胞增多、T4/T5比值明显下降而倒置。免疫球蛋白同属于非特异性免疫指标，只在少数特定的情况下方有其诊断意义，只能作为同一患者不同阶段的自身比较，此外，病变局部组织淋巴细胞亚型的变化较外周血中的变化可能更有意义。ACPA是WG的特异性抗体，北京协和医院对4例WG患者进行检测，3例阳阳，其滴度随病情升降，25名正常人和81例其他疾病患者均为阴性。本抗体阳性与抗核抗体阳性两者无交叉反应。他们用ELISA法测ACL抗体，在SLE中的阳性率为30%，凡抗体阳性者其中枢神经系统病弯、血小板较少、血管栓塞及自然流产的发生均较抗体阴性者高，并提出抗体与SEL的血管炎病变密切相关。吉林医学院72例SLE患者血清抗F(ab)'2片段抗体测定的资料表明，在SLE缓解基不论用正常人IgG和F(ab)'2或纯化的抗DNA-F(ab)'2片段包被，其抗体滴度都高于活动期及正常人，提出此结果可用独特型与其抗体网络的免疫调节学说解释。北京协和医院还用点-免疫结合技术检测RF，提高了阳性率(由乳胶凝集法的36%提高到59%)，并可检测IgM、IgG及IgA RF，其敏感性与ELISA法基本相同。
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二、聚合酶链反应(PCR)
北京医科大学肝病研究所陈伟然作了题为“PCR技术临床应用的评价”的中心发言。PCR是一种体外扩增DNA的方法，它可能测出标本中非常微量的核酸。其基本过程是，先人工合成2个ssDNA分别与和其有互补序列的正负链结合，在4种三磷酸脱氧核苷酸和1种耐热的多聚酶存在下，结合于DNA链上的引物后DNA变性，引物再次结合及增长，形成新的同种DNA。不断重复此循环，DNA也不断增殖。PCR产物可能用向种方法检测，最简便的方法是直接进行剂胶电泳，经EB染以后在紫外光下观察，但如起始剂量非常小，就必须采用更敏感的Southern blot或bot blot法。用特异的序列进行分子杂交，或用标记的寡聚核苷酸与PCR产物进行液相杂交，然后进行凝胶电泳和放射自显影。PCR最初用于诊断镰刀状红细胞贫血症，继之用于人类遗传学的各个领域。PCR检测的第一种病毒为HIV，然后是HBV。此法还被大量用于扩增HCV RNA的逆转录产物，可用于临床检测丙型病毒性肝炎。高度灵敏性是本法的最大优点，检测HBV DNA时，检出水平可达130基因组/ml血清。通过这种新技术，现在我们知道，原认为外周血中病毒颗粒已清除的患者，实际上还是HBV DNA阳性；HBsAg阳性的患者，几乎全为HBV DNA阳性。Sumagaki等曾在抗HBc阳性的血也会感染HBV。PCR方法还证实了抗HBs抗体的出现标志着感染的终结，因为这时PCR已检测不到HBV DNA的存在。HCV病毒颗粒很难用免疫学方法检出，目前应用第二次PCR法，即第一次PCR产物的一部分用来作第二次PCR，由于二次引物不同，可以有效地降低本底和提高特民性。由于PCR扩增效率非常高，操作时混入任一个外源模板都可能使结果出现阳性，因此所用度剂必须是高纯度的，所用材料应是一次性的，需带手套工作，并一定要设合适的阴性和阳性对照。对防止污染的要求高可能是PCR方法用作临床检验的最大障碍。
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302医院介绍了PCR技术在肝炎患者HBV DNA检测中的应用，对32例急慢性肝炎患者应用PCR法检测HBV DNA，并与ELISA法检“二对半”的结果进行对比，在8例“二对半”全阴性患者中，5例PCR结果为阴性，还发现有一些病例HBV DNA和抗体并存。提出应对“抗HBV尤其是抗HBs出现即意味着传染必消失”的认识进行修正或补充。北京医科大学肝病研究所陈伟然发言不同意这一论断，他们对100余例抗HBs阳性患者用PCR法无一例查出HBV DNA，并指出所用引物可能不太合适。讲座中认为PCR在技术上是一个很大进展，为病因学、遗传学等研究提供了一个有力的手段，但由于技术要求高，就用天临床常规实验室还有待进一步完善与提高。
