利用特异性寡核苷酸探针检测IgA肾病HLA-DR基因频率及其临床意义
作者：陈香美 柏立群 程庆砾 伊藤巧一 小幡文弥
单位：(中国人民解放军总医院肾内科，100853)陈香美 柏立群 程庆砾；(日本北里大学医学部)伊藤巧一 小幡文弥
关键词：基因频率；寡核苷酸；探针；肾小球肾炎，IgA
中华医学杂志920405
摘要 利用聚合酶链反应技术及特异性寡核苷酸作为探针检测了255名中国北方汉族正常人及30例IgA肾病患者的HLA-DR基因频率的分布、发现中国北方汉族正常人群以DR2、DR7、DR9的频率较高，而IgA肾病患者DRw12基因频率明显增高，并且发现DRw12基因频率在IgA肾病伴大量蛋白尿及反复肉眼血尿者中明显增高，认为DRw12等位基因可能与IgA肾病的遗传因素有关。
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IgA肾病是一组以系膜区具有IgA沉积为免疫病理特征的临床症候群，其临床表现多样化，组织学改变轻重不一，预后也相差甚远，其发病机理不十分清楚[1]。近年来，随着分子生物学技术的广泛应用，国际上认为IgA肾病多种表现形式可能与遗传因素有关[2，3]。我们利用聚合酶链反应(PCR)技术扩增DNA片段，利用30种特异性寡核苷酸(SSO)探针检测了255名中国北方汉族正常人和30例IgA肾病患者HLA-DR基因频率的分布，探讨了IgA肾病不同临床表现及病理改变程度的HLA-DR基因频率分布，从遗传学的角度分析和探讨了IgA肾病的发病机理。
材料与方法
一、一般资料
1、IgA肾病组：30例IgA肾病患者随机选自本科住院病人，经肾活检光镜及免疫荧光显微镜检确诊并除外紫癜性肾炎、乙肝相关性肾炎等继发性IgA肾病。患者均为北京地区汉族人。男19例、女11例，平均年龄29.8岁。
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2、对照组：255名北京地区汉族正常人(由军事医学科学院中心血站提供)。男133名、女122名，平均年龄31.2岁。
二、外周血淋巴细胞DNA的提取
取正常人及IgA肾病患者肝素抗凝血3ml，室温下2000r/min离心5分钟，吸取白细胞层，以1×TEN(1 mol/LTris*Hcl+5mol/LNaCl+0.5mol/LEDTA)以及10%SDS(十二烷基磺酸钠)混合振荡，加入蛋白酶K(PK1mg/ml)30μl，37℃振荡过夜。加入等量酚氯仿混合液充分混匀，4000r/min离心5分钟，反复2次，取上清加二倍无水乙醇混匀，可见DNA呈线状析出，离心弃上清后加70%乙醇洗2次，真空干燥20分钟，溶于300μl Tris盐酸EDTA液(TEpH8.0)，以紫外分光光度计检测DNA含量。
三、利用PCR技术扩增DNA片段
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取DNA样品1μg加10×高温聚合酶(Taq酶)缓冲液5μl、5mmol/LdNTP2μl、10μmol/L引物P1、P22.5μl，然后加双蒸水至终体积为49μl，充分混匀后，以98℃5分钟使DNA变性后加入1μl高温DNA聚合酶，覆盖40μl矿物油(Sigma产品)，在PCR-DNA扩增仪上开始以下反应：95℃100秒，55℃100秒、72℃180秒，重复29个循环，将扩增后的DNA片段在2%琼脂糖凝胶上电泳，检测扩增效果。
四、特异性寡核苷酸(SSO)探针的制备
采用Biosearch Cyclone DNA合成仪合成本组实验所用的30钟SSO[4]。合成SSO探针的引物序列为：P1：[5'-AGTGTCATTTCTTCAA(TC)GGGACGGA-3']及P2：[5'-CGCTGCACTGTGAAGCTCTC-3'][5]，均按文献报道合成[6，7]。SSO探针用32P-rATP标记，标记液为5×T4激酶缓冲液2μl、32P-rATP 1μl、T4激酶0.2μl、蒸馏水1.8μl、在尼龙膜上用6×SSC(0.9molNaCl+0.09mol柠檬酸钠)、10%SDS洗脱，制成探针备用。
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五、斑点杂交
将扩增后的DNA样品经0.4mol/LNaOH变性后点于尼龙膜上，80℃2小时后置于试管中，加入预杂交液，37℃30分钟后加入32P-rATP标记的SSO探针，37℃1.5小时后洗膜，取出自然凉干后压片，-70℃48小时后放射自显影。洗膜温度根据不同探针分别选择54℃、57℃、62℃。
六、统计学方法
本组x2值计算采用Yate's校正x2值计算公式，x2>3.84者按Fisher法求P值。Pc校正值等于P值乘以试验系统所比较的抗原数[8]。
附图 提取的DNA经PCR扩增后PCR产物在238bp处有明显条带
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结 果
一、中国北方汉族正常人及IgA肾病DRβ亚型等位基因分布的比较
提取的DNA经PCR扩增后在238bp处有明显条带(附图)中国北方汉族正常人群以DR2、DR7、DR9基因频率较高，DR2阳性者108例，基因频率18.7%，DR7阳性者74例(29%)，DR9阳性者63例(12.3%)。而IgA肾病DRw12阳性者11例(18.3%)、Dw2阳性者8例(13.3%)，DR7阳性者6例(10%)，二者所不同的是IgA肾病DRw12频率明显增高(27.3%)。
二、按照第三届亚洲大洋州组织相容讨论会HLA分型对IgA肾病与正常人HLA-DR频率比较
, 百拇医药
与正常人群比较，IgA肾病的DRw12基因频率明显增高(表1)，统计学处理差异有非常显著意义(Pc<0.0008)。
三、IgA肾病不同临床表现与正常人群DRw12基因频率的比较(表2)
以24小时尿蛋白定量大于2.0g定为大量蛋白尿组、其与正常人比较DRw12基因频率明显增高(pc<0.0003)。反复肉眼血尿组DRw12频率也明显高于正常人(Pc<0.0011)。
四、不同程度临床症状患者DRw12频率的比较
大量蛋白尿组DRw12基因频率为58.3，非大量蛋白尿组DRw12基因频率为22.2，二组比较无显著差异(Pc<0.05)。肉眼血尿组DRw12基因频率为71.4，非肉眼血尿组DRw12基因频率为26.1，二组比较Pc<0.05，但校正P值>0.05。
, 百拇医药
五、IgA肾病病理改变与HLA-DR基因频率的关系(表3)
按照Kobayashi等[9]的方法将组织病变按有无系膜细胞增殖、系膜基质增宽、粘连、全球硬化、新月体、小管病变、间质病变等7项计分为0～21分，以8分为标准为分两组，病理积分8分以上组DRw12基因频率为52.6%，高于对照组(9.1%)，但经过校正后Pc>0.05。
表1 IgA肾病与正常人HLA-DR抗原频率的比较 HLA抗原
IgA肾病组
对照组
x2值
P值
, 百拇医药
校正P值
相对风险
阳性数
频率
阳性数
频率
DR1
3
10
10
3.9
1.096
>0.05
, 百拇医药
>0.05
2.72
DR2
8
26.7
108
42.4
2.125
>0.05
>0.05
0.49
DR3
, 百拇医药 2
6.7
22
8.6
0.003
>0.05
>0.05
0.76
DR4
5
16.7
46
18
, 百拇医药
0.004
>0.05
>0.05
0.91
DRw11
3
10
30
11.8
0.0003
>0.05
>0.05
0.83
, 百拇医药
DRw12
11
36.7
20
7.8
20.127
<0.00006
<0.0008
6.80
DRw13
2
6.7
, 百拇医药 24
9.4
0.025
>0.05
>0.05
0.69
DRw14
5
16.7
26
10.2
0.588
>0.05
, http://www.100md.com
>0.05
1.76
DR7
6
20
74
29
0.681
>0.05
>0.05
0.61
DR8
3
, http://www.100md.com
10
26
10.2
0.082
>0.05
>0.05
0.98
DR9
5
16.7
63
24.7
0.564
, 百拇医药
>0.05
>0.05
0.61
DR10
0
0
5
2
0.001
>0.05
>0.05
0.76
DR空白
, 百拇医药
7
23.3
34
13.3
1.443
>0.05
>0.05
1.98
表2 IgA肾病不同临床表现与正常人DRw12频率比较
组别
n
阳性数
, 百拇医药
频率
x2值
P值
校正P值