三、细菌学
北京协和医院陈民钧作了题为“细菌室工作在医院感染控制中的作用”的中心发言。首先概述了医院细室室的几个方面工作：(1)监视标本质量，因为不正确的采样、输送和保存标本，将导致培养分离结果的错误。(2)准确地鉴定微生物及其药敏试验。(3)及时报告结果，密切临床联系。(4)保留记录，定期总结。(5)建立各自医院的菌谱及药敏谱。(6)帮助医院感染控制(HIC)委员会研究医院感染的各种特殊问题。重点介绍了WHO推荐的常规药敏试rby Bauer纸片扩散法，特点为用M-H低胸腺嘧啶培养基，琼脂厚度为4mm，每小纸片应含规定浓度抗生素，合理保存，用纯的1.5亿/ml的菌液涂布，用卡尺测量在纸片周围形成的抑菌圈，按WHO规定的S-R范围判定耐药与敏感性。为了保证结果可靠，用ATCC(美国菌种收集中心)提供的大肠杆菌，每周对上述试验条件进行质控监测。在紧急情况时对无数据的新药可用(标准株对比法)得出可靠结果。为了指导合理用药，建议定期(每半年或1年)总结及公布常见菌株的药敏谱。
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关于菌种鉴定，革兰(+)及革兰(-)化脓性球菌可用双歧鉴定法，肠矸菌科宜用多种系列化反应组合的数码分析法，国内市场的商品质量不一，要慎重选用。不发酵糖类细菌，数码分析的商品质量不稳定，需用双歧鉴定法。
对疑有污染的物品，诸如输血、输液及其装置，透析液，呼吸机近端及湿化瓶，器械皿内消毒液，婴儿浴液及高压锅等进行细菌学监测，应用国际承认的标准方法，不应对标本行增菌后鉴定菌种及计数。
会上对标准敏感株如何在实验室中保存，防止变民以及条件致病菌中哪些菌具有传染性等问题进行了讨论。
肿瘤标志物与生化酶学
一、肿瘤标志物
江苏省临床检验中心王毓三作了题为“肿瘤生化标志物的研究进展”的中心发言，较全面论述了肿瘤标志物的概念以及在筛选患者，诊断和治疗的用途，指出诮用杂交瘤技术和酶免疫测定方法检测和鉴定肿瘤标志物，表明肿瘤标志物的研究已进入第三时期。
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甲胎蛋白(AFP)是国内外研究较多的肿瘤标志物，如AFP〉400μg/异时，极可能是原发性肝癌(PHC)，但约有30%PHC患者的AFP不升高，是目前临床诊断上一大难题。用植物凝集素可分出9种AFP异质体，用ConA测定的AFP异南体有助于区分PHC、胚胎性肿瘤及转移性肝癌，但无法鉴别良性肝脏疾病。上海长海医院肝病研究所屠振兴报告用豌豆凝素测定AFP异质体，并对28例AFP〉20但〈400μg/L的患者进行前瞻性研究的结果。以AFP异质体超体总AFP的25%为阳性，18例阳性者中17例在首次测定后3～28个月经手术病理检查或临床确诊为PHC，AFP异质体诊断的正确率为94.4%；但在10例阴性者中，也有9例经手术或临床诊断为PHC。因此，AFP异质体测试阴性并不能除外PHC。讨论中提出以单克隆血清的免疫化学测定法替代双向免疫电泳测定法的问题。长海医院目前已制备出此种单克隆抗血清，但测定方法有待完善，并正在进行临床观察。上海医科大学首次报道用M(2)型丙酮酸激酶诊断PHC，阳性率为95.2%，可望成为一个有价值的肿瘤标志物。江苏省肿瘤研究后王毓三观察了α-L岩藻糖芏酶的变化，132例PHC患者活性为305(±)151U/L。如以AFP〉200μg/L为阳性，PHC患者阳性率为64.4%，若辅以本酶测试，则阳性率为90.5%。有讨论发言中都强调了多种标志物的联合应用，以提高诊断阳性率。