相对风险
正常人组
255
20
7.8
大量蛋白尿组
12
7
58.3
, 百拇医药
28.73
<0.000026
<0.0003
16.45
肉眼血尿组
7
5
71.4
24.97
<0.000095
<0.0011
15.67
表3 IgA肾病病理改变与HLA-DR频率的关系
, 百拇医药
HLA抗原
病理记分<8 (n=11)
病理记分≥8 (n=19)
x2值
P值
校正P值
相对风险
阳性数
频率
阳性数
频率
DR1
, 百拇医药
2
18.2
1
5.3
0.255
>0.05
>0.05
0.25
DR2
3
27.3
5
26.3
, 百拇医药
0.138
>0.05
>0.05
0.95
DR3
1
9.1
1
5.3
0.126
>0.05
>0.05
0.56
, 百拇医药
DR4
3
27.3
2
10.5
0.459
>0.05
>0.05
0.31
DRw11
0
0
3
, http://www.100md.com
15.8
0.574
>0.05
>0.05
4.88
DRw12
1
9.1
10
52.6
3.967
<0.019
>0.05
, http://www.100md.com
11.1
DRw13
1
9.1
1
5.3
0.126
>0.05
>0.05
0.56
DRw14
1
9.1
, http://www.100md.com
3
15.8
0.001
>0.05
>0.05
1.88
DR7
3
27.3
3
15.8
0.081
>0.05
, 百拇医药
>0.05
0.5
DR8
1
9.1
2
10.5
0.255
>0.05
>0.05
1.18
DR9
3
, http://www.100md.com
27.3
2
10.5
0.459
>0.05
>0.05
0.31
DR10
0
0
0
0
0
, 百拇医药
>0.05
>0.05
1
DR空白
2
18.2
4
21.1
0.081
>0.05
>0.05
1.2
讨 论
, 百拇医药
HLA系统具有严格的遗传性，HLA-DR抗原是人类疾病的一个重要相关抗原，它主要存在于人B淋巴细胞、单核细胞及内皮细胞、与机体免疫调节功能十分密切，人类肾小球疾病与HLA-DR抗原相关联，IgA肾病的临床表现及HLA-DR抗原频率分布存在地域性及种族差异[1]，国外有人报道IgA肾病DR4频率明显增高[3]，国内有人利用微量淋巴毒细胞方法报道IgA肾病与DR7、DR4、DR5相关联[10]。为了从基因水平上探讨HLA-DR抗原与IgA肾病的关系，本组采用PCR技术扩增正常人及IgA肾病患者外周血淋巴细胞DNA片段，利用SSO探针检测了其HLA-DR基因频率，结果显示中国北方汉族正常人Dw2占21.2%、DR7占29.2%，DR9占24.7%，与日本伊藤氏等[4]用同样方法测定的日本正常人HLA-DR基因频率分布比较，中国人的DR7较日本人明显增高，说明中国人与日本人同属亚洲地区，大部分HLA-DR基因频率是一致的，但由于种族不同，个别基因频率分布存在差异。
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按照第三届亚洲大洋州组织相容讨论会对HLA-DR的分型，本组所检测的IgA肾病中DRw12基因频率明显高于正常人，说明中国北方汉族人的IgA肾病以DRw12基因占优势。这一结果与台湾Huang[11]的结果相似，但与日本报道不同，日本报道IgA肾病以DR4最为常见[3]。说明在IgA肾病HLA-DR基因频率分布上可能也存在种族差异。本组实验还比较了大量 蛋白尿患者及反复肉眼血尿患者与正常人的DRw12频率，二者差异非常显著。目前关于肉眼血尿与IgA肾病预后的判断结论不一，因此，DRw12频率在肉眼血尿组增高可能与大量蛋白尿一样反映了IgA肾病病理改变的加重与DRw12有一定的关联。为此，我们比较了病理改变轻重两组IgA肾病DRw12基因频率的分布，结果病变重组DRw12频率较病变轻组有增高的趋势，经统计学处理无显著差异，所以DRw12与IgA肾病病理改变的关系尚不能作出结论，需增加检测例数。由上述结果看出IgA肾病的DRw12频率明显增高，提示DRw12与IgA肾病的遗传因素有关联，但是否DRw12为IgA肾病的遗传易感因素尚需进行IgA肾病患者的家系调查。
, 百拇医药
参考文献
1 黎磊石，等。我国的系膜性IgA肾病，中华肾脏病杂志 1989；5：49。
2 Berthoux F C, et al. HLA-Bw 35 and mesangial IgA glomerulonephritis. N Engl J Med 1978; 298:1304.
3 HiKi Y, et al. Strong association of HLA-DR 4 with benign IgA nrphropathy. Nephron 1982; 32:222.
4 Fumiya Obata, et al. HLA-DR gene frequencies in the Japanese population obtained by oligonucleotide genotyping Tissue Antigens 1991;38:124.
, 百拇医药
5 Obata F, et al. Oligonucleotide genotyping as a method of detecting the HLA-DR2 (DRw15)-Dw2, DR2 (DRw15)-Dw12,DR4-Dw15and DR4-d “KT2”haptotypes in the Japanese population. Tissue Antigens 1989;33:550.
6 Bell JI, et al. Allelic variation in the DR subergion of the human major histocompatibility complex. Proc Natl Acad Sci USA 1987:84:6243.
7 Merryman P, et al. Nucleotide sequence of a DRw 10 B chain cDNA clone J Immunol 1988; 140:2447.
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8 Svejgaard A, et al. HLA antigens and disease stati-stical and genetical considerations. Tissue Antigens 1974;4:95.
9 Kobayashi Y, et al. IgA nephropathy with clinical remission. Nippon Jinzo Gakkai Shi 1985; 27:1339.
10 王福庆等，人类白细胞抗原与原发性IgA肾病，中华肾脏病杂志 1990；6：297。
11 Huang CC, et al. HLA and Chinese IgA nephro-pathy in Taiwan, Tissue Antigens 1989;33:45., 百拇医药
单位：(中国人民解放军总医院肾内科，100853)陈香美 柏立群 程庆砾；(日本北里大学医学部)伊藤巧一 小幡文弥
关键词：基因频率；寡核苷酸；探针；肾小球肾炎，IgA
中华医学杂志920405
摘要 利用聚合酶链反应技术及特异性寡核苷酸作为探针检测了255名中国北方汉族正常人及30例IgA肾病患者的HLA-DR基因频率的分布、发现中国北方汉族正常人群以DR2、DR7、DR9的频率较高，而IgA肾病患者DRw12基因频率明显增高，并且发现DRw12基因频率在IgA肾病伴大量蛋白尿及反复肉眼血尿者中明显增高，认为DRw12等位基因可能与IgA肾病的遗传因素有关。
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IgA肾病是一组以系膜区具有IgA沉积为免疫病理特征的临床症候群，其临床表现多样化，组织学改变轻重不一，预后也相差甚远，其发病机理不十分清楚[1]。近年来，随着分子生物学技术的广泛应用，国际上认为IgA肾病多种表现形式可能与遗传因素有关[2，3]。我们利用聚合酶链反应(PCR)技术扩增DNA片段，利用30种特异性寡核苷酸(SSO)探针检测了255名中国北方汉族正常人和30例IgA肾病患者HLA-DR基因频率的分布，探讨了IgA肾病不同临床表现及病理改变程度的HLA-DR基因频率分布，从遗传学的角度分析和探讨了IgA肾病的发病机理。
材料与方法
一、一般资料