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中心发言还介绍了神经元特烯醇化酶在诊断神经平细胞瘤和肺小细胞癌中的价值。前者阳性率为90%～100%，后者为65%～85%，目前国内已在研制此项测试试剂盒，有可能近期推广使用。卵巢肿瘤相关抗原CA125诊断符合率达90%，是另一个目前受重视的肿瘤标志物。
对南通市肿瘤医院用超薄PAGE垂直平板电泳测定金属离子结合蛋白诊断恶性肿瘤，以及湖北仙桃市胡场卫生院用尿液碘化钾试验筛选肿瘤患者，讨论中认为对这些试验还有待于进一步临床观察方能作出正确评价。
二、生化酶学
北京医院杨振华作了题为“无Q波急性心肌梗塞和溶栓治疗时的酶学变化”的中心发言。由于部分急性心肌梗塞(AMI)患者的心电图不出现特异Q波，此型AMI诊断常需进行一些酶学检查。总酶活性检查特异性不高，尤其乳酶脱氢酶(LD)和谷草转氨酶(AST)价值不大，因为红细胞内富含这些酶，溶血标本易出现假阳性。不少学者认为对怀疑AMI患者只测肌酸激酶(CK)总活性即可，但部分AMI患者CK变化不大，其最高值可能不超过参考值上限。Vladutm经1214例AMI患者加顾性研究，建议，可疑AMI在首次查CK后8和16小时抽血复查，如上升〉10%，就应严密加以观察。CK-MB是诊断AMI的“金标准”，常用测定方法除经典的电泳法外，还有免疫抑制法和单克隆抗体免疫化学测定法。免疫抑制法正在我国一些地区开始使用，由于受CM-BB以及其它不典型CK同工酶的干扰，测定结果易出现假阳性，故仅作筛选试验，最终以电泳法证实。近年发现CK-MM可分为不同的亚型：MM1，MM2和MM3。AMI时，心肌细胞释放出大最的MM3，血中亚型分布由原来的MM1为主改为MM3为主，常以MM3/MM1比值〉1.0诊断AMI，为早期使用溶栓疗法创造了条件。溶栓治疗后的再灌注，也可根据酶峰是否提前判断。再灌注组达到MM3/MM1峰值时间为4.2(±)1.8小时，明显早于对照组(11.8±3.2)，可能8小时为决定值。
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讨论指出，以酶学变化诊断AMI应进行态观察，单次测定不一定可靠。也提到CK-MM亚型变化并不特异，肌肉病弯时也可能有类似变化，如有可能应测定CK-MB亚型变化。
北京医院报告用Pharmacia的Phast System自动电泳仪作薄层凝胶等电点聚焦分离测定CK MM亚型，测定时间缩短为1小时。用此法对12例疑诊AMI患者进行测试，其中8例确诊为AMI，MM3/MM1，比值为9.0±5.0；另4例除外AMI诊断，其比值为0.2±0.1。两组间比较P〈0.01。江西宜春医学专科学校第二附属医院报告了“腺芏脱氨酶测定诊断伤寒的临床评价”，30例确诊伤寒患者腺芏脱氨酶都〉30U，最高为127U明显高于正常人(〈20U)。讨论认为伤寒时此酶升高和淋巴结病变有关，如传染性单核细胞增多症此酶活性也可增高，因此可作为辅助诊断。第三军医大学西南医院资料认为测定血浆中脯氨酸肽酶对诊断肝损伤具有较好的特异性和灵敏性，对慢性肝病的灵敏性明显优于谷丙转氨酶，是一项较理想的慢性肝损伤指标。
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内分泌测定与临床检验
一、内分泌测定
协和医院周学瀛作了“关于激素的测定”的中心发言。重点介绍了激素的放谢免疫测定(RIA)方法。RIA方法问世以来，由于其高灵敏度和高特异性，在内分泌学领域发挥了巨大的作用。用RIA方法能直接测定体液中各种激素水平，大大提高了临床内分泌的诊治水平，如通过测定生长激素、泌乳素、甲状腺素、甲状旁腺素、肾上腺皮质激素及胰岛素等水平，动态观察治疗效果；证实了女性激素、生长激素及皮质类固醇等的月节律及昼夜节律；发现了内分泌激素受体病(睾丸女性化、抗Vit DII 型佝偻病等)及依赖ACTH醛固酮增多症等。