1、IgA肾病组：30例IgA肾病患者随机选自本科住院病人，经肾活检光镜及免疫荧光显微镜检确诊并除外紫癜性肾炎、乙肝相关性肾炎等继发性IgA肾病。患者均为北京地区汉族人。男19例、女11例，平均年龄29.8岁。
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2、对照组：255名北京地区汉族正常人(由军事医学科学院中心血站提供)。男133名、女122名，平均年龄31.2岁。
二、外周血淋巴细胞DNA的提取
取正常人及IgA肾病患者肝素抗凝血3ml，室温下2000r/min离心5分钟，吸取白细胞层，以1×TEN(1 mol/LTris*Hcl+5mol/LNaCl+0.5mol/LEDTA)以及10%SDS(十二烷基磺酸钠)混合振荡，加入蛋白酶K(PK1mg/ml)30μl，37℃振荡过夜。加入等量酚氯仿混合液充分混匀，4000r/min离心5分钟，反复2次，取上清加二倍无水乙醇混匀，可见DNA呈线状析出，离心弃上清后加70%乙醇洗2次，真空干燥20分钟，溶于300μl Tris盐酸EDTA液(TEpH8.0)，以紫外分光光度计检测DNA含量。
三、利用PCR技术扩增DNA片段
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取DNA样品1μg加10×高温聚合酶(Taq酶)缓冲液5μl、5mmol/LdNTP2μl、10μmol/L引物P1、P22.5μl，然后加双蒸水至终体积为49μl，充分混匀后，以98℃5分钟使DNA变性后加入1μl高温DNA聚合酶，覆盖40μl矿物油(Sigma产品)，在PCR-DNA扩增仪上开始以下反应：95℃100秒，55℃100秒、72℃180秒，重复29个循环，将扩增后的DNA片段在2%琼脂糖凝胶上电泳，检测扩增效果。
四、特异性寡核苷酸(SSO)探针的制备
采用Biosearch Cyclone DNA合成仪合成本组实验所用的30钟SSO[4]。合成SSO探针的引物序列为：P1：[5'-AGTGTCATTTCTTCAA(TC)GGGACGGA-3']及P2：[5'-CGCTGCACTGTGAAGCTCTC-3'][5]，均按文献报道合成[6，7]。SSO探针用32P-rATP标记，标记液为5×T4激酶缓冲液2μl、32P-rATP 1μl、T4激酶0.2μl、蒸馏水1.8μl、在尼龙膜上用6×SSC(0.9molNaCl+0.09mol柠檬酸钠)、10%SDS洗脱，制成探针备用。
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五、斑点杂交
将扩增后的DNA样品经0.4mol/LNaOH变性后点于尼龙膜上，80℃2小时后置于试管中，加入预杂交液，37℃30分钟后加入32P-rATP标记的SSO探针，37℃1.5小时后洗膜，取出自然凉干后压片，-70℃48小时后放射自显影。洗膜温度根据不同探针分别选择54℃、57℃、62℃。
六、统计学方法
本组x2值计算采用Yate's校正x2值计算公式，x2>3.84者按Fisher法求P值。Pc校正值等于P值乘以试验系统所比较的抗原数[8]。
附图 提取的DNA经PCR扩增后PCR产物在238bp处有明显条带
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结 果
一、中国北方汉族正常人及IgA肾病DRβ亚型等位基因分布的比较
提取的DNA经PCR扩增后在238bp处有明显条带(附图)中国北方汉族正常人群以DR2、DR7、DR9基因频率较高，DR2阳性者108例，基因频率18.7%，DR7阳性者74例(29%)，DR9阳性者63例(12.3%)。而IgA肾病DRw12阳性者11例(18.3%)、Dw2阳性者8例(13.3%)，DR7阳性者6例(10%)，二者所不同的是IgA肾病DRw12频率明显增高(27.3%)。
二、按照第三届亚洲大洋州组织相容讨论会HLA分型对IgA肾病与正常人HLA-DR频率比较
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与正常人群比较，IgA肾病的DRw12基因频率明显增高(表1)，统计学处理差异有非常显著意义(Pc<0.0008)。
三、IgA肾病不同临床表现与正常人群DRw12基因频率的比较(表2)
以24小时尿蛋白定量大于2.0g定为大量蛋白尿组、其与正常人比较DRw12基因频率明显增高(pc<0.0003)。反复肉眼血尿组DRw12频率也明显高于正常人(Pc<0.0011)。
四、不同程度临床症状患者DRw12频率的比较
大量蛋白尿组DRw12基因频率为58.3，非大量蛋白尿组DRw12基因频率为22.2，二组比较无显著差异(Pc<0.05)。肉眼血尿组DRw12基因频率为71.4，非肉眼血尿组DRw12基因频率为26.1，二组比较Pc<0.05，但校正P值>0.05。
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五、IgA肾病病理改变与HLA-DR基因频率的关系(表3)
按照Kobayashi等[9]的方法将组织病变按有无系膜细胞增殖、系膜基质增宽、粘连、全球硬化、新月体、小管病变、间质病变等7项计分为0～21分，以8分为标准为分两组，病理积分8分以上组DRw12基因频率为52.6%，高于对照组(9.1%)，但经过校正后Pc>0.05。
表1 IgA肾病与正常人HLA-DR抗原频率的比较 HLA抗原
IgA肾病组
对照组
x2值
P值
, 百拇医药
校正P值
相对风险
阳性数
频率
阳性数
频率
DR1
3
10
10
3.9
1.096
>0.05
, 百拇医药
>0.05
2.72
DR2
8
26.7
108
42.4
2.125
>0.05
>0.05
0.49
DR3
, 百拇医药 2
6.7
22
8.6
0.003
>0.05
>0.05
0.76
DR4
5
16.7
46
18
, 百拇医药
0.004
>0.05
>0.05
0.91
DRw11
3
10
30
11.8
0.0003
>0.05
>0.05
0.83
, 百拇医药
DRw12
11
36.7
20
7.8
20.127
<0.00006
<0.0008
6.80
DRw13
2
6.7
, 百拇医药 24
9.4
0.025
>0.05
>0.05
0.69
DRw14
5
16.7
26
10.2
0.588
>0.05
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1.76
DR7
6
20
74
29
0.681
>0.05
>0.05
0.61
DR8
3
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10
26
10.2
0.082
>0.05
>0.05
0.98
DR9
5
16.7
63
24.7
0.564
, 百拇医药
>0.05
>0.05
0.61
DR10
0
0
5
2
0.001
>0.05
>0.05
0.76
DR空白
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7
23.3
34
13.3
1.443
>0.05
>0.05
1.98
表2 IgA肾病不同临床表现与正常人DRw12频率比较
组别
n
阳性数
, 百拇医药
频率
x2值
P值
校正P值
相对风险
正常人组
255
20
7.8
大量蛋白尿组
12
7
58.3
, 百拇医药
28.73
<0.000026
<0.0003
16.45
肉眼血尿组
7
5
71.4
24.97
<0.000095
<0.0011
15.67
表3 IgA肾病病理改变与HLA-DR频率的关系
, 百拇医药
HLA抗原
病理记分<8 (n=11)
病理记分≥8 (n=19)
x2值
P值
校正P值
相对风险
阳性数
频率
阳性数
频率
DR1
, 百拇医药
2
18.2
1
5.3
0.255
>0.05
>0.05
0.25
DR2
3
27.3
5
26.3
, 百拇医药
0.138
>0.05
>0.05
0.95
DR3
1
9.1
1
5.3
0.126
>0.05
>0.05
0.56
, 百拇医药
DR4
3
27.3
2
10.5
0.459
>0.05
>0.05
0.31
DRw11
0
0
3
, http://www.100md.com
15.8
0.574
>0.05
>0.05
4.88
DRw12
1
9.1
10
52.6
3.967
<0.019
>0.05
, http://www.100md.com
11.1
DRw13
1