根据RIA原理发展的方法有竞争性蛋白结合法(CPBA)、放射受体法(RRA)、免疫放射测定(IRMA)等。CPBA是利用体液中的激素蛋白代替抗体，RRA是利用激素靶细胞中的激素受体蛋白代替抗体，标记的都是抗原，RRA是直接测定激素的生物活性。为了避免使用γ放射性同位素所致的环境污染及对操作人员健康的影响，近年开发了用酶及荧光物质代替同位素标记的时间分辨免疫荧光方法，其灵敏度达到甚至超过RIA，而无放射性污染。浙江医科大学使用该法测定胰岛素，效果良好。
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RIA结果与临床不符的有前因素：(1)激素的免疫活性正常但生物性下降，或生物活性正常而免疫活性下降；(2)一些免疫活性相同的激素，其生物学功能不同(如FSH、LH、hCG及TSH)；(3)激素降解的分子片段有免疫活性而无生物活性；(4)药物及其他物质本身对激素的干扰；(5)疾病或某些异常情况对激素的产物或清除的影响。
讨论提出在甲状腺素放射免疫测定时应考虑甲状腺素结合蛋白可能带来的影响，肝脏疾病时可引起激素结合蛋白在肝内代谢的变化，从而影响对结果的评价。
二、临床检验
上海医科大学华山医院林果为作了题为“缺铁性贫血诊断指标及其评价”的中心发言，指出缺铁性贫血(IDA)系一症候，是内缺换的发展结果，最早是体内贮存铁耗尽(ID)，断之发生缺铁性红细胞生成(IDE)，最后才发IDA，以上三阶段总称为铁缺行之有效症。该症至今仍是世界各国普遍而重要的保健问题，高铖人群为妇女、婴幼儿和儿童。据上海医科大这各医院浒病学调查，IDA患病率6个月至2岁婴幼儿达33.8%～45.7，育龄妇女为11.4%，妊娠3个月以上妇女为19.3%，10～17岁青少年为9.8%。早期确诊并进行合理治疗将有铲地预防缺铁性贫血的发生。目前用于诊断铁缺乏症的参数有血清铁蛋白(SF)、红细胞碱性蛋白(EF)、血清铁(SI)、总铁结合力(TIBC)、运铁蛋白饱和度(TS)、红细胞游离原卟啉(EFP)、血液锌原卟啉(ZPP)及骨髓铁染色等。这些参数在反映缺铁的准确性及灵敏性等方面都有不同程度的局限性。
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骨髓可染铁的检查可反映网状内皮细胞中的贮铁情况，被认为是反映贮存铁的“金标准”。但由于骨髓检查是一种创伤性检查，早期诊断依从性不高。
从等级相关分析中发现SF和骨髓细胞内铁有很好相关性。通过ROC曲线分析表明采用TS、SF、EF和ZPP诊断缺铁，以SF准确度最高，同办如用以筛选铁缺乏症，以SF〈12～20μg/L。SF测定的最大问题是有些试剂盒质量不稳定，其次是结果易受其他病理状态干扰。EF由于较少受这些因素影响，故对非单纯性缺铁的诊断优于SF，但ROC曲线分析表明它对单纯性缺铁的诊断不及SF灵敏，故不适用于早期诊断。
SI作为缺铁指标有许多缺点，一天内不同时间测定有较大差异，且囫受外源失的污染。但TIBC则较稳定，经ROC曲线分析，SI对缺铁诊断准确度仅次于SF和EF，TS和骨髓细胞内铁的相关性和SF相似，只要操作时注意器皿的去铁处理，SI、TIBC和TS对临床鉴别缺铁、慢性病贫血和其它贮铁增多的贫血仍有实用价值。TS作为缺铁诊断的监界值是15%。