9.1
1
5.3
0.126
>0.05
>0.05
0.56
DRw14
1
9.1
, http://www.100md.com
3
15.8
0.001
>0.05
>0.05
1.88
DR7
3
27.3
3
15.8
0.081
>0.05
, 百拇医药
>0.05
0.5
DR8
1
9.1
2
10.5
0.255
>0.05
>0.05
1.18
DR9
3
, http://www.100md.com
27.3
2
10.5
0.459
>0.05
>0.05
0.31
DR10
0
0
0
0
0
, 百拇医药
>0.05
>0.05
1
DR空白
2
18.2
4
21.1
0.081
>0.05
>0.05
1.2
讨 论
, 百拇医药
HLA系统具有严格的遗传性，HLA-DR抗原是人类疾病的一个重要相关抗原，它主要存在于人B淋巴细胞、单核细胞及内皮细胞、与机体免疫调节功能十分密切，人类肾小球疾病与HLA-DR抗原相关联，IgA肾病的临床表现及HLA-DR抗原频率分布存在地域性及种族差异[1]，国外有人报道IgA肾病DR4频率明显增高[3]，国内有人利用微量淋巴毒细胞方法报道IgA肾病与DR7、DR4、DR5相关联[10]。为了从基因水平上探讨HLA-DR抗原与IgA肾病的关系，本组采用PCR技术扩增正常人及IgA肾病患者外周血淋巴细胞DNA片段，利用SSO探针检测了其HLA-DR基因频率，结果显示中国北方汉族正常人Dw2占21.2%、DR7占29.2%，DR9占24.7%，与日本伊藤氏等[4]用同样方法测定的日本正常人HLA-DR基因频率分布比较，中国人的DR7较日本人明显增高，说明中国人与日本人同属亚洲地区，大部分HLA-DR基因频率是一致的，但由于种族不同，个别基因频率分布存在差异。
, 百拇医药
按照第三届亚洲大洋州组织相容讨论会对HLA-DR的分型，本组所检测的IgA肾病中DRw12基因频率明显高于正常人，说明中国北方汉族人的IgA肾病以DRw12基因占优势。这一结果与台湾Huang[11]的结果相似，但与日本报道不同，日本报道IgA肾病以DR4最为常见[3]。说明在IgA肾病HLA-DR基因频率分布上可能也存在种族差异。本组实验还比较了大量 蛋白尿患者及反复肉眼血尿患者与正常人的DRw12频率，二者差异非常显著。目前关于肉眼血尿与IgA肾病预后的判断结论不一，因此，DRw12频率在肉眼血尿组增高可能与大量蛋白尿一样反映了IgA肾病病理改变的加重与DRw12有一定的关联。为此，我们比较了病理改变轻重两组IgA肾病DRw12基因频率的分布，结果病变重组DRw12频率较病变轻组有增高的趋势，经统计学处理无显著差异，所以DRw12与IgA肾病病理改变的关系尚不能作出结论，需增加检测例数。由上述结果看出IgA肾病的DRw12频率明显增高，提示DRw12与IgA肾病的遗传因素有关联，但是否DRw12为IgA肾病的遗传易感因素尚需进行IgA肾病患者的家系调查。
, 百拇医药
参考文献
1 黎磊石，等。我国的系膜性IgA肾病，中华肾脏病杂志 1989；5：49。
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, 百拇医药
5 Obata F, et al. Oligonucleotide genotyping as a method of detecting the HLA-DR2 (DRw15)-Dw2, DR2 (DRw15)-Dw12,DR4-Dw15and DR4-d “KT2”haptotypes in the Japanese population. Tissue Antigens 1989;33:550.
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9 Kobayashi Y, et al. IgA nephropathy with clinical remission. Nippon Jinzo Gakkai Shi 1985; 27:1339.
10 王福庆等，人类白细胞抗原与原发性IgA肾病，中华肾脏病杂志 1990；6：297。
11 Huang CC, et al. HLA and Chinese IgA nephro-pathy in Taiwan, Tissue Antigens 1989;33:45., 百拇医药