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正常情况下红细胞内非血红蛋白卟啉含量极微，其中10%为FEP，90%为ZPP。缺铁可造成非血红蛋白原卟啉在红细胞内大量积聚，因此FEP和ZPP升高可作为缺铁性红细胞生成(IDE)指标之一。因FEP和ZPP值可受多种因素影响，如铅接触、慢性病贫血等，故对缺铁诊断准确度比SF、EF和TS都要差。另外FEP和ZPP反映缺铁常较缓慢，缺铁数周后才增高，铁剂治疗血红蛋白恢复正常数周后才恢复正常。
对于诊断贫血的血红蛋白浓度，WHO制订的标准为男性〈130g/L，女性〈120g/L。上海对部分正常人群(排除了SF和ZPP异常者)用氰化高铁血红蛋白法测定血红蛋白值，95%范围下限，男性在116.2～122.4g/L，女性在109.7～111.4g/L，因此提出宜采用男性〈120g/L、女性〈110g/L作为国内贫血依断标准，并建议临床诊断贫血以打用国内标准为宜，而普查时可采用WHO和内内标准双重参数，以便国际学术交流。
讨论提出，一些较先进的血细胞计数仪能测出一种新的指标，即红细胞分布宽度(RDW)。国外认为这是一项很敏感的诊断缺铁性贫血指标，如RDW≤0.14，MCV≤80fl，可诊断为缺铁性贫血。我国由于仪器限制，使用不多。
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出凝血检查是临床血液学中很重要的一个方面。近年来使用了大量新技术和新方法。上海瑞金医院王鸿利对这些方法作了简要评价和展望。自1975年以来，杂交瘤工作取得了长足的进展，迄今国内外已有几百种单克隆抗体(McAb)应用于出凝血的研究和检测，大大推动了出凝血研究工作的发展。抗人血小板McAb已用于研究血小板膜糖蛋白的结构、功能以及有关受体位点、血小板的激活机制，并用于先天性血小板功能缺陷性疾病的诊断、血小板无力症的产前诊断和分型，以及巨核细胞异常性疾病的研究。在原发性血小板减省性紫癜(ITP)患者血清中发现抗血小板抗体的存在，从而证实ITP是一种自身免疫性疾病。单纯抗人血小板McAb的种类繁多，技术也较为复杂，但由于McAb灵敏度高、特异性强、精确度好，而且许多McAb已有试剂盒供应，使用也较方便，国内不少实验室已开始此项检查。
另一重要进展是发色底物法。本法优点是标本用量少，操作简便，测定迅速，且应用范围广，可测定酶原、酶、激活物、抑制特、辅因子和凝血酶原、ATIII、肝素、凝血因子VⅢ 、Ⅸ、X、Xa、激肽释放酶原、激肽释放酶、α2巨球收白和α1-抗胰蛋白酶等。测定由自动化仪器进行，适合大量标本的测定。但是，由于底物系人工合成，故其价格较贵。
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分子标志物是指体内各种凝血和纤溶因子从无活性的酶原向有活性的酶转变过程所释放的活性肽，血浆活性肽水平升高反映凝血或纤溶的变化。一般用放射免疫或酶标免疫法进行测定。这些检测法灵敏度高，特异性强，精确度好，但方法较为复杂，要求较高。若有试剂盒提供，可满足临床和科研的需要。
使用基因探针直接检测突变基因已用于抗凝血酶缺陷，α1-抗胰蛋白酶缺陷、Ehlers-Danlos综合征、因子X缺陷、血友病A和B等遗传性出凝血疾病的诊断和产前诊断。限制性片段长度多态性分析(RFLP)可用于基因的染色体定位、绘制染色体基因图、产前诊断和遗传病的诊断等。
由于应用了分子生物学技术，尤其是PCR技术的引入，使人们对血友病以及其他出凝血疾病的发病机理有了进一步的了解和认识，但有许多问题有待进一步解决，尚难以普及和应用。
讨论中河南焦作矿务局医院介绍自行研制的SL…体液镜检装置自动取粪标本涂片，取尿标本镜检，引起了与会者的兴趣。宁波市妇女儿童医院应用普通的CASIOfx-4000P计算器以四格表为基础设计了应用价值自动评价系统和χ(2)检验快速计算程序，应用比较方便。
(1991年7月27日收稿), http://www.100md.com